于 音,赵兴利*,田 宇,邵佳甲,郭永川,付 尧,梁前垒,李衍鑫

(1.吉林大学中日联谊医院神经外二科,吉林 长春 130033;2.长春职业技术学院)

大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞定向诱导分化及免疫组化鉴定

于 音1,赵兴利1*,田 宇1,邵佳甲2,郭永川1,付 尧1,梁前垒1,李衍鑫1

(1.吉林大学中日联谊医院神经外二科,吉林 长春 130033;2.长春职业技术学院)

目的建立体外分离、培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法,体外诱导其向神经元样细胞方向分化。方法应用细胞培养技术从大鼠股骨、胫骨中分离、纯化骨髓间充质干细胞并在体外进行培养,以形态学方法鉴定间充质干细胞,在倒置显微镜下观察细胞的形态特征,利用含10 ng/ml bFGF的LG-DMEM及含200μ mol/L BHA、2%DMSO的无血清DMEM诱导其向神经元样细胞分化,并通过免疫组化方法鉴定。结果经原代及传代培养的骨髓间充质干细胞呈梭形,类似于成纤维细胞;成神经元诱导24 h后,多数MSCs变为典型的神经元样细胞,胞体向胞核收缩并有较多的长突起,免疫组化显示神经元特异性标志NSE、神经巢蛋白Nestin染色阳性。结论体外成功的进行了MSCs原代及传代培养,细胞生长稳定、增殖迅速并可多次传代,经诱导后具有向神经元样细胞分化潜能。

骨髓;间充质干细胞;诱导;大鼠;分化

(Chin J Lab Diagn,2010,14:0991)

骨髓间充质干细胞是存在于骨髓组织中多种干细胞的混和体,因其具有取材方便、扩增迅速、可自体移植并且具有多分化潜能等特点[1,2]近年来越来越受到关注。MSCs与神经组织修复、骨、软骨组织修复、肌组织、肌腱组织修复以及皮肤创面愈合等都有很密切的关系。……