(重庆理工大学药学与生物工程学院，重庆 400050)

川东獐牙菜 Swertia davidi Franch.又名水灵芝，属龙胆科獐牙菜属植物，为民间传统中草药，主要化学成分有环烯醚萜类、三萜类、黄酮类和酮类，临床用于治疗黄疸型肝炎、痢疾等[1]。徐康平等[2－3]报道了测定川东獐牙菜中多种成分含量的高效液相色谱法及其药材指纹图谱研究，笔者在此基础上建立了川东獐牙菜中苦龙苷的含量测定方法，现报道如下。

1 仪器与试药

Waters高效液相色谱仪，包括Waters 1525型二元泵，Waters 2487型紫外检测器;Breeze液相色谱工作站。苦龙苷对照品(本试验室自制，经紫外、红外、质谱和NMR光谱鉴定为苦龙苷，含量为99.75%);川东獐牙菜药材(购于重庆市桐君阁药材市场，由重庆理工大学傅善权副主任技师鉴定为龙胆科獐牙菜属植物川东獐牙菜 Swertia davidi Franch.);甲醇为色谱纯，水为三蒸水，并经 0.45 μm滤膜滤过。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验[4－5]

色谱柱:Hypersil C18柱(150 mm ×4.6 mm，5 μm);流动相:甲醇－水(50∶50);检测波长:227 nm;流速:1 mL/min;柱温:室温。在此色谱条件下，对照品溶液与供试品溶液的色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图

2.2 溶液制备

精密称取一定量苦龙苷对照品，用甲醇溶解，使其质量浓度为0.33 g/L，用 0.45 μm 滤膜滤过，即得对照品溶液。称取粉碎的川东獐牙菜全草1.0 g，加10 mL甲醇，超声处理30 min，滤过，收集滤液，滤渣加8 mL甲醇，超声处理30 min，同法提取2次，收集、合并滤液，吸取滤液1 mL，用0.45 μm滤膜滤过，即得供试品溶液。

2.3 方法学考察

线性关系考察:取对照品溶液，分别进样 2，4，6，8，10，12 μL，测定峰面积。以峰面积(Y)对进样量(X)进行线性回归，得苦龙苷回归方程 Y=3×106X－320 473，r=0.999 6(n=6)。结果表明，苦龙苷进样量在0.33～3.96 μg范围内与峰面积线性关系良好。……