叶琦 徐增洪 倪嘉诚 刘国锋 朱光艳

摘要 用2种配合饲料和大豆作为营养来源投喂克氏原螯虾，研究在不同营养条件下繁育期克氏原螯虾肌肉营养指标的变化，从而为克氏原螯虾养殖饲料的选择提供理论依据。结果表明，在投喂3种不同蛋白质含量的饲料对克氏原螯虾体内蛋白质含量有明显影响，而对其脂肪含量的影响并不明显，蛋白质含量与脂肪含量呈正相关。月份与蛋白质含量存在极显著相关，饲料中蛋白质含量对克氏原螯虾肌肉内的蛋白质含量有显著影响（P<0.05）。

關键词 克氏原螯虾;蛋白质含量;营养指标;配合饲料

中图分类号 S963 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2021）03-0084-04

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.03.023

Abstract In this experiment， we used two kinds of compound feed and soybean as the nutrient sources to feed Procambarus clarkii， and studied the changes of various nutrient indices in the muscles of P. clarkii under different nutrient conditions， so as to provide theoretical basis for the selection of culture feed of P. clarkii. The results showed that three kinds of feed with different nutrient protein content had a significant effect on the protein content in P. clarkii， but its effect on fat content was not obvious， and the protein content was positively correlated with fat content. There was an extremely significant correlation between month and protein content， and protein content in the feed had a significant effect on the protein content in the muscles of P. clarkii（P<0.05）.

Key words Procambarus clarkii;Protein content;Nutritional indices;Compound feed

克氏原螯虾（Procambarus clarkii）俗称小龙虾，隶属甲壳纲十足目螯虾科原螯虾属（Procambarus）[1]。1918年，克氏原螯虾由美国引进日本，20世纪30年代又由日本传入我国[2]。近几年，克氏原螯虾产业在我国迅猛发展，2003—2018年养殖产量由 5.16万t增至163.87万t，2018年增幅历年最高（45.1%）。据测算，2018年我国克氏原螯虾产业总产值达3 690 亿元，同比2017年增长 37.5%（未包括香港特别行政区、澳门特别行政区、台湾地区的统计数据）[3]。在“一带一路”倡议[4]的指引下，克氏原螯虾作为水产“明星”品种，利用沿线国家丰富的自然资源和庞大的国内外市场，将会在更多的国家和地区安家落户，成为更多不同文化背景、风俗习惯的人们餐桌上的宠儿。面对国内外对克氏原螯虾需求量的不断扩大和对品质的不断追求，形成的庞大需求市场将导致对克氏原螯虾增产增量与品质提升的进一步研究和探索。

虽然克氏原螯虾在我国的分布范围很广，但受地理环境、营养来源及组成等条件的影响，其肌肉率等在不同地区之间存在一定的差异。田娟等[5]对洞庭湖克氏原螯虾肌肉成分及品质特性进行了分析。结果显示，克氏原螯虾含肉率20.21%，水分含量79.46%，灰分含量1.17%，粗蛋白含量16.67%，粗脂肪含量0.77%。宋光同等[6]与朱杰等[7]研究发现必需氨基酸指数为80.02%，氨基酸总含量为16.06%，鲜味氨基酸含量为5.98%。唐黎等[8]对贵州稻田养殖克氏原螯虾肌肉营养成分进行分析，结果发现克氏原螯虾含肉率约18.40%，水分含量82.07%，灰分含量1.25%，粗蛋白含量17.80%，粗脂肪含量2.06%。费志良等[9]研究发现克氏原螯虾钙含量为0.53%，磷含量为1.30%，氨基酸总量为16.59%，必需氨基酸含量为7.21%。这些研究极大地促进了对克氏原螯虾营养含量的认知。

