李 梅，郭映辉，张文超，翟玉磊，周珊珊，李贵霞

（河北医科大学附属河北省儿童医院检验科，河北 石家庄 050031）

惰性凝聚杆菌原名惰性嗜血杆菌，最初被归属于嗜血杆菌属，2006年被划分到放线杆菌属，目前被划归到凝聚杆菌属。与其亲缘性相近的有嗜沫凝聚杆菌、副嗜沫凝聚杆菌和伴放线凝聚杆菌均为凝聚杆菌属。我们分别在2018年3月和8月从2例眼分泌物样本中分离到2株惰性凝聚杆菌，现对其形态学、质谱分析结果以及抗菌药物谱进行报道。

1 病例资料

1.1 菌株编号18023016

患儿，男，出生3个月。2018年2月12日发现右眼角膜上出现“白点”，于2018年2月30日于河北医科大学附属河北省儿童医院眼科就诊。入院查体：体温37.0 ℃，脉率140次/min，呼吸频率36次/min，发育正常，营养中等，神志清楚，心、肺、腹、脊柱及四肢检查未见异常。眼部专科检查：右眼角膜刺激征（+），睑结膜充血，球结膜混合充血，角膜中央偏鼻侧可见1处圆片状灰白色溃疡灶，角膜荧光素染色（+），周围角膜水肿。左眼睑结膜充血，球结膜轻度充血，角膜染色示鼻侧可见点状着色。双侧前房深浅可，未见明显浮游物。瞳孔双侧正大等圆，对光反应存在。诊断为右眼角膜溃疡，双眼角膜炎。入院后按照检查结果给予局部抗感染治疗，给予左氧氟沙星眼水点双眼4次/d，妥布霉素眼膏点双眼2次/d，复方托吡卡眼水点右眼1次/d，小牛血去蛋白提取物眼胶点双眼4次/d，1周后右眼角膜溃疡较之前好转，患儿出院。

1.2 菌株编号18073021

患儿，女，出生3 d，双眼内眦部隆起3 d，左眼红肿1 d，于2018年7月30日10：07收入院，查体：体温36.6 ℃，脉率130次/min，呼吸频率42次/min，发育正常，营养中等，神志清楚，心、肺、腹、脊柱四肢检查未见异常，脐部微隆起；眼部专科检查：双眼泪囊区隆起，局部可触及硬结，右眼泪囊区色青紫，左眼泪囊区红肿，按压可见黄色分泌物溢出，双眼睑结膜稍充血，球结膜未见明显充血，无水肿，角膜清。入院诊断：（1）双眼泪囊突出；（2）左眼泪囊炎。入院后积极完善各项常规检查，于2018年8月2日全麻行内窥镜下双侧鼻腔泪囊造影术，手术进行顺利，术后冲洗双眼泪道，冲洗通畅，吞咽明显，无呛咳，出院。出院后继续给予妥布霉素眼水点双眼4次/d，妥布霉素眼药膏涂双眼1次/晚，注意眼部卫生，5 d后复查，症状好转。

2 实验室检查

2.1 细菌培养、鉴定

将送检分泌物拭子样本接种于哥伦比亚血琼脂平板、中国兰琼脂平板和巧克力琼脂平板[贝瑞特生物技术（郑州）有限责任公司]，置于5% CO2、35 ℃恒温培养箱，培养24 h后，血琼脂平板上长出针尖样小菌落，巧克力琼脂平板上长出稍大、干燥、无色菌落（图1），中国兰琼脂平板未见菌落生长。菌落涂片染色为革兰阴性小杆菌（图2）。取巧克力琼脂平板上的菌落涂布于VITEK MS一次性靶板（法国生物梅里埃公司），加入0.5 μL甲酸，再加入1 μL基质液（4-羟基-2-甲基肉桂酸）（法国生物梅里埃公司），自然干燥后采用VITEK MS仪（法国生物梅里埃公司）进行检测，以标准菌株（ATCC 8739）为校准菌株，鉴定为惰性凝聚杆菌，鉴定百分率均为99.9%，其质谱图见图3。采用法国生物梅里埃公司VITEK 2 Compact自动化鉴定药敏仪及配套NH细菌鉴定卡，鉴定结果为灰色奈瑟球菌，鉴定百分率为88%，生化鉴定编码为0200000040。送北京医院检验科采用MALDI Biotyper质谱仪（德国布鲁克公司）鉴定，结果也为惰性凝聚杆菌。

2.2 体外药物敏感性试验

根据美国临床实验室标准化协会（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）M45文件中相关标准，采用纸片扩散法进行体外药物敏感性试验。HTM平板和药物敏感性试验纸片均购自温州康泰生物科技有限公司，2株细菌均为β-内酰胺酶阴性，氨苄西林、氨苄西林-舒巴坦、阿莫西林-克拉维酸、头孢噻肟、头孢曲松、美罗培南、亚胺培南、阿奇霉素、左氧氟沙星、四环素、氯霉素、复方磺胺甲噁唑敏感。

图1 细菌培养48 h菌落形态

图2 菌株革兰染色镜下形态（×1 000）

图3 细菌鉴定质谱图

3 讨论

凝聚杆菌属细菌为革兰阴性短杆菌，有菌毛、无芽胞、无动力、兼性厌氧，常定植或共生在人、哺乳动物和鸟的消化道、呼吸道、泌尿生殖道黏膜表面，多为动物病原菌，具有狭窄的宿主范围，是正常口腔微生物群的一部分，特别是牙菌斑的正常菌，只在创伤或黏膜破损时，凝聚杆菌属才会侵入健康组织引起感染，可致心内膜炎、软组织感染等。有研究结果显示，嗜沫凝聚杆菌可引起复杂性脑脓肿伴急性感染性心内膜炎[1]，也可引起化脓性关节炎[2]。有研究从乳腺感染脓液样本和细菌性心内膜炎血液样本中检出伴放线凝聚杆菌[3-4]。

惰性凝聚杆菌属于凝聚杆菌属，是人类口咽部的共生菌，关于其致病性的研究报道比较少见，有研究认为惰性凝聚杆菌与细胞结构具有黏附性，且与其他细菌共存，是引起牙菌斑的原因[5]。惰性凝聚杆菌也可能引起心内膜炎、菌血症、肾盂肾炎[6-8]。

由于惰性凝聚杆菌在临床感染中相对较为少见，且不能用普通革兰阴性菌鉴定卡进行鉴定，选择特殊的苛养菌鉴定卡又容易与灰色奈瑟球菌混淆，因此极易被误鉴定为其他细菌。近年来，随着激光解析电离飞行时间质谱和16SrRNA检测等新的微生物鉴定技术的发展与应用，越来越多的凝聚杆菌被检出。

凝聚杆菌属细菌对广谱头孢菌素和氟喹诺酮类抗菌药物均敏感，对青霉素和氨苄西林有较高的敏感性，1项针对11个嗜沫凝聚杆菌临床分离株的研究发现，其对青霉素的敏感性高达82%，对氨苄西林、阿莫西林-克拉维酸、头孢曲松、美罗培南、左氧氟沙星的敏感率为100%[9]，但也有产β-内酰胺酶菌株。本微生物实验室检出的这2株惰性凝聚杆菌均为β-内酰胺酶阴性，所以对氨苄西林、氨苄西林-舒巴坦、阿莫西林-克拉维酸、头孢噻肟、头孢曲松、美罗培南、亚胺培南、阿奇霉素、左氧氟沙星、四环素、氯霉素、复方磺胺甲噁唑均敏感。