王佳瑜，高梓真，艾凤伟

(1 江苏恩华药业股份有限公司，江苏 徐州 221004；2 徐州医科大学药学院，江苏 徐州 221004)

盐酸羟考酮注射液由Napp Pharmaceuticals Limited研发，2003年以商品名OxyNorm©在英国上市10 mg/mL注射剂，2013年在中国上市，商品名为OxyNorm(奥诺美©)。它是一种强效镇痛药，用于治疗中度至重度急性疼痛，包括手术后引起的中度至重度疼痛，以及需要使用强阿片类药物治疗的重度疼痛。静脉注射后，起效时间2～3 min，达峰时间5 min，快速镇痛，在恶性肿瘤镇痛及术后镇痛中应用较广。2020年盐酸羟考酮注射液在国内的销售额达2亿元，具有较好的市场前景。

原研制剂(奥诺美©)说明书中公开本品的处方组成为：盐酸羟考酮、枸橼酸、枸橼酸钠、氯化钠、盐酸、氢氧化钠和注射用水，但未公开具体用量。根据《化学药品注射剂仿制药质量和疗效一致性评价技术要求(征求意见稿)》相关要求，注射液辅料的种类和用量通常应与参比制剂相同，仿制该品种需要确定处方中关键辅料氯化钠的用量。氯离子的含量测定方法主要有银量法、电位滴定法和佛尔哈德法等[1-2]，电位滴定法是在滴定过程中通过测定电位变化以确定滴定终点的方法，无需指示剂，滴定终点判断准确，方便快捷[3-4]。盐酸羟考酮注射液中的氯主要来源于盐酸羟考酮和氯化钠，本研究采用硝酸银电位滴定法测定盐酸羟考酮注射液中总氯量，然后根据注射液的含量，计算样品溶液中盐酸羟考酮的含氯量，作为本底扣除，即可得到注射液中氯化钠的量，为该类活性成分含氯的注射液中氯化钠测定提供思路。

1 仪器与试剂

1.1 仪 器

Mettler T5 全自动电位滴定仪,瑞士梅特勒公司;Mettler T50 全自动电位滴定仪,瑞士梅特勒公司;Mettler DMI141-SC 复合金属银环电极,瑞士梅特勒公司;Mettler XSE205 电子天平,瑞士梅特勒公司;DGG-9240A电热干燥箱,上海森信实验仪器有限公司。

1.2 试 剂

硝酸银(批号20181126)，国药集团化学试剂有限公司;氯化钠(基准试剂，批号20200708),天津市化学试剂研究所有限公司;硝酸(批号20181127),国药集团化学试剂有限公司;盐酸羟考酮注射液(批号BX713、BX752、BX845)，Napp Pharmaceuticals Limited;盐酸羟考酮(以无水物计含量99.9%，水分5.0%)，枸橼酸(批号19072002)，湖南新绿方药业有限公司;枸橼酸钠(批号19051902),湖南新绿方药业有限公司。

2 方法与结果

本研究采用电位滴定法测定盐酸羟考酮注射液中的氯化物，基本原理是利用银离子和氯离子沉淀反应产生氯化银，进行沉淀滴定，滴定过程中随着硝酸银滴定液的不断加入，电极电位不断发生变化，电极电位发生突跃时指示到达滴定终点[5-7]，按照上述方法进行了硝酸银电位滴定法测定盐酸羟考酮中氯化钠的含量的专属性、线性与范围、准确度、重复性试验。

2.1 硝酸银滴定液的配制及标定

2.1.1 硝酸银滴定液配制

精密称取硝酸银8.75 g，置500 mL棕色量瓶中，加超纯水使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得0.1 mol/L硝酸银滴定液。

2.1.2 硝酸银滴定液标定

取110 ℃干燥至恒重的基准氯化钠30～50 mg，精密称定，置滴定杯中，加0.02 mol/L的硝酸使溶解，至溶液体积约40 mL，摇匀，采用T5电位滴定仪进行测定，对0.1 mol/L的硝酸银滴定液进行标定，0.1 mol/L的硝酸银滴定液的标定浓度为0.1045 mol/L(n=6)。

2.2 空白干扰试验

2.2.1 空白溶剂的配制

空白溶剂(0.02 mol/L硝酸溶液)：量取浓硝酸2.5 mL，加超纯水至2000 mL，充分摇匀，即得0.02 mol/L硝酸溶液。

2.2.2 辅料溶液的配制

分别精密称取枸橼酸、枸橼酸钠适量置100 mL量瓶中，加超纯水溶解并稀释制成每毫升约含枸橼酸5 mg、约含枸橼酸钠15 mg的混合辅料溶液。

2.2.3 空白干扰试验测定

分别量取上述空白溶剂及辅料溶液5 mL，置滴定杯中，加0.02 mol/L硝酸溶液至体积约40 mL，采用T5电位滴定仪进行测定，记录消耗硝酸银滴定液体积，结果空白溶剂及辅料溶液消耗滴定体积均为0 mL，表明不干扰测定。

