佘巍巍 陈 峰 罗 淼 (桂林医学院附属医院呼吸内科，广西 桂林 541001)

哮喘是多种炎性细胞、炎症介质参与的慢性气道炎症性疾病，哮喘的发病机制非常复杂，至今尚未完全阐明。神经生长因子(NGF)不仅作用于神经系统，也影响机体免疫和造血系统，与变态反应性和炎症性疾病的发病有关。近年来研究发现哮喘及其他许多致敏性疾病的发病可能与NGF直接相关〔1，2〕，目前已在支气管哮喘的动物模型上证实NGF在哮喘炎症的发生发展和维持中起着重要的作用〔3〕。本研究通过检测各组大鼠肺组织内NGF、嗜酸性粒细胞及TNF-α的表达量的变化，判断NGF是否通过调节TNF表达参与哮喘发病机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物和主要试剂 清洁级雌性SD大鼠，非卵蛋白饲养，按随机数字表法将小鼠随机分为分为对照组(A组)、哮喘组(B组)和 NGF阻断组(C组)，每组10只。鸡卵清蛋白(OVA，V级，由美国Sigma公司提供)，抗-NGF抗体(由武汉博士德生物有限公司提供)。

1.2 动物制模 A组:致敏过程以PBS代替OVA注射，激发过程以盐水雾化吸入，相关参数与B组相同;B组哮喘模型的构建方法于实验第1、第14天致敏，即卵白蛋白20 μg由1 mg氢氧化铝乳化，总体积200 μl，腹腔注射。第21～27天，将大鼠置于密闭容器内，以超声雾化器雾化3%OVA盐水气溶胶吸入激发，每天1次，每次30 min。C组哮喘模型建立同哮喘组，但于每次激发前3 h，先经鼻滴入抗大鼠β-NGF抗体(稀释1∶50)50 μl，每日 1 次，连续 7 d。

1.3 各组大鼠哮喘发作情况观察与评分 最后一次激发后5 min，采用评分法比较各组动物在激发后的反应情况:无发作者计0分;仅出现轻度呼吸急促，无躁动不安和发绀者计1分;明显呼吸急促、躁动不安和发绀者计2分;呼吸极度困难，并出现俯伏不动、反应迟钝者计3分。……