韩 辉,吴丽敏,杨文明,汪美霞,董 婷,汪 瀚,韩明向

脑卒中是一种常见疾病,根据发病原因不同,分为缺血性与出血性卒中,是发病率、病死率、致残率和复发率很高的神经系统疾病,在我国人群中脑卒中发病率以缺血性卒中为主[1]。参芎嗪注射液由人参、川芎嗪两味药物组成,具有益气活血的功效。本研究通过复制脑缺血损伤的大鼠模型,探讨参芎嗪注射液对脑缺血损伤的干预作用。

1 材料与方法

1.1 一般材料 参芎嗪注射液由安徽天洋药业公司提供。人参与川芎嗪按9∶1配置,每支40 mg(华北制药厂生产)。FA 2104上器电子天平:上海天平仪器厂;HP-8453紫外可见分光光度计:美国惠普公司;美国Beckmen-CX7全自动生化分析仪;BS-634血小板聚集仪;由北京生化仪器厂生产。

1.2 动物 健康成年W istar大鼠48只,雌雄各半,体重250 g～280 g,由河南医科大学实验动物中心提供。

1.3 动物分组 各组大鼠实验前在动物室正常饲养1周。实验时随机分为假手术组、模型组、川芎嗪注射液组(10 mg/kg)、参芎嗪注射液组(10mg/kg)。实验时,各组动物均每日腹腔注射给药1次,假手术组及模型组给予等体积生理盐水,连续给药2周,于末次给药后24 h进行各项指标的检测。

1.4 大鼠局灶性脑梗死模型复制[2]参照Zea Longa的线栓法建立fCIRI模型。钝性分离、暴露左侧或右侧颈总动脉(common carotid artery,CCA)、颈外动脉(external carotid artery,ECA)及ECA的分支、颈内动脉(internal carotid artery,ICA),结扎ECA及其分支。术后参考Zea longa的五分制评分标准对动物进行神经缺损症状评分。模型组大鼠和各治疗组大鼠造模后≥1分,假手术组为0分,模型全部复制成功。

1.5 血液流变学和脑含水量的检测 末次给药24 h后,以氯胺酮100mg/kg腹腔注射麻醉,由腹主动脉取血,使用血液流变仪检测全血黏度、红细胞聚集指数等血液流变学相关指标。后断头处死,开颅取造模侧脑组织,去除嗅脑、小脑、脑干后称重,计算脑指数[脑指数=(脑重×100)/体重][3]。取大脑半球称湿重,然后放入110℃烤箱中烤至恒重,称其干重,计算脑含水量[脑含水量=(脑湿重-脑干重)/脑湿重×100%]。

2 结 果

2.1 参芎嗪注射液对脑缺血大鼠血液流变学的影响 模型组与假手术组比较,模型组的血液流变学指标显著上升(P＜0.01)。参芎嗪组低切全血黏度、高切全血黏度、红细胞聚集指数、血浆黏度较模型组显著下降(P＜0.05或P＜0.01),其中参芎嗪注射液组的血浆黏度下降较川芎嗪组低(P＜0.05)。详见表1。

表1 参芎嗪注射液对脑缺血大鼠血液流变学的影响(±s)

表1 参芎嗪注射液对脑缺血大鼠血液流变学的影响(±s)

组别n 全血黏度(m Pa◦s)低切高切血浆黏度mPa◦s红细胞聚集指数假手术组12 7.62±0.80 23.14±2.01 1.44±0.12 2.56±0.58模型组12 10.05±0.761)38.96±2.801)3.32±0.151)6.56±0.781)川芎嗪组12 8.92±0.513)34.97±1.672)2.19±0.302)3.77±0.453)参芎嗪组12 8.63±0.383)32.11±3.123)1.47±0.333)4)3.54±0.573)与假手术组相比,1)P＜0.01;与模型组相比,2)P＜0.05,3)P＜0.01;与川芎嗪组相比,4)P＜0.05