2.3 线性与范围试验

精密称取经110 ℃干燥至恒重的基准级氯化钠试剂900.48 mg，置100 mL容量瓶中，加超纯水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为标准贮备溶液。用移液管分别吸取 0.5、1.0、2.0、4.0、5.0、6.0 mL标准贮备溶液，置滴定杯中，加0.02 mol/L硝酸溶液至溶液总体积约为40 mL，以0.1 mol/L硝酸银滴定液(浓度已标定)为滴定剂，用电位滴定仪进行滴定，记录消耗硝酸银滴定液体积，以消耗体积V对浓度C进行线性回归。得标准曲线方程为V=0.1634C+0.0103, r=1.0000。在6.25～37.5 μg/mL浓度范围内线性关系良好上述结果表明，本品氯化钠含量在4.50～54.03 mg范围内与滴定液消耗体积呈良好的线性关系。

2.4 准确度试验

精密称取盐酸羟考酮原料药1054.13 mg，枸橼酸500.70 mg，枸橼酸钠1500.94 mg，置100 mL量瓶中，加超纯水溶解并稀释至刻度，作为原辅料贮备溶液备用。用移液管移取上述溶液5 mL置滴定杯中，再精密称取经110 ℃干燥至恒重的基准级氯化钠试剂28 mg(80%)、35 mg(100%)、42 mg(120%)各三份至滴定杯中，加0.02 mol/L硝酸溶液至各溶液总体积为40 mL，用电位滴定仪进行滴定，记录消耗硝酸银滴定液体积，根据盐酸羟考酮称样量计算本底消耗并扣除，计算回收率。结果见表1。

表1 氯化钠含量滴定准确度试验测定结果Table 1 Determination results of titration accuracy test of sodium chloride content

*氯化钠含量为总氯含量减去盐酸羟考酮原料药本底含氯量(以氯化钠计),其中，盐酸羟考酮中氯含量以氯化钠计为8.317 mg。

结论：由测定结果可知：盐酸羟考酮注射液氯化钠在拟定处方量的80%、100%、120%浓度下，回收率均在98.0%～101.0%之间，表明该方法的准确度较高，可用于盐酸羟考酮注射液中氯化钠的含量滴定。

2.5 溶液稳定性试验

精密称取经110 ℃干燥至恒重的基准级氯化钠试剂175 mg，置25 mL容量瓶中，加入2.4准确度试验项下配制的原辅料贮备溶液溶解，定容至刻度。移取5.0 mL置滴定杯中，加0.02 mol/L硝酸至各溶液的体积为40 mL，分别在室温下放置0、4、8、24 h后，用0.1 mol/L的硝酸银滴定液进行滴定，计算氯化钠含量。结论：供试品溶液在室温下放置24 h，含量测定结果无明显差异, RSD为0.82%，说明溶液稳定性良好。

2.6 重复性试验

取自制盐酸羟考酮注射液，移取5.0 mL置滴定杯中(n=6)，加0.02 mol/L硝酸至各溶液的体积为40 mL，用0.1 mol/L的硝酸银滴定液进行滴定。结论：本品6份样品含量测定结果差异RSD为0.06%在可接受范围内，说明方法重复性较好。

2.7 中间精密度试验

取自制盐酸羟考酮注射液，分别采用两台不同型号的电位滴定仪、不同人员测定氯化物的含量，并根据结果计算氯化钠含量。结论：由不同实验人员、使用不同型号的电位滴定仪测定盐酸羟考酮注射液的中氯含量，测定结果基本一致，测定结果差异RSD为0.33%,说明测定方法的精密度较好。

2.8 含量测定

表2 盐酸羟考酮注射液氯化钠含量测定结果Table 2 Determination of sodium chloride content in Oxycodone hydrochloride injection

分别取三批1 mL:10 mg规格盐酸羟考酮注射液原研制剂(批号BX713、BX752、BX845)各5.0 mL置滴定杯中，加0.02 mol/L硝酸至各溶液的体积为40 mL，用0.1 mol/L的硝酸银滴定液进行滴定，通过式(1)～式(3)计算氯化钠含量。结果见表2。

总氯含量(以氯化钠计mg)=MNaCl×C滴定液×V样

(1)

式中:V样——供试品溶液消耗滴定液的体积,mL

C滴定液——滴定液浓度,mol/L

MNaCl——氯化钠分子量,58.44

注射液中盐酸羟考酮本底氯含量(以氯化钠计mg)=[MNaCl×含量×规格(mg/mL)×供试品移取量(mL)]/M盐酸羟考酮

(2)

式中:含量——注射液中盐酸羟考酮标示含量，%

MNaCl——氯化钠分子量，58.44

M盐酸羟考酮——盐酸羟考酮分子量，351.82

氯化钠含量(mg/mL)=(公式(1)-公式(2))/供试品移取量(mL)

(3)

三批盐酸羟考酮注射液氯化钠含量均值为7.18 mg/mL。

3 结 论

使用银量法电位滴定法测定本品总氯含量，根据盐酸羟考酮注射液的含量计算出盐酸羟考酮的本底消耗并扣除后，可以准确计算出盐酸羟考酮注射液中氯化钠含量。采用本方法测得盐酸羟考酮注射液中氯化钠含量为7.18 mg/mL。在滴定终点时，电位变化明显，经方法学验证后，证明该方法准确度高、重复性好且操作快速简便。本法为该类主药含氯的注射液中氯化钠测定提供思路。