赵惠媛 申树瑞 张海华 张凤敏 张朝生 霍新钰

(河北科技师范学院动物科技学院，河北省特色动物种质资源挖掘与创新重点实验室，秦皇岛066004)

胆汁酸具有增强脂类代谢、保护动物肝脏、促进幼畜生长等功能[1]，作为一种饲料添加剂，其在养殖业中的应用较为广泛。李翠梅等[2]研究表明，在仔猪饲粮中添加胆汁酸可以促进脂肪的消化吸收，降低腹泻率，加快蛋白质转化，从而提高仔猪生长性能，其还在一定程度上改善了机体免疫功能，维护仔猪身体健康。王改玲[3]在研究中利用不同水平的胆汁酸替代基础饲粮中的麸皮，进行黄羽肉雏鸡的饲养试验，结果表明在饲粮中添加胆汁酸可显著提高血清中免疫球蛋白、葡萄糖、总蛋白等生化指标含量，降低料重比，提高生长性能。朱龙等[4]研究发现，在饲料中添加适宜的胆汁酸可以提高加州鲈鱼增重率，降低料重比，促进其生长；其还可以促进鲈鱼体内脂肪代谢，降低脂肪沉积，从而达到提高其肌肉品质的目的。Su等[5]研究发现，在饲料中添加胆固醇和胆汁酸可以影响凡纳滨对虾的生长、脂质代谢及免疫应答，还可以影响肠道菌群分布情况，单纯添加胆汁酸可以显著提高对虾肝胰腺的抗氧化能力。貉作为一种珍贵的毛皮动物，其生产性能的提高可以带来良好的经济效益。目前关于胆汁酸对其他经济动物生产性能的影响研究较多，而其对貉生产性能的研究尚鲜见报道。貉在冬毛期主要进行肌肉的增长及脂肪的沉淀，因此需要较高的能量和脂肪水平，在此阶段提高其对营养物质的吸收率尤为重要。因此，本试验以冬毛期乌苏里貉为研究对象，探究胆汁酸对其生长性能、氮代谢及血清生化指标的影响，为在貉生产实践过程中合理利用胆汁酸提供理论参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验用饲料级胆汁酸由山东某动物保健品有限公司提供。

1.2 试验动物与分组

选取135日龄、体重相近、健康的雄性乌苏里貉64只，随机分为4组，每组16个重复，每个重复1只。各组间貉初重无显著差异(P>0.05)。

1.3 试验设计及饲粮

本试验采用单因素试验设计，4组分别在基础饲粮中添加0(Ⅰ组)、100(Ⅱ组)、300(Ⅲ组)、500 mg/kg(Ⅳ组)胆汁酸，基础饲粮参照NRC(1982)进行配制，其组成及营养水平见表1。试验预试期5 d，正试期80 d。

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)

续表1项目 Items含量 Content钙 Ca0.91总磷 TP0.85赖氨酸 Lys1.42蛋氨酸 Met0.65半胱氨酸 Cys0.35苏氨酸 Thr0.90色氨酸 Trp0.22粗脂肪 EE9.80

1.4 饲养管理

试验前对试验动物的笼舍及食盆进行清洗及消毒，采用单笼饲养，每日07:30及15:30各饲喂1次，自由饮水。

1.5 消化代谢试验

消化代谢试验为期3 d，采用全收粪法，各组分别挑选8只体重相近且健康状况良好的乌苏里貉进行试验，每天记录采食量。尿液收集桶中提前加入20 mL 10%浓度的硫酸以固氮及防腐，将消化代谢试验期间收集的全部粪样和尿样进行处理：粪样收集后按照鲜重的5%喷洒10%硫酸，转至65 ℃烘箱中烘干，研磨过40目筛后置于自封袋于-20 ℃冰箱内待测；尿样需混匀并过滤后置于-20 ℃冰箱保存待测。

1.6 测定指标及方法

1.6.1 生长性能测定

正式试验开始对各组乌苏里貉称重作为初始体重，之后每隔20 d进行1次称重，试验结束时貉体重为末重，称重在早上饲喂前进行并记录数据，计算乌苏里貉体重的变化及平均日增重和料重比。

