李强,齐楠,杨丽文,李华,王轶南

(大连海洋大学农业部海洋水产增养殖学重点开放实验室,辽宁大连116023)

黄海希瓦氏菌多克隆抗体部分特性的分析

李强,齐楠,杨丽文,李华,王轶南

(大连海洋大学农业部海洋水产增养殖学重点开放实验室,辽宁大连116023)

采用免疫学方法,以仿刺参Apostichopus japonicus“化皮病”病原菌——黄海希瓦氏菌Shewanella marisflavi AP629福尔马林灭活疫苗作为免疫原,对新西兰大白兔进行免疫,制备了高效价的多克隆抗体。通过间接酶联免疫、间接免疫荧光和免疫印迹等技术对多克隆抗体的部分特性进行了分析。结果表明:获得的多克隆抗体的效价为1∶32768;多抗与黄海希瓦氏菌标准菌株存在很强的阳性反应,与弧菌和气单胞菌、链球菌和大肠杆菌交叉反应很弱或不存在交叉反应;多抗不仅与菌体本身反应,与菌株表面的分泌物也发生特异性结合。免疫印迹结果显示,多克隆抗体与黄海希瓦氏菌AP629结合的抗原决定簇主要蛋白带有6条,相对分子质量分别为131 000、128 000、113 000、62 000、38 000和33 000,其中38 000和33 000蛋白条带的抗原性最强;与胞外产物结合的抗原决定簇清楚的蛋白条带主要有3条,相对分子质量分别为62 000、38 000和33 000,其中62 000蛋白条带的信号最强。

仿刺参;黄海希瓦氏菌;多克隆抗体

希瓦氏菌Shewanella是人畜共患的条件性致病菌[1-2],通常分离于淡水和海洋中,但同时也具有广阔的工业和环境保护方面的应用前景,因此越来越受到学者们的广泛关注。关于希瓦氏菌引发水产动物的疾病报道很少,陈偿等[3]曾报道海藻……