自噬介导运动预适应心肌保护作用的研究①

2021-04-22杨旸张译尹

当代体育科技 2021年6期

杨旸张译尹

(1.广西师范大学体育学院广西桂林 541000；2.上海体育学院运动科学学院上海 200438)

1 选题依据

近些年来关于运动预适应改善心功能[1]、预防及治疗心血管疾病（如冠状动脉粥样硬化）[2]，发现该过程与自噬有关，这个过程对维持细胞的生长发育和正常生理代谢有重要的意义，是细胞维持机体平衡的一种机制。运动性心肌缺血和在体心肌缺血再灌注损伤是运动锻炼及生活中常出现的损伤，而运动预适应（EP）对心肌保护作用已得到确认[3-6]，目前其机制尚未确定。但有相关研究表示，其与大鼠心肌自噬有关，因此采用ELISA法测定大鼠血清CK-MB水平。

2 研究对象和研究方法

2.1 研究对象与分组

购于湖南斯莱克景达公司的64只健康7周龄SD雄性大鼠，分笼饲养。大鼠分组如下。

运动性心肌缺血组：对照组（Q1）、非抑制组（A）、Akt抑制剂组（B）、mTOR抑制剂组（C）。

在体心肌缺血再灌注损伤组：对照组（Q2）、非抑制组（D）、Akt抑制剂组（E）、mTOR抑制剂组（F）。

2.2 动物训练方案

运动训练模型的制备参照Bedford的动物运动模型，最后结合每组大鼠体重变化情况综合考虑制订以下运动方案。其中Q1、Q2组不进行训练（直接建模），其余组别以每周训练5d，休息2d的运动方式进行运动预适应模型的构建。A组、D组在建模前30min，作对照往腹腔注射生理盐水，B组、E组在建模前30min往腹腔注射渥曼青霉素。C组、F组，在建模前30min经由为腹腔注射雷帕霉素。

训练方案：第1周30min，10m/min，无坡度。第2～4周45min，20m/min，坡度5。第5～8周460min，20m/min，坡度5。

2.3 运动性心肌缺血大鼠的模型构建

运动性心肌缺血大鼠的模型构建：最后一次运动训练结束后间隔24h，将大鼠取出，运动方式选择高强度间歇训练法运动强度确定为间歇性运动速度为55m/min的大鼠跑台运动，运动时间使运动6min，休息3min。

2.4 在体大鼠I/R模型建立

在体大鼠I/R模型建立：完成运动方案后间隔24h，将大鼠取出，用针头向大鼠腹腔缓慢注射已提前配置好的乌拉坦溶液，通过在体结扎冠状动脉左旋下支，缺血1h后再灌注0.5h。

2.5 动物取材

动物取材：待大鼠两种实验模型建立成功后，用工具取出心脏，将心脏放入准备好的生理盐水中，将心肌组织放在电子称上称重并分成0.2～1g的组织块，在事先预冷的生理盐水中漂洗，放入-80℃的超低温冰箱。

2.6 研究方法

运用数理统计法将数据统计后得出结果。

3 结果和分析

由表1中Q1、A、B、C血清CK-MB的含量可知，A、B、C三组分别与Q1组相比，数值显著降低（P＜0.01），可得出A、B、C三组心肌损伤水平低于Q1组。A、B、C三组分别互相做对比，B、C组CK-MB的水平显著低于A组（P＜0.01），说明在抑制剂的干预下A组心肌损伤水平低于B、C组。C组CK-MB的水平显著高于B组（P＜0.01）。

由表2中Q2、D、E、F血清CK-MB的含量可知，D、E、F三组分别与Q1组相比，血清CK-MB的数值显著降低（P＜0.01），可得出D、E、F两组心肌损伤水平低于Q2组。D、E、F三组分别互相做对比，D组显著高于E、F两组（P＜0.05）。

表1 运动性心肌缺血组大鼠血清CK-MB的含量

表2 心肌缺血再灌注组血清CK-MB的含量

通过ELISA法检测大鼠心脏血清CK-MB的结果显示，A、B、C三组分别与Q1组相比，数值显著降低（P＜0.01）。得出作为实验组的A、B、C组心肌损伤程度减轻，原因是运动预适应可以减少运动引起的心肌缺血性损伤的发生。B、C组与A组相比，A组CK-MB的水平显著高于B、C组（P＜0.01），C组CK-MB的水平显著高于B组（P＜0.01）。D、E、F三组分别与Q2组相比，数值显著降低（P＜0.01），作为实验组的D、E、F组心肌损伤程度减轻，原因是运动预适应减少缺血再灌注引起的心肌缺血性损伤的发生。