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消渴益肾方对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用的研究

2011-03-01张洁

中国中医基础医学杂志 2011年6期
关键词:血糖糖尿病手术

张 洁

糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病(diabetes Mellitus,DM)最常见的并发症,也是导致终末期肾病的主要原因,目前尚无特效的治疗办法。以中医理论为基础,用中医药对糖尿病肾病进行防治,取得了一定的效果,显示出广阔的前景。消渴益肾方是我院的协定方,临床应用多年,效果良好。在临床应用的基础上开展了实验研究,采用单侧肾切除合并STZ诱导的DN模型,观察其对主要生化指标的影响,探讨其作用机制,为临床应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 纯种雄性 Wistar大鼠,体重180g~220g,周龄6~8周,由山东大学实验动物中心提供(动物合格证号SCXK(鲁)120030012)。

1.1.2 药物 消渴益肾方(黄芪30g,熟地黄20g,山药 12g,山茱萸 12g,枸杞子 12g,茯苓 20g,白术10g,泽兰10g,水蛭6g),由潍坊市中医院药剂科提供。以上中药加10倍水浸泡2h煎煮,水沸后小火煎30min,过滤取汁;第2次加8倍水,重复上述操作,合并滤液浓缩成200%的药液(每毫升药液含2 g生药),冷却后密封4℃保存。缬沙坦(80 mg/片,诺华公司生产),实验动物用剂量:20 mg/kg,临用前用蒸馏水配制成混悬液,4℃保存。

1.1.3 试剂及仪器 链脲佐菌素(STZ)购自Sigma公司;大鼠血清转化生长因子 β1(TGF-β1)ELISA试剂盒,BPB公司(批号70621S);大鼠血清纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)ELISA试剂盒,BPB公司(批号2005060113);空腹血糖(FPG)测定试剂盒,德赛诊断系统有限公司;血胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)测定试剂盒,北京利德曼生化技术有限公司。7170S型自动分析仪,日本日制产业株式会社。

1.2 方法

1.2.1 动物模型的建立 按 Anderson等[1]建立的方法,将50只大鼠戊巴比妥钠腹腔麻醉(40mg/kg)后,左侧卧位固定,在脊柱与肋骨交界处备皮,剪开皮肤后钝性分离肌肉层,用手将右肾抵出切口,止血钳夹住肾血管,钝性剥离肾包膜,保留肾上腺,结扎血管后将右肾摘除,分别缝合肌肉和皮肤。……

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