克氏原螯虾繁育期的生长离不开蛋白质、脂肪及其他营养的补充[10]，克氏原螯虾对蛋白质的需求是利用氨基酸对体内含氮化合物的前体参与物质循环和能量代谢的过程[11]。脂肪等其他营养成分则会促进虾类的生长以及对蛋白质的补充[12]。克氏原螯虾在生长过程中，尤其是在怀卵、抱卵等繁育阶段，营养的摄取将会对种虾、稚虾的顺利繁殖、出苗速度及稚苗规格和质量等产生重要影响。在克氏原螯虾养殖过程中，经济条件、养殖习惯及饲料来源种类繁多等因素都会影响克氏原螯虾的肌肉率、蛋白质含量等。吴东等[13]研究了3种蛋白水平饲料对克氏原螯虾生长和虾肉品质等的影响，使用27%、33%、40%蛋白水平的配合饲料和纯菜粕投喂克氏原螯虾，采用凯氏定氮法[14]测定蛋白质含量。结果表明，虾的体重增长以蛋白质水平27%的配合饲料最高，体长增长以蛋白质水平27%的配合饲料最高，饲料系数以纯菜粕最高，蛋白质水平33%的配合饲料最低。王传慧等[15]发现不同蛋白水平组间的虾肉中水分含量、肉样pH、熟肉率、嫩度、蛋白质含量差异不显著。Xiao等[16]研究了饲料蛋白质含量对不同体型克氏原螯虾的影响，结果发现幼苗期克氏原螯虾在蛋白质含量为40%时进食率最低，而成熟期克氏原螯虾在蛋白质含量25%时最低。幼苗比生长速率和蜕壳率在40%蛋白质含量时最高，成熟期在蛋白质含量35%时最高。幼苗饲料利用率在蛋白质含量40%时最高，成熟期在蛋白质含量45%时最高[17]。幼苗蛋白效率比在蛋白质含量25%时最高，而成熟期在蛋白质含量30%时最高。同时，在幼苗期间蛋白质的补充和维生素A的添加对其成熟有着重要作用[18]。程玉冰等[19]探讨了克氏原螯虾饲料的配制和营养需求，结果发现克氏原螯虾饲料中蛋白质需求量呈大幅度波动，可能受限于克氏原螯虾品种、大小、生长阶段和养殖模式，一般为30%～60%。氨基酸由于存在短板效应，任一种缺乏都会影响蛋白质合成[20]。因此，在克氏原螯虾的养殖过程中，不同蛋白氨基酸的补充是虾能饱满成熟的必要条件。于宁等[21]研究了克氏原螯虾饲料最适能量蛋白质比（E/P），研究发现成活率、相对增重率、相对增长率均随着E/P值的上升呈现先升高后下降的变化趋势，均在E/P值为36 MJ/kg时最高，而此时饲料系数最低。通过采用常压干燥法测定水分含量，采用凯氏定氮法[14]测定蛋白质含量，利用索氏抽提法[22]测定脂肪含量，来研究E/P的动态变化[23]。然后，将虾养殖一段时间后饥饿24 h再进行试验[24]。结果显示，不同饲料E/P值对克氏原螯虾肌肉中水分含量、蛋白质含量以及粗灰分含量的影响不显著，但随着E/P值的上升，粗脂肪含量呈逐渐上升的趋势。

近年来，克氏原螯虾的人工养殖发展迅速，其营养成为当前研究热点[25]，但关于克氏原螯虾繁育期间投喂不同蛋白质含量的饲料对其营养变化影响的研究则少有报道。笔者利用3种不同蛋白质含量的饲料喂养处于繁育期的克氏原螯虾，研究饲料中蛋白质含量对克氏原螯虾肌肉中营养含量的影响，旨在为规模化繁育克氏原螯虾种苗及克氏原螯虾高效养殖提供数据支持和参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验用克氏原螯虾为2018年8月从中国水产科学研究院淡水渔业研究中心养殖基地挑选的100只健康虾（规格约40 g/只）。将挑选出来的克氏原螯虾带回淡水渔业研究中心于养殖桶内培养。

1.2 试验设计

设置9个试验桶（规格为半径40 cm，高80 cm的圆筒，水深保持在35 cm左右[26]。每个桶中放入10只虾，雌雄比例按3∶1放置，剩余龙虾作为备用。3个桶作为一个试验组，分A、B、C 3组，每组分别投喂一种饲料，A组投喂的饲料是克氏原螯虾用合成饲料1（蛋白质含量标注为32%的商品饲料，蛋白质实测含量29.4%，下同），B组投喂的饲料是小龙虾用合成饲料2（自行配制生产，蛋白质含量20.1%），C组投喂的饲料是用水泡过的黄豆（蛋白质含量30.2%）。每天定时傍晚17：00前后喂食。定时开关增氧机，保证溶氧量[27]。放入人工虾巢，为其提供生活场所，并投放水葫芦和伊乐藻等水生植物[28]。每天在投喂饲料前测量水质指标，模拟自然光下养殖[27]，每星期换水1/3[29]，避免水质恶化，保持水質清爽。

1.3 样品测定

从2018年11月初开始，每月从每个桶中选取1只健康虾进行蛋白质含量和脂肪含量的测定，每组3个重复，共记录9份数据。测量11月、12月和1月繁育期克氏原螯虾肌肉中蛋白质及脂肪的含量，其中蛋白质含量采用凯氏定氮法测定，脂肪含量采用索氏标准法萃取测定。

