张倩, 王倩薇

河南大学第一附属医院检验科(河南开封 475000)

肺癌属于一种在临床上较为常见的恶性肿瘤，其中以非小细胞肺癌较为常见，早期症状表现为咳嗽、痰血、胸部疼痛、低热等，晚期症状表现为体重减轻、疲乏、食欲下降以及呼吸困难、咳血等，严重威胁着患者的生命安全[1]。而肺栓塞属于非小细胞肺癌的主要并发症之一，肺栓塞的发生不仅会增加患者临床治疗的难度，还增加患者病死率，威胁患者生命健康[2]。研究表明[3]，肺栓塞主要病理特征为呼吸功能障碍、肺循环障碍，是由多种栓子栓塞肺动脉所引发的一组临床综合征，此病早期症状表现为胸痛、呼吸困难、晕厥等，随着疾病的进展患者会出现咳嗽、咳血、心悸等症状，严重者可导致患者死亡。而非小细胞肺癌自身较为严重，加之肺栓塞的出现，在一定程度上增加了患者的死亡风险，因此对于非小细胞肺癌合并肺栓塞行早期诊断，对降低患者死亡具有重要的意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年12月至2019年12月我院收治的非小细胞肺癌合并肺栓塞患者80例作为合并肺栓塞组，男46例，女34例，年龄35～65岁，平均(45.6±2.3)岁，根据肺部CT计算栓塞面积百分比对患者疾病严重程度进行分级(1级：<25%，2级：25%～49%，3级：50%～74%，4级：75%～99%，5级：100%)：1级13例，2级：20例，3级：23例，4级：19例，5级：5例；根据患者预后情况分为存活、死亡，其中存活54例，死亡26例。选取同期收治的非小细胞肺癌未合并肺栓塞患者80例作为未合并肺栓塞组，男43例，女37例，年龄35～68岁，平均(46.5±2.5)岁；另外选取同期于我院行健康体检的健康志愿者80例作为健康对照组，男40例，女40例，年龄32～65岁，平均(44.9±2.7)岁。3组研究对象在性别、年龄等资料中对比，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本次研究所有患者及其家属均知情，且签署了知情同意书。

纳入标准：非小细胞肺癌患者经病理组织学检测确诊；肺栓塞患者经多层螺旋CT肺动脉造影确诊，健康对照组无肺部疾病史，身体健康。

排除标准：弥漫性血管内凝血者；合并肺结核、慢性阻塞性肺疾病、肺动脉高压者；合并心脑血管疾病者；其他部位栓塞者；合并糖尿病、高血压者；合并其他肿瘤者；沟通障碍者；精神障碍者；近2周内使用抗凝、抗血小板聚集、卡马西平、甲氨蝶呤等药物者。

1.2 方法

1.2.1 样本采集 抽取清晨空腹静脉血3 mL，以离心半径5 cm、转速3 000 r/min离心处理10 min，分离上层血清，-80℃保存待检。

1.2.2 脑钠肽(BNP)检测方法 使用ADVIA Centaur XP免疫发光分析仪及配套试剂(德国西门子公司)采用化学发光法检测所有研究对象血清BNP水平。

1.2.3 同型半胱氨酸(Hcy)检测方法 使用Roche MODULAR全自动生化分析仪及配套试剂(上海高踪医疗器械科技有限公司)采用循环酶法检测所有研究对象血清Hcy水平，正常值参考范围为<20 μmol/L。

1.2.4 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)检测方法 采用酶联免疫吸附试验法检测，将血清样本置于室温后，取出试剂盒，标记酶标板，制作标准品，以1∶2的稀释液稀释样品；在反应孔上依次加入稀释好的待测血清及标准品100 μL/孔，放置37℃恒温孵育箱中湿育2 h；用专用洗涤液将反应板清洗3次后，加入抗体工作液(1∶100倍稀释后)100 μL/孔，置于37℃恒温孵育箱中湿育45 min；继续清洗反应板4次后，在反应孔内加入TMB溶液100 μL/孔，置于37℃恒温孵育箱中湿育45 min后在反应孔内加入终止液100 μL/孔以终止反应，在450 nm波长(参考波长570～630 nm)测定吸光度，颜色反应深浅与bFGF水平成正比，经绘制标准曲线计算bFGF水平。

2 结果

2.1 3组研究对象血清BNP、Hcy、bFGF水平比较 未合并肺栓塞组、合并肺栓塞组血清BNP、Hcy、bFGF水平高于健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；合并肺栓塞组血清BNP、Hcy、bFGF水平高于未合并肺栓塞组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 3组研究对象血清BNP、Hcy、bFGF水平比较

2.2 BNP、Hcy、bFGF与非小细胞肺癌合并肺栓塞患者疾病严重程度的关系 BNP、Hcy、bFGF随着非小细胞肺癌合并肺栓塞患者疾病严重程度的增加逐渐升高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 BNP、Hcy、bFGF与非小细胞肺癌合并肺栓塞患者疾病严重程度的关系

2.3 BNP、Hcy、bFGF与非小细胞肺癌合并肺栓塞患者死亡、存活的关系 非小细胞肺癌合并肺栓塞死亡患者血清BNP、Hcy、bFGF水平高于存活患者，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 BNP、Hcy、bFGF与非小细胞肺癌合并肺栓塞患者死亡、存活的关系

