汪咏曾，祝胡仙，朱教胜

（劲牌有限公司检测中心，湖北大冶 435100）

甲醛是一种无色、有毒的气体，易溶于水，广泛存在于啤酒、发酵酒和蒸馏酒中。2017 年10 月27 日，世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单中，将甲醛放在一类致癌物列表中。虽然现行有效的GB 2758—2012《食品安全国家标准 发酵酒及其配制酒》 中规定，啤酒中甲醛小于等于2.0 mg/L[1]，但是对白酒及其配制酒中的甲醛含量没有限量要求，也没有相应的检测方法标准。试验参照GB/T 5009.49—2008《发酵酒及其配制酒卫生标准的分析方法》[2]基础上对白酒及其配制酒中甲醛检测方法进行研究与改进，为白酒及其配制酒酒中甲醛含量的检测提供参考。

1 材料与方法

1.1 试剂与材料

紫外分光光度计、全玻蒸馏装置（1 000 mL）、移液管、容量瓶、比色管、乙酰丙酮溶液、磷酸、乙酸铵、冰乙酸、甲醛。

1.2 测定方法

参照GB/T 5009.49—2008《发酵酒及其配制酒中卫生标准的分析方法》。

1.3 测定步骤

（1） 直接测定法。对于无色清亮透明的白酒样品可采用直接法进行测定。取样品1～10 mL 样品于25 mL 比色管中，用水稀释至10 mL。各管中分别加入乙酰丙酮溶液2 mL，塞好瓶盖摇匀后，用纱布将瓶盖包扎紧，在60 ℃水中水浴30 min，取出冷却[3]，以水作参比，于波长415 nm 处测定吸光度。其计算公式为：

式中：

X——试样中甲醛的含量，μg/mL；

C1——从标准曲线中得到的甲醛质量，μg；

C0——试剂空白从标准曲线中得到的质量，μg；

V——测定用样品的体积，mL。

（2） 蒸馏法。有颜色配制酒样品蒸馏后测定，具体步骤：准确吸取25.0 mL 样品样品至蒸馏瓶中，加入200 g/L 磷酸溶液20 mL，再加水至液体总体积为120 mL，迅速装好蒸馏装置，将冷凝管下端插入装有盛有20 mL 水的100 mL 锥形瓶液面下（外加冰浴），打开冷却水，开始蒸馏，收集馏出液于近100 mL，取下锥形瓶，将上述蒸馏液完全转移至100 mL 容量瓶中并定容至刻度。取蒸馏液2～10 mL于10 mL 比色管中，用水稀释至刻度。各管中分别加入乙酰丙酮溶液2 mL，塞好瓶盖摇匀后，用纱布将瓶盖包扎紧，在60 ℃水中水浴30min，取出冷却[3]，以水作参比，于波长415 nm 处测定吸光度。其计算公式为：

式中：

X——试样中甲醛的质量浓度，μg/mL；

C1——从标准曲线中得到的甲醛质量，μg；C0——试剂空白从标准曲线中得到的质量，μg；V1——蒸馏用试样的体积，mL；

V2——测定用试样蒸馏液的体积，mL。

2 方法学考查

2.1 标准曲线的考查

精密吸收1 μg/mL 的甲醛标准溶液各0，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，8.00，10.00 mL 于25 mL比色管中，加水至10 mL。标准工作液质量浓度依次为0，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，0.8，10.0 μg/mL。按1.3（2） 建立标准曲线，并拟合标准曲线。

标准工作液质量浓度见表1。

表1 标准工作液质量浓度

2.2 精密度试验

选取酒类样品蒸馏液进行显色并重复测定6 次，计算检测结果相对标准偏差。

精密度结果见表2。

由表2 可知，相对标准偏差RSD 值符合方法验证要求，说明试验的精密度较好。

表2 精密度结果/ μg

2.3 稳定性试验

选取酒类样品蒸馏液进行显色测定，将显色好的样品分别放置0，10，30，50，70，100，120 min，计算检测结果相对标准偏差。

相对标准偏差见表3。

表3 相对标准偏差/ μg

由表3 可知，在120 min 内稳定性良好，但检测结果有随着时间的延长而出现升高的趋势。

2.4 重复性试验

分别选取1 个配制酒样品和白酒样品，白酒样品则按直接法测定，配制酒样品用蒸馏法测定。

直接法和蒸馏法结果见表4。

表4 直接法和蒸馏法结果 / μg

直接法RSD 值为0.95%，蒸馏法RSD 值为4.85%。

2.5 准确度试验

选取白酒和配制酒样品，分别添加不同3 个梯度甲醛标准溶液混合均匀，每个梯度做3 个平行。其中白酒用直接法测定，配制酒用蒸馏法测定。

不同梯度准确度试验结果见表5。

表5 不同梯度准确度试验结果

2 种方法相比较，其中直接法检测准确度更高。

2.6 样品中酒精度对结果的影响研究

配制3 个不同酒精度样品（3 个样品中甲醛含量一致），取10.0 mL 样品按用直接法进行测定。

不同酒精度对试验结果的影响见表6。

表6 不同酒精度对试验结果的影响

从以上检测结果分析，样品中酒精度含量在50%Vol 以内对甲醛检测结果影响较小。

2.7 样品中醛类物质对检测结果的影响研究

根据白酒含有中乙醛和乙缩醛类物质的浓度，配制成与白酒中醛类浓度相似的混合酒精溶液（其中酒精度为50%Vol，乙醛质量浓度0.97 μg/mL，乙缩醛质量浓度为0.99 μg/mL），在上述混合溶液再添加甲醛标准溶液，用直接法进行样品显色与测定。

醛类物质对试验结果的影响见表7。

表7 醛类物质对试验结果的影响

以上检测结果表明，醛类物质会导致检测结果偏高。

2.8 样品pH 值对检测结果的影响研究

将同一酒样中pH 值调节成3 个不同梯度，然后按1.3.2～1.3.4 步骤进行显色与测定。

不同pH 值对试验结果的影响见表8。

表8 不同pH 值对试验结果的影响

3 个不同pH 值的样品甲醛检测结果的相对标准偏差在允许范围之内，说明pH 值对甲醛影响较小。

3 结论

在以上试验中，将GB/T 5009.49—2008 标准中的沸水浴10 min 改为60 ℃水浴30 min 并包扎瓶口后，可以有效防止高温水浴过程中瓶塞开崩的情况；标准曲线线性关系良好；对于没有颜色的白酒用直接法测定，可减少蒸馏过程中甲醛的损失，重复性好、准确度高、操作简单且耗时少；而有颜色的配制酒则需要用蒸馏法测定，以避免颜色的干扰；样品中的酒精度在50%Vol 以下，pH 值为3.8～10.0，对结果影响较小，但醛类物资则可能会导致检测结果偏高。