消岩汤药物血清对A549/DDP细胞凋亡的诱导作用*
2011-03-17贾英杰李小江
张 莹,贾英杰,杨 洁,李小江
(1.天津中医药大学第一附属医院肿瘤科,天津 300193;2.天津中医药大学 2007级硕士研究生,天津300193)
肿瘤细胞的多药耐药性(multid rugresistance, MDR)是肺癌化疗的重要障碍。化疗可以通过多种途径介导细胞凋亡来杀伤肿瘤细胞,因此肿瘤细胞对凋亡的耐受是多药耐药的一个重要机制[1]。前期研究证实,消岩汤含药血清对A 549及A549/DDP均有生长抑制作用,且能增强顺铂(DDP)对耐药细胞(A 549/DDP)的杀伤作用,具有耐药逆转作用[2]。本研究以人肺腺癌A549和A549/DDP细胞株为受试对象,研究了消岩汤荷瘤动物药物血清对细胞凋亡的影响,旨在进一步阐明消岩汤的抗耐药机制,为其应用于肿瘤的临床治疗提供更多的实验依据。
1 材料与方法
1.1 动 物
健康昆明种小鼠(KM)60只,SPF级,雄性,4~6周龄,体质量(20.99±1.87)g,购自天津市山川红实验动物科技有限公司,饲养设施 1级,动物质量许可证号:SCXK(津)2009-0001。
1.2 药 物
消岩汤组成:黄芪10 g,西洋参10 g,姜黄10 g,郁金10g,蕲蛇10 g,夏枯草10 g,生牡蛎10 g,白花蛇舌草10 g。规格100mL/瓶,由本院制剂室生产,生产时间 2009年 1月,批号 20090102。水煎浓缩剂制备方法参照《中药药物实验方法学》[3],将消岩汤于旋转蒸发器上浓缩成每毫升相当于原生药材 1.5 g的药液,冷却装入灭菌药瓶,置4℃冰箱备用[3]。
1.3 瘤 株
S180(腹水瘤)瘤株,由天津药物研究所提供。
1.4 试剂与仪器
RPMI1640培养基,Gibco公司产品;新生胎牛血清,杭州四季青生物工程公司产品;超净工作台,苏州净化设备公司产品;BB5060UVCO2细胞培养箱,德国Heraeus公司产品;流式细胞仪,美国BECKMAN-COULTER公司产品。
1.5 细胞系
人肺腺癌细胞系 A549,由天津市药物研究所提供;耐顺铂(DDP)肺腺癌细胞系A549/DDP,购自中国科学院肿瘤研究所。……