1.4 测定指标及方法

1.4.1 蛋白质含量的测定。

将完整的虾解剖，剪开外壳后取出肌肉，将肌肉剪裁成4个块状的个体，取2块进行蛋白质含量测定，剩余2块用于脂肪含量测定。将肌肉放在千分之一电子天平上进行称量并记录。放入石墨消解仪的消化管中，加入催化剂（硫酸钾与硫酸铜10∶1混合研磨）5 g和浓硫酸10 mL进行消解。4 h后消解完成后使用凯氏定氮仪测定，输入样品重量和标准酸浓度等数值，等待蒸馏滴定，5 min后记录数据，进行下一个数据的测定[30]。具体试剂与操作流程参考凯氏定氮法（GB/T 5009.5）。

1.4.2 脂肪含量的测定。

将解剖好的肌肉放入烘箱，在105 ℃下烘烤2.5～3.0 h，直到肌肉呈现干脆僵硬状取出，研磨称重获得样品重W1，用脱脂棉包裹样品放入滤纸桶中，将滤纸桶放入[31]。此前，先将溶剂杯烘干称重获得W2，将石油醚倒入萃取室，采用索氏标准法[22]进行抽提。2 h后回收滤液放入烘箱，105 ℃下烘烤1 h左右，直至溶剂杯中无液体状油脂，取出称重，记为W3，按照以下公式计算脂肪含量：脂肪含量=（W3-W2）/W1。具体试剂与流程参考索氏抽提法（GB/T 5009.6）。

1.5 数据处理

试验数据使用Excel软件和SPSS 19.0统计软件进行统计与分析，结果均以平均值±标准差表示。先对试验数据进行单因素方差分析，若影响达到显著水平再采用Duncan氏法进行多重比较。

2 结果与分析

2.1 3种不同蛋白质含量饲料对繁育期克氏原螯虾肌肉中营养指标的影响

2.1.1 3种不同蛋白质含量饲料对繁育期克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量的影响。

由表1可知，11月和1月A组与B、C组繁育期克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量差异显著，而12月份肌肉中蛋白质含量差异不显著。11月和12月，克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量明显较高。A组和B组繁育期克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量仅在12月比C组有所提高。总体上，A组繁育期克氏原螯虾肌肉中的蛋白质含量相对最低，C组蛋白质含量相对最高。同时，3种饲料喂养下12月克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量增长最为明显，1月最低，存在明显的线性关系，表明有明显的时间变化。此外，12月各组繁育期克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量没有明显差异（P>0.05）。

2.1.2 3种不同蛋白质含量饲料对繁育期克氏原螯虾脂肪含量的影响。

由表2可知，11月A、B、C组繁育期克氏原螯虾肌肉中的脂肪含量差异显著。12月和1月各组脂肪含量差异不显著。C组克氏原螯虾的脂肪含量与A、B组相比明显增加，A组相对最低。总体上，B、C组克氏原螯虾的脂肪含量明显较低，且11、12月各组脂肪含量远高于1月。各组在不同时间的脂肪含量均随时间的变化而出现明显的下降趋势，其中C组下降趋势最为明显，而A、B组下降趋势较为平缓。

2.2 繁育期不同月份克氏原螯虾肌肉营养指标的比较

通过3个月的数据采集，对繁育期不同月份克氏原螯虾的营养指标进行比较，旨在为克氏原螯虾的营养指标研究提供数据支持。

2.2.1 繁育期不同月份克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量的比较。

由表3可知，A组克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量1月最低，11月次之，12月最高，1月与11月显著低于12月（P<0.05）。B组克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量1月最低，11月次之，12月最高，1月显著低于11月和12月。C组克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量1月最低，12月次之，11月最高。总体上，12月克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量最高，11月次之，1月最低。

2.2.2 繁育期不同月份克氏原螯虾肌肉中脂肪含量的比较。

由表4可知，A组克氏原螯虾肌肉中脂肪含量1月最低，11月次之，12月最高;11月和12月间差异不显著，但二者与1月差异显著（P<0.05）。B组克氏原螯虾肌肉中脂肪含量1月最低，12月次之，11月最高，三者间差异并不显著。C组克氏原螯虾肌肉中脂肪含量1月最低，12月次之，11月最高，三者间差异不显著。总体上，克氏原螯虾肌肉中脂肪含量11月最高，12月其次，1月最低。

