邹君彪，和玉丹，马改彦，刘雅晶，姜平

(1.南京农业大学动物医学院，江苏 南京 210095；2.江西兴鼎科技有限公司，江西 南昌 330115； 3.江西生物科技职业学院，江西 南昌 330200)

抗生素作为动物生产中的生长促进剂已在世界各地广泛应用，在促进畜禽生长、提高饲料报酬、改善胴体品质、降低发病率和死亡率等多方面发挥了重要作用[1]。阿维拉霉素作为寡糖类抗生素，具有安全性高、无残留并且对环境无污染的优点，分别于1987年(猪用)和1990年(鸡用)被欧盟批准列入通用使用标准。我国于2005年批准可以在猪、鸡饲料中使用阿维拉霉素预混剂。阿维拉霉素常作为肉鸡的生长促进剂，在欧盟、东欧、南非等多个国家和地区广泛销售和使用[2]，可以提高肉鸡的存活率和饲料效率[3]，降低对疾病的易感性。目前，阿维拉霉素主要由美国礼来公司生产，价格昂贵。我国阿维拉霉素生产存在菌种产量低和生产成本高等局限。本实验室通过阿维拉霉素生产菌发酵工艺优化，研制了实验室产品，大大提高了阿维拉霉素的发酵产量，降低了发酵生产成本，在最佳培养条件下，阿维拉霉素产量达5 000～6 000 μg/mL，远高于前人研究，更适合工业化生产。为了进一步明确其功效，本试验采用1日龄罗斯(Ross)肉鸡，通过在肉鸡日粮中添加不同剂量的自制阿维拉霉素，观察其对肉鸡生长发育和免疫功能的影响，为阿维拉霉素应用奠定基础。

1 材料与方法

1.1 试验动物与材料

罗斯(Ross)308商品代肉鸡购自江苏八达畜禽有限公司。阿维拉霉素预混剂(10%)，为江西兴鼎科技有限公司实验室通过发酵工艺优化的自制制品。

1.2 试验设计

选取1日龄罗斯肉鸡480羽，平均体重约为46.2 g，随机分为4组，每组12个重复，每个重复10羽。对照组饲喂基础日粮，试验组分别在基础日粮中添加5 mg/kg(T1组)、10 mg/kg(T2组)和20 mg/kg(T3组)阿维拉霉素，试验期42 d，分为试验前期(1～21日龄)和试验后期(22～42日龄)。基础日粮的配制满足NRC(1994)肉鸡营养标准。试验鸡采用分层笼养模式，自由采食和饮水。鸡舍1～3 d温度为35 ℃，随后每天降低1 ℃，直至降至25 ℃。舍内1～3 d给予24 h光照，4～42 d为23 h光照。试验鸡按照肉鸡常规免疫程序进行，分别在1、7和21日龄接种新城疫和传染性支气管炎疫苗。湿度、通风等其他饲养管理措施，按规模化罗斯308肉鸡饲养标准执行。

1.3 测定指标与方法

1.3.1 生长性能

分别于1、21和42日龄，以重复为单位，称量所有试验鸡空腹重，记录每天的采食量，计算试验前期(1～21日龄)、试验后期(22～42日龄)和试验全期(1～42日龄)不同处理组鸡只的平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。

1.3.2 免疫器官指数

于21和42日龄时，每个重复中随机选取1羽，共48羽，称重后宰杀，解剖剥离鸡只的脾脏、胸腺和法氏囊，剔除周围结缔组织和脂肪组织后，精确称量各免疫器官重量，计算各免疫器官指数。

1.3.3 血清免疫球蛋白

于21和42日龄时，每个重复中随机选取1羽，共48羽，对鸡进行翅下静脉采血，收集的全血37 ℃静置30 min后，3 500 r/min离心15 min，收集血清。采用ELISA试剂盒测定血清中的IgG和IgM含量。试剂盒购自上海蓝基生物有限公司。

