大肠杆菌SOD高产菌的诱变选育及产酶条件优化
2011-01-24丁林
沈阳化工大学学报 2011年1期
丁林
(沈阳化工大学环境与生物工程学院,辽宁沈阳110142)
超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase简称SOD,EC 1.15.1.1)是广泛存在于生物体内的一种金属酶,在生物体内作为一种超氧化物阴离子清除剂而起着重要的作用.超氧阴离子与人类及动植物的机体衰老、肿瘤发生和自身免疫性疾病等有关,由于SOD能专一清除超氧阴离子,因此,它可以防御超氧阴离子的毒性,维持细胞正常的生理代谢,对机体具有抗衰老、抗肿瘤、抗辐射、抗缺血、提高免疫力等保护作用,被专家称为21世纪最有前途的药用酶.在医药、食品、日化产品等领域有着非常广泛的应用前景[1-3].
目前SOD产品主要从动物血液及脏器中提取,容易受原料价格和血源外源性感染的非安全性等因素限制,无法大量生产和被广泛使用.而微生物资源丰富,易于大量培养,还可通过选育优良菌种来提高产酶率[4],是生产SOD的最好原料.国内外有关微生物SOD研究报道较多的是酵母菌、霉菌,而有关细菌SOD的研究报道较少[5-6].紫外线诱变育种是常用的育种方法,具有简便、快速和高效的特点,是菌种选育中最常采用的技术手段.故本文以大肠杆菌为出发菌株,通过紫外线诱变育种筛选出SOD高产菌株,以该菌株作为目的菌株进行液体发酵培养制备SOD,并对产酶条件进行优化.旨在为生产SOD提供新原料.
1 材料和方法
1.1 出发菌株
大肠杆菌(Escherichia coli),我院微生物实验室提供.
1.2 培养基
斜面培养基(g/L):牛肉膏5,蛋白胨10,NaCl 5,琼脂20.121℃灭菌20 min.
分离培养基:灭菌的斜面培养基加过……
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