1.6.2 饲粮营养物质消化率测定

依据国家标准测定干物质(GB/T 6435—2014)、粗脂肪(GB/T 6433—2006)及粗蛋白质(GB/T 6432—2018)的含量。相关指标计算公式[6]如下：

干物质采食量(g/d)=(给料量×给料中
干物质含量)-(剩料量×剩料中干物质含量)；
干物质排出量(g/d)=鲜粪重×粪中干物质含量；
干物质消化率(%)=[(干物质采食量-干物质
排出量)/干物质采食量]×100；
粗脂肪消化率(%)=[(粗脂肪进食量-粪便中
粗脂肪排出量)/粗脂肪进食量]×100；
粗蛋白质消化率(%)=[(粗蛋白质进食量-
粪便中粗蛋白质排出量)/粗蛋白质
进食量]×100。

1.6.3 氮代谢指标测定

相关指标的测定和计算方法参照潘素敏等[6]进行,计算公式如下：

食入氮(g/d)=干物质采食量×
饲粮粗蛋白质含量/6.25；
尿氮(g/d)=尿体积×尿粗蛋白质含量/6.25；
粪氮(g/d)=粪干物质量×粪中
粗蛋白质含量/6.25；
氮沉积(g/d)=食入氮-尿氮-粪氮；
净蛋白质利用率(%)=(氮沉积/食入氮)×100；
蛋白质生物学价值(%)=[氮沉积/
(食入氮-粪氮)]×100。

1.6.4 血清生化指标测定

5.一定法，也就是经常所说的排除法与定选法的结合。针对组合型选择题，找到最准确的那个选择肢进行定选或者错得最离谱的那个选择肢进行排除。这两个过程相结合基本就能确定应选项。

冬毛期试验结束时，各组分别随机选取8只乌苏里貉并于空腹时进行后肢静脉取血，待血液凝固后4 000 r/min离心10 min吸取上层血清，置于-80 ℃冰箱保存，使用中生北控生物科技股份有限公司试剂盒，通过VITAL-E全自动生化分析仪测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性及总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、低密度脂蛋白(LDL)、尿素(UREA)含量。

1.6.5 毛皮品质测定

毛皮品质测定需综合比较各组貉皮长及皮板评分。

皮长：将貉取皮刮油后套在楦板上晾干，测量从鼻尖至尾根的长度。

皮板评分：综合貉毛密度、整齐度、针/绒毛比、光泽度4项指标，采用10分制评分，根据乌苏里貉毛皮特点，每项指标最高为2.5分，最低为0分，取总分平均值。

1.6.6 脏器指数测定

相关器官的脏器指数测定参照张新宇等[7]研究方法进行。

1.7 数据统计分析

采用Excel 2010进行试验数据处理，SPSS 17.0进行单因素方差分析，LSD检验进行多重比较，P>0.05表示差异不显著，P<0.05表示差异显著，P<0.01表示差异极显著，试验结果用“平均值±标准差”表示。

2 结 果

2.1 饲粮胆汁酸水平对冬毛期乌苏里貉生长性能的影响

如表2所示，各组之间的初重差异不显著(P>0.05)，Ⅱ组和Ⅲ组貉的末重、平均日增重及料重比显著优于Ⅰ组(P<0.05)。

表2 饲粮胆汁酸水平对冬毛期乌苏里貉生长性能的影响

2.2 饲粮胆汁酸水平对冬毛期乌苏里貉营养物质消化率的影响

如表3所示，各组间干物质采食量、干物质排出量、干物质及粗蛋白质消化率均无显著差异(P>0.05)；Ⅱ组的粗脂肪消化率显著高于Ⅰ组和Ⅳ组(P<0.05)。

表3 饲粮胆汁酸水平对冬毛期乌苏里貉营养物质消化率的影响

2.3 饲粮胆汁酸水平对冬毛期乌苏里貉氮代谢的影响

如表4所示，各组间食入氮、粪氮和尿氮无显著差异(P>0.05)；随着饲粮中胆汁酸水平的增加，氮沉积存在先升高后降低的趋势，其中Ⅱ组最高，各试验组之间无显著差异(P>0.05)；Ⅱ组的蛋白质生物学价值最高，各组间无显著差异(P>0.05)；Ⅱ组的净蛋白质利用率显著高于Ⅰ组和Ⅳ组(P<0.05)。

