陆辉志，石玉琴

（1.武汉科技大学 医学院，湖北 武汉 430065；2.武汉市第三医院 重症医学科，湖北 武汉 430074）

0 引言

病原体感染导致患者严重感染，诱发全身炎症反应综合征，即为脓毒症[1]，可发展为严重脓毒症和脓毒症休克，甚至死亡。诊断金标准是血液培养[2]，但该方法耗时长，诊断阳性率低，尤其对于已使用过抗生素的患者，阳性率明显降低。近年来，高通量测序技术（highthmughput sequencing，HTs）高速发展[3]，不需培养分群，直接测序鉴别病原体，检测速度快、准确率高、覆盖范围广。本研究旨在探讨运用高通量测序技术检测脓毒症患者病原学，指导针对性抗生素的运用。

1 资料与方法

1.1 一般资料。选取2019年1月至2019年12月武汉市第三医院重症监护室（Intensivecare unit，ICU）收治的89例脓毒症患者，按照随机数字表法分为观察组（46例）和对照组（43例）。纳入标准：符合诊断标准[4]。排除标准：①合并恶性肿瘤；②接受过免疫抑制治疗。两组一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。向患者及家属交代治疗方案，并签署知情同意书，经本院医学伦理研究委员会批准通过，见表1。

表1 一般情况比较

1.2 治疗方案。对照组：抗感染治疗前，抽取10～20 mL血液标本进行血培养检测。观察组：在血培养联合HTs检测，另抽取10 mL血液标本保存于4℃环境中，由深圳华大基因研究进行HTs。两组患者使用亚胺培南/西司他丁钠（韩国中外制药株式会社，进口药品注册证号H20120403，1～2 g，分3次滴注）联合万古霉素（希杰有限公司，进口药品注册证号H20100289，2 g，分两次）抗感染治疗，同时针对原发病的治疗、液体复苏等治疗。待血培养及HTs结果报告后，必要时更换敏感药物。连续治疗1周后，复查血培养及或HTs，感染控制，病情稳定，同时一次HTs检测阴性或连续两次血培养阴性后，给予出院，出院后连续随访3个月。

1.3 观察指标。比较两组检测情况（病原体阳性率、报告时间及检出类型）、治疗效果及并发症的发生情况。①病原学检测阳性率=阳性例数／总例数×100%；②病原体报告时间=报告日期一采血日期；③病原体检出类型包括：细菌、真菌、病毒及其他病原体；③并发症：急性肾损伤、低血压及急性肺损伤发生率。

1.4 统计学分析。采用SPSS 21.0软件处理，计数资料采用卡方检验，计量资料用（±s）表示，样本均数比较采用方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2.3 并发症比较。两组患者在发生并发症如急性肾损伤、低血压及急性肺损伤发生率方面比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表4。

表4 并发症比较[n(%)]

2 结果

2.1 病原体检测情况比较。观察组病原体阳性率为95.65%，明显高于对照组（41.86%）；观察组病原体发报告时间明显早于对照组，差异有统计学意义（P＜0.01）。两组患者病原体类型检测方面比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表2 病原体检测情况比较（例）

2.2 治疗效果比较。观察组治疗时间明显短于对照组；观察组治疗存活率91.30%，明显高于对照组（67.44%），差异有显著性统计学意义（P＜0.01），见表3。

表3 治疗效果比较（例）

3 讨论

脓毒症是指明确或可疑的病原体感染，引起的全身炎症反应综合征[5]。随着社会老龄化、侵入性医疗手段的增加，脓毒症发病率不断上升，国外流行病学结果显示[6-7]，脓毒症发病率为0.3%，约9%发展成严重脓毒症，3%发展为脓毒性休克，是重症监护室死亡率较高的疾病之一。脓毒症的早期、快速、准确诊断对于治疗效果至关重要，目前临床上脓毒症的病原学诊断主要依赖于血培养[8]，但该方法耗时长，阳性率较低，容易漏诊、误诊[9]。

HTs可从整体上分析病原微生物群体的组成情况，也可获得含量低的病原序列，并通过未知序列鉴定新物种，迅速识别各类病原微生物[10]。HTs目前可检测出约2700余种病原体，包括细菌、病毒、真菌、寄生虫等，特别是病毒、支原体、衣原体等少见病原体类型的诊断，更是补充了血培养的不足。本临床研究显示，使用高通量测序检测的观察组病原体测阳性率为95.65%，明显高于对照组（41.86%），观察组病原体发报告时间明显早于对照组，差异有显著性统计学意义（P＜0.01）。两组患者病原体类型检测方面比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。观察组治疗时间明显短于对照组，观察组治疗存活率91.30%，明显高于对照组（67.44%），差异有显著性统计学意义（P＜0.01）。两组患者在发生并发症如急性肾损伤、低血压及急性肺损伤发生率方面比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

综上所述，应用高通量测序检测方法在脓毒症病原学诊断和评价疗效较好，联合血培养检测，可减少漏诊率，提高诊断的准确性。