山东大学生殖医学研究中心，国家辅助生殖与优生工程技术研究中心，生殖内分泌教育部重点实验室 （山东 济南 250001）

内容提要：目的：对本实验室Sysmex XN-2000全自动血细胞分析仪进行性能评价，保证仪器检验结果的准确可靠。方法：按照中华人民共和国卫生行业标准WS/T 406-2012《临床血液学检验常规项目的分析质量要求》及相关文件的要求，对该仪器的本底计数、携带污染率、批内精密度、日间精密度、线性范围、正确度、不同吸样模式可比性、实验室内结果的可比性、准确度、仪器间五分类比对和人机五分类比对进行验证，判断是否符合卫生行业标准的要求。结果：该仪器的本底计数良好，携带污染率、批内精密度、日间精密度、正确度、准确度等均在要求范围内，不同吸样模式比对和实验室内结果比对的偏差均符合要求，仪器间白细胞五分类比对和人机五分类的结果也均合格。结论：本实验室Sysmex XN-2000血细胞分析仪各项指标性能良好，符合质量目标要求。

临床实验室的全面质量管理越来越受到各方面的关注与重视，对于医疗仪器设备的性能要求也越来越严格，医疗仪器设备的质量和性能直接关系着患者检验报告的可靠和准确性，检验报告的可靠和准确性也将直接影响到医生正确的临床诊断及治疗方案，所以定期进行校准和验证检验仪器设备的性能指标是非常必须和必要的[1]。本实验研究主要参照中华人民共和国卫生行业标准WS/T 406-2012《临床血液学检验常规项目的分析质量要求》[2]，参考NCCLS EP6-P2[3]、EP9-A2[4]、EP15-A2[5]文件要求，通过Sysmex XN-2000全自动血细胞分析仪对白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、血小板（PLT）、红细胞压积（HCT）、平均红细胞体积（MCV）、平均红细胞血红蛋白含量（MCH）、平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）、中性粒细胞百分比（NEUT%）、淋巴细胞百分比（LYMPH%）、单核细胞百分比（MONO%）、嗜酸性粒细胞百分比（EO%）、嗜碱性粒细胞百分比（BASO%）等检测项目的检测数据，对Sysmex XN-2000全自动血细胞分析仪的性能参数进行验证，从而保证检测报告准确可靠。

1.材料与方法

1.1 一般资料

标本来源：血液标本均为本院门诊患者及住院患者的新鲜样本。

仪器与试剂：仪器为Sysmex XN-2000全自动血液分析仪，标准品、质控品和试剂均为希森美康公司配套产品，且均在有效期内。

1.2 方法

1.2.1 本底计数

把稀释液当成样本测定，连续测3次，3次结果的最大值应符合要求。要求：WBC≤0.5×109/L，RBC≤0.05×1012/L，HGB≤2g/L，PLT≤10×109/L。

1.2.2 携带污染率

高浓度样本连测3次，测定值为H1、H2、H3；低浓度样本连测3次，测定值为L1、L2、L3。根据公式|（L1-L3）|/（H3-L3）×100%计算携带污染率。高浓度样本应满足要求（WBC＞90×109/L，RBC＞6.2×1012/L，HGB＞220g/L，PLT＞900×109/L），低浓度样本应满足要求（WBC＜3×109/L，RBC＜1.5×1012/L，HGB＜50g/L，PLT＜30×109/L）。携带污染率要求：WBC≤3%，RBC≤2%，HGB≤2%，PLT≤4%。

1.2.3 批内精密度

使用1份满足要求的样本，重复测定11次，计算后10次结果的变异系数。样本要求和变异系数要求如表1所示。

表1. 批内精密度检验结果

1.2.4 日间精密度

使用2个浓度水平的质控品，在检测当日至少进行1次室内质控，剔除离群值，计算1个月内各项目的变异系数。变异系数要求：WBC≤6%，RBC≤2.5%，HGB≤2%，HCT≤4%，PLT≤8%，MCV≤2.5%，MCH≤2.5%，MCHC≤3%。

1.2.5 线性范围

使用1份接近本实验室检测上限的高值样本，按照100%、80%、60%、40%、20%、10%、0比例稀释，每份稀释样本测3次，计算其均值。将仪器实际测定值与理论稀释值进行比较，得出y=ax+b，进行线性范围验证。要求斜率a在1±0.05范围内，相关系数r≥0.975。

1.2.6 正确度

使用10份结果在参考区间内的样本，每份样本测2次，计算20次结果的均值，以本实验室内参加卫生部临检中心和山东省临检中心室间质评成绩优良、定期校准合格的血细胞分析仪（序列号为13903）的测定均值为标准，计算偏倚。偏倚要求：WBC≤5%、RBC≤2%、HGB≤2.5%、HCT≤2.5%、PLT≤6%、MCV≤3%、MCH≤3%、MCHC≤3%。

1.2.7 不同吸样模式的结果可比性

使用5份样本分别采用自动模式和手动模式进行测定，每份样本各测2次，根据公式（自动模式均值-手动模式均值）/自动模式均值×100%，计算两种不同模式的相对差异。相对差异要求：WBC≤5%、RBC≤2%、HGB≤2%、HCT≤3%、MCV≤3%、PLT≤7%。

1.2.8 实验室内结果的可比性

使用20份样本，每份样本分别在本实验室标准仪器和比对仪器上进行检测，计算相对偏差，每个项目相对偏差满足要求的比例应≥80%。（选取样本浓度的要求和相对偏差要求如表2所示）。

