双 宝，李 明，李 慧，矫洪涛，王 晴，刘忠华，向文胜*

（1.东北农业大学生命科学学院，哈尔滨 150030；2.东北农业大学司法鉴定中心，哈尔滨 150030）

白细胞介素-1（IL-1）是最早被发现的细胞因子之一，人们对它的认识已有三十多年了[1]。随着分子生物学和现代免疫学的发展，人们对IL-1的认识也在不断加深。目前认为IL-1不仅仅具有十分重要的免疫调节作用，而且和许多疾病的发生、发展有着十分密切的关系。特别是作为炎症反应中的一个关键因子，它在各类炎性疾病中的作用更不容忽视。大量的研究结果表明，人类的许多疾病都伴有局部或全身的IL-1水平升高[2-5]。IL-1Ra是第一个被发现的天然存在的细胞因子拮抗剂，是体内天然存在的拮抗IL-1生物活性的一种糖蛋白，由152个氨基酸组成，具有与IL-1Beta相似的结构，但结合于IL-1受体后不会引起IL-1效应[6]。它为人类进一步了解细胞网络的调节机制提供了新的思路。而其独特的生物学活性，为人类征服由于IL-1异常升高而导致的各类疾病提供了新的治疗手段。

本试验克隆、表达了IL-1Ra，为IL-1Ra重组菌的高密度发酵提供了菌株，为IL-1Ra的进一步研究应用奠定了基础。

1 材料与方法

1.1 胎盘组织

取新鲜的胎盘组织（由哈尔滨医科大学提供），总量200 mg。取出后置-70℃保存，一周内使用。

1.2 菌株和质粒

pGEM-T vector（购于Promega公司）；pBV220质粒载体和菌株E.coli XL1-Blue及E.coli DH5α是本实验室保存。

1.3 工具酶和试剂

总RNA提取试剂盒TRIzol Reagent、RT-PCR一步反应试剂盒（购自GIBCO-BRL公司）；DEPC（购自Invitrogen公司）；DNAmarker DL2000（购自大连宝生物）；pp20-低分子质量蛋白质marker II（购自Tiangen博迈德生物）；其他试剂均为Sigma公司或国产分析纯生化试剂。……