2.4 BNP、Hcy、bFGF之间相关性分析 BNP、Hcy、bFGF之间相关性采用Pearson相关性分析，BNP、Hcy之间呈正相关(r=0.265,P=0.018)；BNP、bFGF之间呈正相关(r=0.295,P=0.008)；Hcy、bFGF之间呈正相关(r=0.284,P=0.011)。见图1。

图1 BNP、Hcy、bFGF之间相关性分析

3 讨论

肺栓塞是临床上较为常见的一种肺血管疾病，此病发病较为突然、隐匿，且在发病早期无特异性症状，因此此类患者预后大多较差，病死率较高[4]。研究发现[5]，肺栓塞是导致非小细胞肺癌患者死亡的主要危险因素之一，但因肺栓塞与非小细胞肺癌患者部分症状较为相似，临床上对非小细胞肺癌合并肺栓塞患者的漏诊率和误诊率较高。因此寻找有效诊断非小细胞肺癌合并肺栓塞的特异性指标，对改善患者预后降低病死率具有重要的意义。

BNP属于一种可反映心室功能障碍的特异性指标，在心室符合增加或者室壁张力增加的刺激下由心室肌细胞合成并分泌[6]。目前临床上已有研究发现[7]，非小细胞肺癌血清BNP显著升高，其原因可能与机体自我保护机制相关，心脏激素可经多种信号通路，发挥其抗肿瘤的作用。而在肺栓塞发生时，栓子所引发的机械堵塞会减少有效肺血管床，增加肺循环阻力，进而增加右室室壁张力，最终促进BNP合成、分泌，使其呈现为高表达[8]。李双拾等[9]在其研究证实BNP与急性肺栓塞的发生相关。柏新乐等[10]在其研究中发现，BNP在急性肺栓塞患者中呈现为高表达，且与患者疾病严重程度相关。在本研究中，与单纯非小细胞肺癌患者、健康对照相比，非小细胞肺癌合并肺栓塞患者血清BNP水平升高，随着患者疾病进展逐渐升高，且在死亡患者中高表达更为显著，说明BNP在非小细胞肺癌合并肺栓塞中高表达，且与患者疾病严重程度相关。

Hcy属于一种含硫氨基酸，为蛋氨酸代谢过程中较为重要的中间产物，Hcy水平升高时急性肺栓塞发病和静脉血栓形成的危险因素[11]。有研究发现[12-13]，当Hcy含量改变是，可改善患者凝血、抗凝血、纤溶系统功能，促进非小细胞肺癌细胞增殖、浸润。当Hcy水平进一步升高后可损伤血管内皮细胞，促进血栓素A2分泌，经外源性凝血途径将血小板激活，抑制凝血物质，使得血液处于高凝状态，最终促进肺栓塞的发生[14]。马碧蔓等[15]在其研究中分析Hcy在急性肺栓塞患者血清中的表达，其结果证实，Hcy在肺栓塞患者血清中高表达。基于上述研究，在本文研究中检测非小细胞肺癌合并肺栓塞患者血清Hcy水平，结果显示，与单纯非小细胞肺癌患者、健康对照相比，非小细胞肺癌合并肺栓塞患者血清Hcy水平升高，随着患者疾病进展逐渐升高，且在死亡患者中高表达更为显著，说明Hcy在非小细胞肺癌合并肺栓塞中高表达，且与患者疾病严重程度相关。

bFGF为一种血管新生调控因子，在诱导新血管生成、促进细胞有丝分裂中具有重要的作用，与恶性肿瘤的发生、发展和肿瘤新血管生成相关[16]。临床研究发现[17-18]，在机体正常状态下，bFGF含量较低，在细胞DNA合成、刺激血管生成、促细胞有丝分裂中发挥调节作用，但当细胞发生癌变后，其扮演着致癌的作用，在肿瘤细胞中呈现为高表达，其异常升高可促进肿瘤血管新生，增加肿瘤组织血供，为肿瘤生长提供营养，促进肿瘤进展。bFGF在非小细胞肺癌中高表达，参与此病的发展[19]。而目前临床上并未有研究认为，bFGF与肺栓塞相关，仅有一项基础试验发现[20]，经药物干预可降低肺栓塞大鼠bFGF表达。在本文研究中检测非小细胞肺癌合并肺栓塞患者血清bFGF水平，结果显示，与单纯非小细胞肺癌患者、健康对照相比，非小细胞肺癌合并肺栓塞患者血清bFGF水平升高，随着患者疾病进展逐渐升高，且在死亡患者中高表达更为显著，此结果说明，bFGF在非小细胞肺癌合并肺栓塞中高表达，且与患者疾病严重程度相关。

另外，本研究还对BNP、Hcy、bFGF之间相关性进行分析，结果发现，三者之间呈现为正相关，此结果提示着，三者可能共同参与非小细胞肺癌合并肺栓塞的发生，临床上可依据三者在此病中高表达，对患者行早期诊断，改善患者预后，降低病死率。

综上所述，BNP、Hcy、bFGF在非小细胞肺癌合并肺栓塞患者血清中高表达，且与患者疾病严重程度相关，共同参与此病的发展。