表4 饲粮胆汁酸水平对冬毛期乌苏里貉氮代谢的影响

2.4 饲粮胆汁酸水平对冬毛期乌苏里貉血清生化指标的影响

如表5所示，各试验组的血清尿素、总蛋白及球蛋白含量随着胆汁酸水平的提高呈现出先升高后降低的趋势，Ⅲ组数值最大，各组间无显著差异(P>0.05)；各试验组间血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶活性及高密度脂蛋白和低密度脂蛋白含量无显著差异(P>0.05)；Ⅱ组血清胆固醇含量显著低于Ⅳ组(P<0.05)，Ⅳ组血清甘油三酯含量显著高于其余3组(P<0.05)。

表5 饲粮胆汁酸水平对冬毛期乌苏里貉血清生化指标的影响

2.5 饲粮胆汁酸水平对冬毛期乌苏里貉毛皮品质的影响

如表6所示，试验各组之间皮长无显著差异(P>0.05)；Ⅱ组的皮板评分最高，各组之间无显著差异(P>0.05)。

表6 饲粮胆汁酸水平对冬毛期乌苏里貉毛皮品质的影响

2.6 饲粮胆汁酸水平对冬毛期乌苏里貉脏器指数的影响

如表7所示，Ⅰ组的肝脏指数和肾脏指数均显著高于Ⅱ组和Ⅳ组(P<0.05)，极显著高于Ⅲ组(P<0.01)；Ⅰ组的脾脏指数显著高于Ⅱ组和Ⅲ组(P<0.05)。

表7 饲粮胆汁酸水平对冬毛期乌苏里貉脏器指数的影响

3 讨 论

3.1 饲粮胆汁酸水平对冬毛期乌苏里貉生长性能的影响

在本试验条件下，胆汁酸添加水平为300 mg/kg时，公貉末重、平均日增重均最高，料重比最优，显著高于对照组，说明饲粮中添加适量胆汁酸能提高乌苏里貉生长性能。程伟伟等[8]研究发现，在基础饲粮中添加500 g/t的胆汁酸，可以显著提高肉鸡生长前期的平均体重。赵盼月[9]研究发现，饲料中添加500 mg/kg胆汁酸时，可通过提高欧洲鳗鲡的肠道消化酶活性、改善肠道菌群的相对丰度及多样性、促进肝脏胆汁酸产生以及提高脂肪分解酶活性等方式促进蛋白质合成，从而提高生长性能。左旭东[10]研究发现，添加较低水平的胆汁酸时对于母鸡平均日增重有促进作用，胆汁酸较高时即产生了抑制作用。高水平的胆汁酸会通过负反馈调节的方式抑制法尼醇X受体激活的胆汁酸合成途径，从而降低机体对葡萄糖的进食量，从而抑制了机体的生长性能[11]。通过研究发现，饲粮中添加适量的胆汁酸时，可以适当提高冬毛期乌苏里貉的生长性能。

3.2 饲粮胆汁酸水平对冬毛期乌苏里貉营养物质消化率的影响

本研究中，冬毛期乌苏里貉主要进行肌肉增加和脂肪沉积，各组之间的干物质和粗蛋白质消化率无显著差异。吴明海[12]研究发现，当在基础饲粮中添加0.2%的胆汁酸时，对奶牛干物质和粗蛋白质消化率无显著影响，与本试验研究一致。本研究中，当胆汁酸添加水平为100 mg/kg时，冬毛期貉粗脂肪消化率显著高于Ⅰ组和Ⅳ组，这说明高添加水平的胆汁酸会降低机体对脂肪的消化吸收。Bauer等[13]认为，低水平的胆汁酸可以促进脂肪的消化吸收，当其添加水平较高时，可能会形成某种单分子层结构物质，从而阻碍脂肪酶与底物的结合而产生抑制效果。这说明饲粮中胆汁酸的添加水平需要在一个适宜的范围。