1.3.4 血清溶菌酶活性的测定

采用溶菌酶检测试剂盒(比浊法)测定肉鸡血清中的溶菌酶活性。试剂盒购自南京建成生物工程研究所试剂盒。

1.4 数据分析

采用SAS 9.3软件进行单因素方差分析(One-way ANOVA)和线性分析，组间数值差异显著时进行Duncan多重比较，结果使用“平均数±标准误”表示。P<0.05表示差异显著，P>0.05表示差异不显著。

2 结果

2.1 阿维拉霉素对肉鸡生长性能的影响

不同处理组肉鸡在试验期生产性能测定结果见表1。

表1 阿维拉霉素对肉鸡生长性能和成活率的影响

由表1可知，在试验前期(1～21日龄)，与对照组相比，饲粮中添加阿维拉霉素显著降低了肉鸡的料重比(P<0.05)，一定程度上提高了肉鸡的成活率，但试验组肉鸡的日增重和采食量较对照组均显著下降(P<0.05)。与饲粮中添加5 mg/kg的试验组T1相比，添加了10 mg/kg的试验组显著提高了肉鸡平均日增重和日采食量(P<0.05)。试验全期(1～42日龄)，与对照组相比，饲粮中添加阿维拉霉素可以提高肉鸡的成活率，但未达到显著差异(P>0.05)。试验组T2与对照组在日增重和日采量上无显著差异(P>0.05)，但T2组肉鸡的饲料转化率和成活率均高于对照组(P>0.05)。由此表明，饲粮中添加10 mg/kg的阿维拉霉素能够在一定程度上提高肉鸡的成活率和饲料转化效率。

2.2 阿维拉霉素对肉鸡免疫器官指数的影响

由表2可以看出，与对照组相比，饲粮中添加不同剂量的阿维拉霉素，可不同程度提高肉鸡的胸腺、脾脏和法氏囊指数。与对照组相比，T2组肉鸡在21日龄时显著提高了胸腺指数和法氏囊指数(P<0.05)，在42日龄时显著提高了胸腺指数和脾脏指数(P<0.05)。42日龄时，T3组肉鸡相比对照组显著提高了胸腺指数(P<0.05)。结果表明，日粮中添加5 mg/kg、10 mg/kg和20 mg/kg阿维拉霉素，均能不同程度提高肉鸡的免疫器官指数，其中，添加剂量为10 mg/kg的T2组影响程度最显著。

表2 阿维拉霉素对肉鸡免疫器官指数的影响

2.3 阿维拉霉素对肉鸡血清IgG、IgM水平的影响

由表3可以看出，21日龄时，与对照组相比，T2组显著提高了血清IgG水平(P<0.05)。42日龄时，试验组T1、T2和T3的IgG水平较对照组分别显著提高了22.48%、38.07%和23.39%(P<0.05)。与对照组相比，饲粮中添加阿维拉霉素提高了肉鸡血清IgM水平，但未构成显著差异(P>0.05)。结果表明日粮中添加阿维拉霉素能提高肉鸡血清IgG、IgM水平。

表3 阿维拉霉素对肉鸡血抗体IgG、IgM水平的影响 mg/mL

2.4 阿维拉霉素对肉鸡血清溶菌酶活性的影响

由表4 可知，21日龄时，与对照组相比，添加阿维拉霉素的T2组和T3组肉鸡血清溶菌酶活性分别显著提高了35.20%和19.03%(P<0.05)。42日龄时，与对照组相比，饲粮中添加阿维拉霉素显著提高了肉鸡血清溶菌酶活性(P<0.05)。结果表明，饲粮中添加10 mg/kg阿维拉霉素的肉鸡血清溶菌酶活性最高。

