张奎渤，张加芳，郑召民，刘 辉，张劲军，王建儒，王太平，刘先国

椎间盘退变及其继发的一系列疾病是导致慢性腰腿痛的重要原因[1,2]。目前，以修复/再生退变椎间盘为目的的各种生物治疗策略，如注射生长因子、基因治疗、细胞移植（髓核细胞/干细胞）等方法是国内外该领域的研究热点。然而，为了验证各种治疗手段的效果，现有的绝大部分研究均是将椎间盘生化成分的改变或影像学上的改善作为标准，缺乏与临床症状密切相关的、更具实际意义的评价方法[3,4]。在本研究中，我们分别利用大鼠正常与退变的椎间盘髓核组织，建立实验性髓核突出致神经根性疼痛的动物模型，通过动物的行为学测试与免疫组化分析，探讨椎间盘退变与疼痛之间的直接关系，并为验证各种生物治疗的效果提供一个较好的疼痛评价模型。

1 材料与方法

1.1 实验动物选择与分组

健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠72只，体重200～250 g，由中山大学实验动物中心提供。为保持大鼠的生物节律，饲养室每天早晨8：00至20：00开灯，其余时间熄灯。行为学测试均在9:00至18:00之间进行。所有实验操作（包括饲养条件）严格按照实验动物研究纲要及所在单位动物伦理委员会的要求实施完成。

采用随机方法将实验动物分为4组：空白对照（NC）组（n=18），假手术对照（SC）组（n=19），正常髓核（N-NP）组（n=16），退变髓核（P-NP）组（n=19）。每组中各有8只用于行为学测试，8只用于免疫组化取材分析，其余用于椎间盘退变病理学染色与MRI评价。

1.2 椎间盘退变模型的建立与评价

在P-NP组，经腹腔注射戊巴比妥(50 mg/kg)麻醉后，触诊大鼠尾椎根部，依次定位Co 4/5及Co 8/9椎间隙并标记。……