缑敬轩, 董文宾, 曾 桥

(1.浙江温州轻工研究院， 浙江 温州 325003；2.陕西科技大学生命科学与工程学院， 陕西 西安 710021)

0 引 言

几丁质(Chitin)又称甲壳素、甲壳质, 是以β-1,4-N-乙酰-D-氨基葡萄糖为基本单位的直链多聚物.几丁质广泛存在于甲壳纲动物虾、蟹的甲壳，昆虫的甲壳，真菌(酵母, 霉菌)的细胞壁中，是地球上蕴藏最丰富的有机物之一，在虾蟹壳中的含量高达15%～30%[1].

几丁质的降解产物几丁寡糖、壳聚糖和N-乙酰氨基葡萄糖具有抗癌、抗菌、调节免疫和植物生长等作用，在医药、农业和食品工业等方面具有广阔的应用前景和经济价值[2].目前这些产品主要用化学降解的方法来制取，造成比较严重的环境污染.酶降解法具有条件温和、得率高且不污染环境等优点[3]，目前所筛选的产几丁质酶菌株产酶量低，且酶活不稳定，这是微生物产几丁质酶应用中所面临的主要问题.筛选产酶量高的菌株，寻找合适的发酵工艺，是微生物产几丁质酶研究的当务之急.由于沿海地区每年生产大量的虾蟹，因此目前筛选用的样品主要采自沿海地带[2,4,5]，而从内陆淡水环境中采集样品并筛选降解虾蟹壳中几丁质的菌株则不多见.本研究从秦岭山脉中有虾蟹分布的河流采集土壤，从中筛选到产几丁质酶的高产菌株并对其进行了初步鉴定.

1 材料和方法

1.1 材料

土壤样品采自源于秦岭的沣河、汉江等河道周围.

1.2 培养基

富集培养基(g/L)：蟹壳粉30.0，NH4NO35.0，土壤浸提液500 mL，自然pH.

分离和筛选培养基(g/L)：琼脂粉14～20，KH2PO40.3，K2HPO40.7，FeSO4·2H2O 0.01，MgSO4·7H2O 0.5，ZnSO40.001，胶体几……