丁云录，李晓兵，欧喜燕，李驰坤，赵德喜

（长春中医药大学附属医院，长春 130021）

偏头痛是一种临床常见的慢性神经血管性疾患，病因复杂，频繁发作，严重影响患者的生活与工作[1-2]。柴芎头痛颗粒由柴胡、川芎、黄芩、全蝎、蜈蚣、姜半夏、人参等中药组成，有和解少阳、疏肝解郁、清热泻火、通络止痛之效，既可预防头痛再发，又可止痛，临床治疗偏头痛肝郁化火证疗效明显[3-4]。

1 材料与方法

1.1 实验材料 动物，SPF 级SD 大鼠，雌雄各半，体质量170～190 g。动物合格证号：SCXK-（辽）2020-0001，购于辽宁长生生物技术股份有限公司。药品，柴芎头痛颗粒，规格：每袋10 g，批号：20200701，由吉林省中医药科学院植物化学研究中心提供。正天丸，规格：每盒6 g×10 袋，批号：2003008H，华润三九医药股份有限公司。硝酸甘油注射液，规格：1 mL，每盒5 mg×10 支，批号：2005161，河南润弘制药股份有限公司。试剂，5-羟色胺（5-HT）试剂盒，规格：每盒48 T，批号：20201028-30019A。5-羟基吲哚乙酸（5-HIAA）试剂盒，规格：每盒48 T，批号：20201028-30018A、β-内啡肽（β-EP）试剂盒，规格：每盒48 T，批号：20201028-30165A、多巴胺（DA）试剂盒，规格：每盒48 T，批号：20201028-30326A。一氧化氮（NO）试剂盒，规格：每盒48 T，批号：20201028-30968A，黄石研科生物科技有限公司。仪器，BIO680 酶标仪，Japan BIO RAD 公司；HH·SY21-Ni 电热恒温水浴锅，北京长源试验设备厂；Biofuge Stratos 台式高速冷冻离心机，德国贺利氏公司。

1.2 方法

1.2.1 动物分组 试验动物购入后，适应环境3 d，随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照药正天丸3.2 g/kg 组、柴芎头痛颗粒5.36、2.68、1.34 g/kg 剂量组，共6 组，每组12 只大鼠。

1.2.2 硝酸甘油型偏头痛大鼠模型制备 按文献[5-9]操作方法，将硝酸甘油注射液在大鼠颈部皮下注射制模（10 mg/kg），对照组大鼠同期颈部皮下注射0.9%氯化钠溶液2 mL/kg。

1.2.3 给药方法 预防性给药1 周，每日灌胃1 次，每周称量体质量1 次。

1.2.4 检测指标 行为学指标：1）记录大鼠制模后耳红开始及消失时间；2）记录大鼠制模后挠头开始及消失时间。血清学指标：实验结束，麻醉、腹主动脉取血，离心取血清，按试剂盒说明书检测定各组大鼠血清中5-羟色胺（5-HT）、5-羟基吲哚乙酸（5-HIAA ）、β-内啡肽（β-EP）、多巴胺（DA）、一氧化氮（NO）水平。

1.3 统计学方法 数据统计采用SPSS 22.0统计软件，计量资料以均数±标准差（）表示，组间采用t检验，以P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 柴芎头痛颗粒对偏头痛模型大鼠耳红时间、抓耳时间影响 柴芎头痛颗粒5.36 g/kg 剂量组与模型组耳红开始时间比较明显延长（P＜0.05）；柴芎头痛颗粒2.68、1.34 g/kg 剂量组与模型组抓耳开始时间比较明显延长（P＜0.05）。柴芎头痛颗粒5.36、2.68 g/kg 剂量组及正天丸组耳红及挠头消失的时间较模型组大鼠明显缩短（P＜0.01 或P＜0.05）。见表1。