3.3 饲粮胆汁酸水平对冬毛期乌苏里貉氮代谢的影响

乌苏里貉在冬毛期阶段可对自身采食的蛋白质和能量进行调节[7]。本试验中，各组的食入氮、尿氮、粪氮及氮沉积均无显著差异；胆汁酸添加水平为100 mg/kg时，蛋白质生物学价值较高，此时净蛋白质利用率显著高于Ⅰ组和Ⅳ组。这表明适量胆汁酸的添加可以提高机体对饲粮中蛋白质的利用效率。为了满足乌苏里貉在冬毛期对肌肉积累的要求，需要给其供给足量的蛋白质，因而提高蛋白质的利用率尤为重要。

3.4 饲粮胆汁酸水平对冬毛期乌苏里貉血清生化指标的影响

血清生化指标可以反映动物机体的生理状况。血清中葡萄糖、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白含量是判断机体健康状态的重要指标[14]。本试验条件下，胆汁酸的添加对于以上指标没有产生显著影响。Ⅱ组血清胆固醇含量显著低于Ⅳ组，饲粮中添加胆汁酸水平为100 mg/kg时，可通过肝载脂蛋白A-Ⅰ的表达，降低胆固醇的含量。胆汁酸可以通过活化法尼酯衍生物X受体(FXR)下调肝组织固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)，进而抑制甘油三酯合成酶的转录，最终导致血清甘油三酯含量的降低[15]。当胆汁酸添加水平为500 mg/kg时，血清甘油三酯含量显著高于其余3组，这可能是由于高添加水平的胆汁酸造成机体负反馈调节机制被激活，从而导致血清甘油三酯含量的提高。

3.5 饲粮胆汁酸水平对乌苏里貉毛皮品质的影响

乌苏里貉作为一种经济动物，毛皮品质是体现其经济价值的重要指标，其与饲粮营养成分存在很大的相关性。貉体长和皮长的提升利于获得较大的毛皮面积，貉毛密度、整齐度、针/绒毛比、光泽度等是衡量毛皮质量的重要指标。本试验条件下，虽然各组的皮长和皮板评分均无显著差异，但是当胆汁酸添加水平为100和300 mg/kg时，以上各指标较高。这表明在本试验条件下饲粮中添加适量水平的胆汁酸可以提升乌苏里貉毛皮品质。

3.6 饲粮胆汁酸水平对乌苏里貉脏器指数的影响

脏器指数在一定程度上可以反映出动物器官的发育情况及功能强弱，间接体现出动物身体的健康状况[16]。本试验条件下，饲粮中添加胆汁酸后肝脏、肾脏及脾脏指数均显著下降，心脏指数无显著变化。研究发现，适宜水平的胆汁酸可以促进脂肪的消化吸收，当其水平过高时则会危害肝脏[17-18]。胆汁酸可以通过对FXR的调节来调控脂代谢过程，FXR主要表达于肝脏、肾脏、肠道等器官，在本试验条件下，胆汁酸的持续添加可能在作用于FXR的同时对其所在器官也造成了损伤，从而造成脏器指数降低。胡田恩等[18]研究发现，在基础饲粮中添加胆汁酸可以显著降低牛蛙脏器指数。朱龙等[4]也发现，在加州鲈鱼饲料中添加胆汁酸也会导致鱼体脏器指数有所降低。这表明在饲粮中添加胆汁酸时不仅需要水平适宜，添加持续时间也需进一步考量。

4 结 论

在本试验条件下，通过对冬毛期乌苏里貉生长性能、氮代谢及血清生化指标的测定与分析，综合各项指标得出，当饲粮中胆汁酸水平为100～300 mg/kg时，冬毛期乌苏里貉能获得较好的生长性能。