2.2 参芎嗪注射液对脑缺血大鼠的脑指数及脑含水量的影响脑缺血模型组脑指数及脑含水量与假手术组相比较具有统计学意义(P＜0.01),提示脑缺血时脑含水量显著增加;参芎嗪注射液组与脑缺血模型组相比,脑指数均显著减少(P＜0.05或P＜0.01),与川芎嗪组相比脑指数及脑含水量也降低。详见表2。

表2 脑缺血大鼠脑指数及脑含水量比较(±s)

表2 脑缺血大鼠脑指数及脑含水量比较(±s)

组别n脑指数(%)脑含水量(%)假手术组12 0.57±0.05 72.64±6.52模型组12 0.68±0.071)86.17±7.451)川芎嗪组12 0.61±0.052)76.82±5.583)参芎嗪组12 0.59±0.022)75.16±6.663)与假手术组相比,1)P＜0.01,与模型组相比,2)P＜0.05,3)P＜0.01

3 讨 论

缺血性脑卒中临床多表现为血瘀阻塞经络、清窍,使气血运行受阻,肢体脑髓失养而出现半身不遂、不语等症。痰浊、寒凝、气虚、气滞、阴虚均可造成血瘀。李杲在《医学发明》中指出:“中风者,非外来风邪,乃本病气也。凡人年逾四旬,气衰者,多有此疾。壮岁之际,无有也。若肥盛,则间有之,亦形盛气衰如此”。气为血之帅,气行则血行,气不行则血瘀滞,气不行者,或为气虚,或为气滞,缺血性脑卒中以气虚血瘀最为常见。人参大补元气、益气生血;川芎活血化瘀,温通血脉;川芎嗪为川芎的主要成分。本研究通过观察以人参、川芎嗪组成的最简单的益气活血方对脑缺血的保护作用机制,进一步证实益气活血法在脑缺血治疗中的重要作用。

血液流变学改变与脑梗死的发生、发展有密切的关系[4]。以黏度为中心的血液流变学可以证明人体的许多病理改变,脑血栓形成以及其他部位大小血栓的产生、微循环障碍等都与血流改变有关[5]。决定血液流变学的主要因素包括全血和血浆黏度、红细胞聚集性等[6]。红细胞聚集指数及血浆黏度变化被认为是用来指导治疗脑缺血、判定药物疗效的重要参数之一[7]。血流动力学异常改变,则可导致血小板的黏滞和聚集,形成血液流变学的恶性循环[8],加重脑缺血损伤。因此迅速而有效地纠正血液流变学异常,是减轻脑缺血损伤的关键。本实验中观察到局灶性脑缺血状态下,脑缺血模型组大鼠全血黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数明显升高。参芎嗪注射液给药后有一定程度的恢复。说明参芎嗪注射液具有改善血液流变学异常的作用,从而改善微循环。

脑水肿是缺血性脑血管病基本病理变化之一,是反映脑缺血的重要指标[9]。脑含水量及脑指数在一定程度上能反应脑水肿的情况[10]。本文采用线栓法复制大鼠脑缺血模型,由于组织严重缺氧,微循环血流障碍,最终导致供血区脑组织水肿,即脑组织含水量增加,进而使脑指数增加,参芎嗪注射液给药后能明显降低脑指数,减轻脑水肿,提示参芎嗪注射液具有减轻脑水肿的作用。

现代研究认为,人参能增加脑缺血区血流量,减轻脑水肿,降低大鼠全血黏度、血浆黏度,并能抑制兔血小板聚集,降低血液凝固性[11],保护缺氧脑损伤;川芎嗪可扩张脑血管,增加脑血流量,降低脑血管外周阻力[12],提高血小板中环磷酸腺苷(cyclic adenosinemonophosphate,cAM P)含量,降低血栓素A2(thromboxane A2,TXA2)活性;降低血小板表面活性、抑制血小板聚集,使已聚集血小板解聚,保护神经组织。本研究表明,参芎嗪注射液对大鼠局灶性脑缺血具有较好的保护作用,在降低血浆黏度效果优于川芎嗪,说明在脑缺血治疗方面,益气活血法可能一定程度上优于单用活血药。

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