王治方,郭成留,薛晓波,徐引弟,朱文豪,李建林,张玉杨

(1.河南省农业科学院畜牧兽医研究所,河南 郑州 450002;2.河南省淇县永昌公司,河南 淇县 456750)

猪瘟是威胁我国养猪业健康发展的重要疾病因素之一,国内对猪瘟的控制主要依靠疫苗的免疫接种,业内对猪瘟的免疫程序研究报道很多,但也存在分歧。在生产实践中,对猪瘟超前免疫的分歧最为明显,一部分养殖场表示超前免疫对预防猪瘟(特别是猪瘟疫区)是一种很好的免疫方法;部分养殖场认为超前免疫效果不明显,操作起来费时、费力,还经常发生过敏死亡现象。为了验证猪瘟超前免疫的效果,课题组作了以下试验,报告如下。

1 材料与方法

1.1 试验动物 妊娠母猪:品种、胎次、预产期相同的健康母猪3头,分别编号为A、B、C,产前30 d经血清学检验,伪狂犬gE抗体阴性、猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟抗原阴性。

试验仔猪: 3头试验母猪所产相应仔猪(母猪 A 产 12头 ,编号分别为 A1、A2、A3…A12;母猪B产12 头,编号分别为B1、B2、B3…B12;母猪C产 10头,编号分别为 C1、C2、C3…C10),每窝仔猪随机分为超免组和非超免组,超免组包括A4 、A5 、A6 …A12;B7、B8 、B9 …B12;C6 、C7 、C8…C10。非超免组包括 A1、A2、A3;B1、B2、B3…B6;C1、C2、C3…C5。

1.2 试验用疫苗 ST猪瘟活疫苗(传代细胞源),由广东永顺生物制药有限公司生产(批号871)。零免猪瘟活疫苗 ,由广东永顺生物制药有限公司生产(批号816)。猪瘟淋脾弱毒组织苗,由广东永顺生物制药有限公司生产(批号756)。

1.3 检测试剂 猪瘟抗体检测试剂盒(阻断ELISA),美国IDEXX公司生产(批号43220-R941)。

1.4 试验器材 3000 g台式离心机、微量移液器(50～ 1000μL)、酶标仪(美国 ELX800)、微量振荡器、恒温培养箱等。

1.5 免疫方案 超免组的免疫方案:0日龄,零免猪瘟活疫苗1头份/份;40日龄,猪瘟淋脾弱毒组织苗1头份/份。

非超免组免疫方案:20日龄,ST猪瘟活疫苗5头份/份;60日龄,猪瘟淋脾弱毒组织苗1头份/份。

试验猪其他疾病的防疫均按该场原有免疫程序执行。

1.6 样品采集 所有试验猪只分别于20、30、40、50、60、70、90日龄采集血液样品,分离血清,-20℃冻存,试验结束后统一检测抗体效价。

1.7 效价检测 试验操作步骤严格按试剂盒说明书操作。

2 试验结果

2.1 判定标准 猪瘟抗体检测试验(阻断ELISA)成立条件:阴性对照的平均OD450值应大于0.50;阳性对照的阻断率应大于50%;试验方法有效。样品阻断率=(阴性对照平均OD450-样品OD450)/阴性对照平均OD450×100%

被检样品的阻断率大于或等于40%,该样品为猪瘟抗体阳性;样品阻断率小于或等于30%,该样品为阴性(无猪瘟抗体存在);样品阻断率在30%～40%,该样品为可疑。

2.2 结果 A、B、C母猪所产仔猪各时期的猪瘟抗体效价分别见表1、表2、表3;A、B、C三组猪瘟超前免疫与非超前免疫猪瘟抗体曲线图分别见图1、图2、图3。

2.3 结果分析 通过方差分析显示,母猪A所产仔猪超免组和非超免组在20日龄猪瘟抗体效价差异不显著(P＞0.05);在30、40、50日龄二者差异极显著(P＜0.01),超免组效价明显高于非超免组;在60、70、90日龄二者差异不显著(P＞0.05)。母猪B所产仔猪超免组和非超免组在20、30日龄猪瘟抗体效价差异不显著(P ＞0.05);在 40、50、60、70、90 日龄二者差异极显著(P＜0.01),超免组效价明显高于非超免组。母猪C所产仔猪超免组和非超免组在20日龄猪瘟抗体效价差异不显著(P＞0.05);在30、40、50 、60、70、90 日龄二者差异极显著(P ＜0.01),超免组效价明显高于非超免组。

表1 A母猪所产仔猪各日龄猪瘟抗体效价

表2 B母猪所产仔猪各日龄猪瘟抗体效价

表3 C母猪所产仔猪各日龄猪瘟抗体效价

3 讨论

3.1 20日龄A、B、C猪瘟超前免疫组和非超免组猪瘟抗体效价差异不显著,但在30日龄后超免组均明显高于非超免组,充分说明猪瘟超前免疫的真正价值体现在仔猪断奶后的一段时期,而这一阶段往往是养殖场(特别是猪瘟污染场)最危险的时期。笔者认为猪瘟超前免疫是控制断奶仔猪感染猪瘟的十分有效的免疫方法。

3.2 超前免疫也称乳前免疫、零时免疫,即仔猪出生后去除体表黏液,颈部消毒后肌肉接种猪瘟疫苗,与母猪隔离1.5～2 h后再吃初乳的免疫方法。该免疫方法操作难度不大,但要求具体操作者有很高的责任心,坚决避免仔猪吃乳后免疫,造成免疫失败。在生产实践中,遇到这种情况可做上标记进行猪瘟常规免疫。试验中超免组有个别猪只,笔者就怀疑有这种情况发生。

3.3 通过试验不难看出,超前免疫虽然能明显提高仔猪前期的猪瘟抗体水平,但到40日龄没有得到理想水平,通过40日龄的常规加强免疫,抗体效价有了明显升高,得到较为理想水平。可见,在生产实践中,猪瘟超前免疫需要配合1～2次常规免疫,才能使猪群得到理想的免疫效果。

3.4 试验中使用的零免猪瘟活疫苗,很大程度上减少了猪瘟超前免疫常见的过敏反应,这种免疫方法值得推广应用。