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黄芩苷酶解影响因素及其动力学参数的研究

2011-02-20施春阳齐香君端木艳荣钱卫东

陕西科技大学学报 2011年5期
关键词:影响

施春阳, 齐香君, 端木艳荣, 钱卫东

(1.陕西科技大学生命科学与工程学院, 陕西 西安 710021; 2.陕西博森生物制药股份集团有限公司, 陕西 西安 710118)

0 前 言

黄芩苷和黄芩素是黄芩(ScutellariabaicalensisGeorgi)中的主要有效成分,具有抗氧化、抗菌消炎、抗病毒、抗肿瘤及止血安胎等药理作用[1-4].黄芩苷在人体内吸收差、转化率低,药代动力学研究[5]表明:其口服制剂需经胃肠道菌丛酶解或肝微粒体转化为黄芩素后被吸收.黄芩素的生物利用度和药理活性均高于黄芩苷,但在黄芩中含量低、易被氧和碱破坏、生产成本高,从而使其应用受到了很大的限制.近几年研究[6,7]显示:利用β-葡萄糖苷酶酶解黄芩苷制备黄芩素应是可行的方法,可以有效扩大黄芩素的来源.因此,笔者对黄芩苷酶解的影响因素进行了考察,并对酶解过程的动力学进行了初步探索.

1 仪器与材料

752 紫外可见分光光度计,上海光谱仪器有限公司;760CRT 双光束紫外可见分光光度计,上海精密科学仪器有限公司; CS501-SP 数显恒温器,重庆四达试验仪器有限公司.

黄芩苷:自制,纯度>95 %(HLPC测定);β-葡萄糖苷酶:自制酶液(酶活830 U);黄芩素:纯度>98 %(HLPC测定);其他实验试剂均为分析纯.

2 方法与结果

2.1 酶液制备及酶活测定

将1 mL酶液1 min内酶解底物生成1μg葡萄糖,定义为1个酶活单位(U).酶液由黑曲霉固体培养,经pH 4.8缓冲溶液提取、离心,取上清液即得[8,9],经DNS法[10]测定酶活为835 U,保存一周复测为830 U,即短时间保存酶活稳定.

2.2 黄芩苷酶解率测定方法

2.2.1 酶解样品液的制备

精密称取0.100 g黄芩苷于三角瓶中,加……

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