李金龙,耿 力,韩 刚,贾明库

(吉林大学第二医院普通外科,吉林长春 130041)

CpG ODN诱导人PBMC增殖的体外实验研究

李金龙,耿 力,韩 刚,贾明库*

(吉林大学第二医院普通外科,吉林长春 130041)

目的研究CpG ODN在体外刺激人PBMC的增殖情况。方法分别以肿瘤抗原(Ag)、白细胞介素-2(IL-2)和CpG ODN单独或联合刺激正常人和肿瘤患者PBMC,并对其增殖活性进行测定。结果以CpG ODN刺激人PBMC组的细胞增殖活性明显高于对照组(P＜0.05)。结论CpG ODN、IL-2与肿瘤抗原共同刺激能有效提高人PBMC的增殖活性。

CpG ODN;人外周血单核细胞

(Chin J Lab Diagn,2010,14:0037)

近年来肿瘤的生物治疗研究较多,并取得了一定的疗效与进步。CpG ODN具有激活宿主免疫系统的能力,可刺激机体活化对肿瘤的先天免疫并增强抗原递呈细胞介导的获得性免疫,在疫苗佐剂的设计以及抗肿瘤免疫治疗中显示出良好的应用前景[1]。本文通过观察CpG ODN与IL-2、肿瘤冻融抗原共同刺激人PBMC在体外的增殖情况,为进一步进行相关肿瘤免疫治疗奠定基础。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 病例选择 分别选取本院健康志愿者和结肠癌患者各5人进行采血20 ml,并在2 h内分离。

1.1.2 肿瘤细胞株、CpG2006和IL-2 人结肠癌细胞株SW1116购自吉林省肿瘤研究所;CpG 2006由上海生工生物技术服务公司合成;IL-2购自长生基因药业股份有限公司。

1.2 方法

1.2.1 人PBMC的分离 每份血样中加入等量生理盐水混匀稀释,离心。分离出离心分层后单个核细胞层,另加RPMI1640后离心,洗涤2次。计算活细胞百分数＞95%。

1.2.2 肿瘤抗原的制备 SW111细胞培养、传代。细胞呈指数期生长时,调细胞浓度1×107/ml,共计8.8 ml。放入液氮中10 min,室温融化,反复5次。……