表4 阿维拉霉素对肉鸡血清溶菌酶活性的影响 μg/mL

3 讨论

饲粮中添加阿维拉霉素可抑制病原菌生长，提高肉鸡的生长率和饲料转化率[3-5]。阿维拉霉素提高肉鸡生产性能的机制，主要通过减少体内能量代谢物质的消耗，降低肠道毒副代谢产物的生成，提高肉鸡后肠挥发性脂肪酸的产生与吸收[6-7]。梁先明等[8]通过对爱拔益加(AA)肉鸡接种产气荚膜梭菌建立感染模型，发现在饲料中添加阿维拉霉素可降低肉鸡的死亡率，而且还可以有效预防和控制产气荚膜梭菌引起的肉鸡坏死性肠炎。Saleh等[9]研究表明，饲喂阿维拉霉素(100 g/t，Maxus G200)可提高肉鸡对干物质、粗蛋白和粗纤维的消化率，并显著上调肉鸡骨骼肌中生长激素促分泌素受体(GHSR)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)和胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)的基因表达。Chowdhury等[10]研究报道，10 mg/kg阿维拉霉素可显著提高肉鸡的增重和饲料转化效率，但对采食量的影响差异不显著。Wellenreiter等[6]研究表明，日粮中添加10 mg/kg阿维拉霉素可显著提高45 d肉鸡的平均末重，但对肉鸡料重比的改善差异不显著。与Wealleans等[11]研究一致，伍喜林[12]研究表明，日粮中添加阿维拉霉素对肉鸡采食量无明显影响，但能降低料重比，并在一定程度上提高雏鸡成活率。本研究也取得类似结果，但添加阿维拉霉素组肉鸡的日增重均显著低于对照组，这可能与阿维拉霉素组肉鸡采食较少有关。

机体免疫功能的强弱与免疫器官的大小、重量有着直接的关系，通常采用免疫器官指数来衡量肉鸡机体免疫机能的强弱[13]。本试验结果显示，日粮中添加阿维拉霉素对21和42日龄肉鸡的胸腺指数、脾脏指数、法氏囊指数均有不同程度提高，表明阿维拉霉素的添加可促进肉鸡免疫器官发育，提高肉鸡机体的免疫力和抗病力。IgG、IgM是介导体液免疫的主要效应分子，在血液中的水平高低是反应机体免疫状况的重要指标，可用来评价畜禽抵御病原和微生物感染的能力[14]。Mountzouris等[15]在科宝肉鸡上的研究表明，2.5 mg/kg阿维拉霉素的添加对肉鸡血浆抗体(IgG、IgA、IgM以及总Ig水平)水平无显著影响。刘明超等[16]报道，肉鸡日粮中添加阿维拉霉素会提高肉鸡血液IgG含量，但与对照组相比差异不显著。本试验研究显示，21日龄和42日龄阿维拉霉素添加组肉鸡血清IgG和IgM水平均高于对照组，其中10 mg/kg阿维拉霉素组21日龄肉鸡血清IgG含量较对照组提高达显著水平。42日龄时，与对照组相比，添加阿维拉霉素组肉鸡显著提高了血清IgM含量，这可能与添加的阿维拉霉素剂量和肉鸡品种不同有关。

血清溶菌酶，又称胞壁酶，是正常机体免疫防御机制的组成成分，血清溶菌酶含量高低可反映动物机体对外源物(如寄生虫、细菌和病毒)的抵抗能力[17]。溶菌酶通过水解细菌细胞壁，使细菌细胞壁破裂、内容物流出而死亡，从而起到抗菌的作用[18]。此外，溶菌酶还能与带负电荷的病毒蛋白质结合，形成复盐，从而导致病毒失活，起到抗病毒作用[19]。本试验结果表明，饲粮中添加5～20 mg/kg阿维拉霉素均能提高肉鸡血清溶菌酶活性，在42日龄时，阿维拉霉素添加组与对照组相比显著提高了肉鸡血清溶菌酶活性，表明日粮中添加阿维拉霉素对肉鸡血清溶菌酶活性有提高作用，其中以10 mg/kg剂量组效果最佳。

4 结论

试验研究结果表明，本实验室通过优化发酵工艺研制的阿维拉霉素，能够在一定程度上降低肉鸡的死亡率和料重比，提高血清的免疫球蛋白G水平和溶菌酶活性，且以10 mg/kg添加剂量效果为佳，为经优化生产菌发酵工艺研制的阿维拉霉素奠定了良好的应用基础，但尚需与商品化的阿维拉霉素产品功效作进一步比较研究。