胡记妹，黄绰妤，曾军荣，杨怀秀

（广东省广州市从化市中心医院检验科，广东广州 510900）

己有研究证明我国婴幼儿中存在诺瓦克样病毒 （Nomvalk-like virus，NLV）和札幌样病毒（Sapporo-like virus， SLV）两种人类杯状病毒（human calicivirus，HuCV）的感染，近年来我国杯状病毒性腹泻发生率呈上升趋势，己在多个地区发生暴发流行[1]；由于不能早期干预，一些婴幼儿由杯状病毒感染引起损害及危及生命，给家庭及社会带来巨大损失。从化地区是广州的县级城市，50多万人口，周边地区有众多民工，人口聚集，极易暴发流行各病毒感染。2005年1月～2007年12月笔者在从化地区用RT-PCR方法检测了非细菌性腹泻病患儿粪便标本的杯状病毒，分析从化地区婴幼儿杯状病毒性胃肠炎的流行情况。

1 对象与方法

1.1 研究对象

2005年1月～2007年12月，我院门诊与住院诊治的6 678名0～7岁就诊腹泻患儿，男3 361名，女3 317名。

1.2 标本采集

2005年1月～2007年12月在广东省广州市从化巿中心医院住院部和门诊部儿科采集婴幼儿非菌性腹泻粪便标本。

1.3 检测前准备工作

粪便标本处理：加入1 ml样品稀释液（sample diluent）至1.5 ml EP管中，加入0.1 g固体粪便标本或0.1 ml液体粪便标本，置于漩涡震荡器混匀，室温静置10 min，室温下≥5 000 r/min离心5 min，备用。

1.4 病毒RNA提取

1.4.1 提取前的准备工作 ①将1 ml Buffer AVL加入装有低压冻干的Carrier RNA中，彻底溶解Carrier RNA后，将溶有Carrier RNA的Buffer AVL转入至Buffer AVL瓶中，彻底混匀。分装贮存于2～8℃。如果在2～8℃时，Buffer AVL/Carrier RNA溶液形成沉淀，可在80℃重新溶解，注意加热的时间不能超过5 min，用前冷却至室温。Buffer AVL/Carrier RNA溶液不能加热超过6次。②加入合适比例的96%～100%的酒精至Buffer AW1中，19 ml的Buffer AW1加入酒精25 ml。③加入合适比例的96%～100%的酒精至Buffer AW2中，13 ml的Buffer AW2加入酒精30 ml。……