2.3 繁育期克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量和脂肪含量的相关性分析

将每种饲料投喂的克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量和脂肪含量每个月的数据进行整理，并进行相关性分析。虽然饲料各不相同，但克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量与脂肪含量存在一定的正相关，但相关性未达到显著水平。其中，C组克氏原螯虾蛋白质含量与脂肪含量的相关性最强，B组其次，A组最低。克氏原螯虾繁育期肌肉中蛋白质含量与月份呈极显著相关，不同饲料对克氏原螯虾肌肉中的蛋白质含量有极显著影响，而脂肪含量的增长与月份的相关性较低。

3 讨论

3.1 克氏原螯虾肌肉营养成分分析

经过对克氏原螯虾肌肉中营养成分的分析发现，其肌肉营养成分包括水分85.60%、蛋白质含量14.18%、脂肪含量0.20%及其他。由于试验的主要目的并非克氏原螯虾个体成分含量分析，并且克氏原螯虾材料采用活体解剖，所以水分含量较高。中国水产科学研究院淡水渔业研究中心扬中基地克氏原螯虾肌肉营养成分与唐黎等[8]对贵州稻田养殖克氏原螯虾肌肉中营养成分测定结果相一致，符合克氏原螯虾正常肌肉营养成分水平。

3.2 3种饲料对繁育期克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量的影响

蛋白质是克氏原螯虾肌肉的主要组成成分，饲料蛋白质含量的不同对克氏原螯虾生长生活有不同的影响。克氏原螯虾繁育期的成长需要饲喂充足和较高含量的营养蛋白。该试验中3种饲料中大豆饲料对克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量的增长较其他2种饲料有更明显的促进作用，但在1月与11月、12月间存在差异，由此可判断无锡地区冬季的来临及温度的下降促使克氏原螯虾体质下降，摄食量降低，同时也存在着虾不同个体差异显著（P<0.05）。

3.3 3种饲料对繁育期克氏原螯虾肌肉中脂肪含量的影响

与蛋白质一样，脂肪也是克氏原螯虾肌肉的主要组成部分，吴东等[13]的试验结果与该试验结果相一致，不同蛋白质含量的饲料对克氏原螯虾肌肉中脂肪含量的影響不显著，进一步证实了上述观点。这表明不同含量蛋白质饲料的投喂对克氏原螯虾肌肉中脂肪含量的增长不存在明显影响。因此，饲喂克氏原螯虾在其肌肉脂肪含量的增长上仍需进一步探究。

3.4 繁育阶段对繁育期克氏原螯虾肌肉中营养成分的影响

该试验中繁育期克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量12月最高，11月其次，1月最低，1月与其他月份间差异较大。从脂肪含量来看，11月最高，12月其次，1月最低。克氏原螯虾在3种不同蛋白含量饲料的投喂下肌肉中蛋白质含量与月份存在极显著的相关性，考虑到季节动态变化的因素，推测一方面是因为性腺发育影响蛋白质与脂肪含量，另一方面是因为克氏原螯虾进入冬眠期前在11月与12月囤积能量，而在1月份会有一定的生理消耗。

3.5 繁育期克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量与脂肪含量的相关性分析

邓慧芳等[27]研究了不同光照和饲料对克氏原螯虾生长、非特异性免疫酶及体成分的影响，于宁等[21]研究了克氏原螯虾饲料最适能量蛋白质比，他们的试验结论与该试验结论（繁育期克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量与脂肪含量存在正相关）相符。 该试验结果还发现，在不同含量蛋白质饲料的饲喂下，繁育期克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量有所增长，这是否表明该研究中含有不同含量蛋白质的混合饲料对克氏原螯虾繁育期存在促进作用，这需要进一步研究证实。

4 结论

该试验利用3种不同饲料喂养克氏原螯虾，结果发现繁育期不同月份对克氏原螯虾肌肉中蛋白质和脂肪含量的影响显著，其肌肉中蛋白质含量12月最高，11月其次，1月最低。脂肪含量11月最高，12月其次，1月最低。由此判断出克氏原螯虾养殖的最适时间及其对环境的要求。同时，分析了不同饲料对繁育期克氏原螯虾肌肉中营养指标的影响，繁育期克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量与脂肪含量存在正相关，但差异不显著，确定了大豆混合饲料中的蛋白比对繁育期克氏原螯虾肌肉中蛋白质的增长有明显促进，为进一步确定克氏原螯虾饲料的蛋白比提供理论支持，但对繁育期克氏原螯虾肌肉中脂肪含量的增长未发现明显的促进作用。同时，此次人工饲料的选择对环境无污染，同时制作简单，成本低廉，适合于现今对克氏原螯虾大规模的养殖需求，对规模化克氏原螯虾养殖及种苗的繁育期间因饲料投入带来的成本降低具有较好的效果和借鉴意义。

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