表1 柴芎头痛颗粒对偏头痛模型大鼠耳红时间、抓耳时间影响（，n =12）

表1 柴芎头痛颗粒对偏头痛模型大鼠耳红时间、抓耳时间影响（，n =12）

注：与模型组比较，# P ＜0.05，## P ＜0.01

2.2 柴芎头痛颗粒对偏头痛模型大鼠血清中5-HT、5-HIAA、β-EP、NO和DA含量影响 本实验结果显示，模型组与对照组比较，大鼠血清中5-HT、DA 含量显著降低、5-HIAA 含量显著升高（P＜0.01），预防性给予柴芎头痛颗粒药物治疗1 周后，柴芎头痛颗粒高、中、低剂量组大鼠血清中5-HT、DA 含量显著升高、5-HIAA 含量显著降低，与模型对照组比较差异明显（P＜0.01 或P＜0.05）。本实验结果表明，柴芎头痛可以提高硝酸甘油致大鼠偏头痛动物模型血清中5-HT、DA 含量，并降低5-HIAA 含量。预防性给予柴芎头痛颗粒药物治疗1 周后，柴芎头痛颗粒高、中、低剂量组大鼠血清β-EP 含量显著提高，与模型对照组比较差异明显（P＜0.01 或P＜0.05）。本实验中，复制偏头痛大鼠模型成功后，模型组大鼠血清中NO 含量与对照组比较明显升高（P＜0.01），预防性给予柴芎头痛颗粒药物治疗1 周后，柴芎头痛颗粒高、中剂量组可以显著降低大鼠血清中NO含量，与模型对照组比较差异明显（P＜0.05）。见表2。

表2 柴芎头痛颗粒对偏头痛模型大鼠血清中5-HT、5-HIAA、β-EP、NO 和DA 含量影响（，n =12）

表2 柴芎头痛颗粒对偏头痛模型大鼠血清中5-HT、5-HIAA、β-EP、NO 和DA 含量影响（，n =12）

注：与模型组比较，# P ＜0.05，## P ＜0.01

3 讨论

偏头痛是常见的多发性疾病，在其发病机理的研究中，由于整个过程中伴随着血管的舒缩和血流速度的改变，所以血管的舒缩机制占有十分重要的地位。硝酸甘油型偏头痛模型既具有与人类偏头痛发作的时相性，又具有转化为中医证候属性的可操作性与适用性。其造模的主要原理之一是硝酸甘油在机体内通过一系列生理、生化反应，介导神经源性炎症引发偏头痛，能较好地模拟人类偏头痛发病时的表现，其行为症状变化是用于客观且能量化评价偏头痛治疗药物疗效的合理指标[10-11]。

偏头痛与神经递质、血管活性物质的释放和代谢密切相关，当这些相关介质调节失衡将引发偏头痛发作，5-HT、DA 与偏头痛发作有关[12-14]。5-HT 是偏头痛发作中重要的神经递质，是脑循环中强烈的血管收缩胺，可加重偏头痛相关症状[15-16]。DA 是机体一种重要的儿茶酚胺类神经递质，可兴奋三叉神经系统中DA 受体，使三叉颈复合体神经元难于激活，阻断痛感神经信号通路的传导，减轻疼痛[17-19]。偏头痛发作过程中始终存在颅内血管舒缩障碍和5-HT 等神经递质含量的改变。研究[20-23]表明，偏头痛患者头痛发作期间血浆5-HT 降低，5-HT 降解导致其代谢产物5-HIAA水平升高，许多药物通过作用于5-HT受体治疗偏头痛。本实验结果显示，柴芎头痛颗粒通过调节神经递质的释放，抑制调节失衡，缓解神经源性炎症的发生。

β-内啡肽（beta-endorphin，β-EP）是体内镇痛系统的主要递质，偏头痛与内源性阿片肽系统的障碍密切相关，偏头痛病人脑脊液β-EP 与正常人相比含量显著减少，且程度与病情严重密切相关[24]。偏头痛病人血清β-EP 含量较正常人降低，发作期与发作末期较间歇期更低，β-EP 减少及内源性阿片系统的功能紊乱可能是偏头痛发作的启动因素之一[25-27]。NO 是偏头痛发生的启动因子，既可直接扩张血管，又可协同其他神经递质触发神经源性炎症、易化伤害痛觉冲动的中枢传递，因此认为NO 在偏头痛和其他血管性头痛的发病过程中起重要作用[28-29]。本研究结果显示，柴芎头痛颗粒通过升高β-EP 含量，显著降低血清中NO 浓度，调节脑血管舒缩功能紊乱、抑制NO 的合成，改善偏头痛的症状，减少偏头痛的发生。

本实验结果表明，柴芎头痛颗粒对实验性偏头痛模型大鼠具有显著的镇痛作用，通过调节 5-HT、5-HIAA、β-EP、NO 和DA 等与疼痛相关的血活性物质及神经递质的水平，改善血管舒缩功能障碍，有效预防与治疗偏头痛。