刘 宇 刘保安 (中南大学湘雅基础医学院病理学系，湖南 长沙 410078)

胰腺癌是消化道常见的恶性肿瘤之一，多发生于胰头部。腹痛及无痛性黄疸为胰头癌的常见症状。癌肿转移在早期即可出现，对于胰腺癌临床又缺乏早期诊断的有力手段，采用手术切除方式只有10%～15%的病人在确诊后可以根治性切除，况且肿瘤患者5年存活率也只有5% ～20%〔1〕。胰腺癌淋巴结转移对于手术治疗和预后是至关重要的因素。近年来发现，Periostin(PN)的过表达与肿瘤的恶性程度、侵袭性和转移性有密切关系〔2，3〕。本文将利用ELISA技术探讨胰腺癌血清PN水平与淋巴结转移的相关性。

1 资料与方法

1.1 试剂与设备 人PN重组蛋白、兔抗人PN mAb、兔抗人PN pcAb、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG(IgG-HRP)和牛血清白蛋白(BSA)(R＆D 公司)，3，3'，5，5'-四甲基联苯胺(上海江莱生物科技有限公司)。雷勃MK3 Multiskan酶标仪、THERMO Wellwash 4 MK2全自动洗板机(Thermo公司，芬兰)。

1.2 标本采集 所有受试者均根据诊断标准进行确诊，并分组处理，诊断依据:(1)临床表现为腹痛、黄疸和消瘦;(2)实验室检查:①一般血清生化学检查;②胰腺癌血清学标记物免疫学检查:具体包括:糖链抗原19-9(CA19-9)，癌胚抗原(CEA)，胰胚抗原(POA)、胰腺癌特异抗原(PaA)及胰腺癌相关抗原(PCAA)检测指标;③影像学检查:B超、CT、磁共振成像(MRI)进行胰腺癌普查、筛选、诊断、确诊，以供分组。检查结果其中健康成人31例(自愿健康体检者)，胰腺癌患者18例和有远处转移的胰腺癌患者18例，采集67例受试者的血清样本，收集血清后，迅速离心10 min，－20℃保存备用。

1.3 ELISA方法

1.3.1 操作 首先采用棋盘滴定法确定最佳浓度，结果表明:在包被抗体浓度1.0 μg/ml，检测抗体浓度1∶1 000比例时，标准曲线线性关系佳。……