表2. 比对样本的浓度要求及可比性验证的允许偏差

1.2.9 准确度

使用5份卫生部室间质评物进行检测，计算每份样本结果与参考值的相对偏差，每个项目的相对偏差满足要求的比例应≥80%。相对偏差要求：WBC≤15.00%、RBC≤6.00%、HGB≤6.00%、HCT≤9.00%、PLT≤20.00%、MCV≤7.00%、MCH≤7.00%、MCHC≤8.00%。

1.2.10 仪器间五分类比对

参照本仪器说明书，使用10份样本，样本浓度覆盖整个生物参考区间，每份样本分别在标准仪器上和比对仪器各检测2次，计算两次结果均值的偏差。判断标准：NEUT%偏差≤3.0%、LYMPH%偏差≤3.0%、MONO%偏差≤2.0%、EO%偏差≤1.0%、BASO%偏差≤1.0%，10份样本中8份满足要求为比对合格。

1.2.11 人机五分类实验

使用20份样本分别采用人工镜检和仪器法进行白细胞五分类。人工镜检由2位具备资格的检验工作人员，通过双盲法对每一份样本的血涂片计数200个细胞，计算99%的可信区间[6,7]。仪器法对20份样本分别测定2次，判断仪器法结果的均值是否在99%可信范围内。

2.结果

2.1 本底计数检验结果

检验结果的最大值均在要求范围内，验证合格。

2.2 携带污染率检验结果

计算得出的各项目携带污染率均在要求范围内，验证合格。

2.3 批内精密度检验结果

批内精密度检验结果见表1。

2.4 日间精密度检验结果

本实验室一个月的质控在控数据的变异系数结果均在要求范围内，验证合格。

2.5 线性范围检验结果

以下各项目WBC高值、WBC低值、RBC、HGB、HCT、PLT高值、PLT低值的线性回归方程的斜率均在1±0.05范围内，相关系数r≥0.975，均在要求范围内，验证合格。

2.6 正确度验证检验结果

各项目的偏倚均在要求范围内，验证合格。

2.7 不同吸样模式可比性的检验结果

自动模式和手动模式下检测结果均值间的相对差异均在要求范围内，验证合格。

2.8 实验室内结果可比性的检验结果

各项目相对偏差满足要求的比例≥80%，验证合格。见表2。

2.9 准确度的检验结果

本次实验5份卫生部室间质评样本，每个项目的相对偏差满足要求的比例为100%，验证合格。

2.10 仪器间五分类比对检验结果

本次实验10份样本偏差均在要求范围内，验证合格。

2.11 人机五分类实验结果

本次实验20份样本仪器法结果的均值均在参考方法的99%可信范围内，验证合格。

3.讨论

实验室医疗仪器设备的性能验证直接关系到检验结果的准确性，也是保证仪器自身性能稳定的重要因素，同时在临床实验室的全面质量管理中有着举足轻重的作用。性能验证也是医学实验室认可和等级医院评审通过必备的条件。CNAS-CL02医学实验室质量和能力认可准则（ISO15189:2012）[8]要求定期验证要求的测量准确度和测量系统功能。CNAS-CL02-A001《医学实验室质量和能力认可准则在临床血液学检验领域的应用说明》[9]要求设备出现故障，应先分析原因，如果影响方法学性能，修复后必须进行相关的验证。例如穿刺针磨损严重进行更换后，要进行质控验证和样本比对，验证其加样精度偏差是否满足检测要求，验证通过后才能正常进行患者样本的检测。

本实验室在依照相关标准的同时，参考已通过ISO 15189认可实验室和三甲医院评审的经验，制定了该套针对本实验室血液分析仪性能验证的方案。本套方案在对基本常规指标进行验证的同时，增加了不同吸样模式可比性、实验室内结果的可比性、仪器间五分类比对和人机五分类比对的验证。目前大部分实验室为了提供快速高效的检验报告都有多台血细胞分析仪，参加卫生部或省级室间质评的也只有一台仪器，而且同一台机器还有不同的吸样模式，仪器之间及不同吸样模式之间的偏差是固然存在的，所以为了同实验室内检测结果的一致性，需要评估自己实验室内部检测数据的差异性，故增加了这几个项目的比对。本次性能验证的两台仪器数据偏差均在标准范围内，表明本实验室两台血细胞分析仪的差异小，有良好的可比性。

另外，白细胞分类作为血常规检测的重要数据，其分类直接影响医生对疾病的判断，仪器自动化的白细胞分类计数又能减轻临床实验室的劳动强度和工作压力，故血细胞分析仪的白细胞分类验证十分重要，本实验室增加了白细胞人机五分类比对[10]。白细胞分类以具备资格的专业技术人员阅片结果为金标准，验证仪器的白细胞五分类结果是否在99%可信范围内。本次研究仪器的五分类结果均在99%可信范围内，说明仪器的白细胞五分类结果可靠。但在日常工作中，还需要检验工作人员结合报警信息以及散点图进行全面分析，必要的时候进行人工镜检[11]。

综上所述，此次性能验证结果显示本实验室Sysmex XN-2000全自动血细胞分析仪本底计数低，符合要求。携带污染率在要求范围内，仪器冲洗效果良好。精密度结果在允许范围内，仪器重复性良好。线性良好，仪器准确度好，结果可靠。两台仪器之间的数据差异小，白细胞五分类结果可靠。所以，本实验室Sysmex XN-2000血细胞分析仪验证的所有项目均符合要求，性能验证通过，可以满足本院临床样本分析的需求。