黄 平，王 健，许玮琦

（四川省阿坝州林业中心医院医学检验科，四川 成都 611830）

幽门螺杆菌（Helicobacterpylori，Hp）是消化性溃疡（petic ulcer，PU）的主要致病菌，可致胃肠黏膜组织损伤，进而导致溃疡的发生。Hp产生的细胞毒素相关蛋白（cytotoxinassociated protein，CagA）、空泡毒素A蛋白（vacuolar protein toxin A，VacA）、尿素酶A（urease A，UreA）和尿素酶B（urease B，UreB）等多种毒力因子是决定其感染临床后果的重要因素，不同的毒力因子可产生不同程度的致病力[1]。临床将Hp分为Ⅰ型和Ⅱ型，Ⅰ型Hp能产生CagA和/或VacA，Ⅱ型Hp仅产生UreA和UreB，不产生CagA和VacA，2种类型Hp的致病力存在着较大的差异[2]。本研究对214例PU患者进行回顾性分析，并与慢性浅表性胃炎（chronic superficial gastritis，CSG）患者和健康体检者进行对比，旨在探讨Hp抗体血清分型检测对PU的诊断价值，以期为临床诊治提供参考依据。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取2018年2月—2019年4月阿坝州林业中心医院收治的PU患者214例（PU组），其中男125例、女89例，年龄（44.72±3.85）岁。纳入标准：（1）经临床症状、胃镜检查等确诊为PU，诊断参照《消化性溃疡诊断与治疗规范（2016年，西安）》[3]中关于PU的诊断标准；（2）近1个月内未接受非甾体类抗炎药、抗菌药物、抑酸剂、质子泵抑制剂、铋剂及激素等治疗；（3）年龄18～70岁，性别不限；（4）无胃肠道手术史。排除标准：（1）复合性溃疡；（2）合并其他消化道疾病，如胃食管反流、胃炎、恶性溃疡等；（3）合并免疫系统疾病、血液系统疾病、心脑血管系统疾病、恶性肿瘤及肝、肾、肺等重要脏器功能不全；（4）有酗酒、暴饮暴食等不良生活习惯；（5）妊娠期、哺乳期妇女。另选取同期同院接受治疗的146例CSG患者，其中男82例、女64例，年龄（45.02±4.02）岁，排除合并其他消化道疾病、脏器功能不全及有不良生活习惯者，作为CSG组。以同期同院118名健康体检者[男67名、女51名，年龄（44.49±3.76）岁]作为对照组。本研究经阿坝州林业中心医院医学伦理委员会审批通过，并向所有研究对象告知本研究相关事项后获得其知情同意。

1.2 方法

1.2.114C尿素酶呼气试验 所有研究对象均于空腹或禁食4 h后接受14C尿素酶呼气试验。

1.2.2 Hp抗体血清分型检测 抽取所有研究对象清晨空腹状态下静脉血3 mL，离心后取血清置于2～8 ℃冰箱中保存待测。采用免疫印迹法检测CagA抗体、VacA抗体、UreA抗体和UreB抗体，试剂购自深圳帕劳特生物制品有限公司，严格按照试剂盒说明书要求进行操作。CagA抗体和/或VacA抗体阳性为Ⅰ型Hp；仅UreA抗体和/或UreB抗体阳性，CagA抗体和VacA抗体阴性为Ⅱ型Hp。比较3组Hp阳性检出率、Hp抗体血清分型、Ⅰ型Hp感染者CagA抗体及VacA抗体的表达情况。

1.3 质量控制

（1）制定明确的纳入标准、排除标准，并严格按照标准纳入研究对象，确保组间基线资料的可比性；（2）由经验丰富的同一组检验医师进行Hp抗体血清分型检测；（3）认真核对所有研究数据，录入员采用双轨录入法录入数据资料后进行核对、补漏、校正，以确保所有数据的可靠性和真实性。

1.4 统计学方法

采用SPSS 17.0软件进行统计分析，正态分布的计量资料采用±s表示，组间比较采用t检验；计数资料以例或率表示，组间比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组研究对象一般资料的比较

3组研究对象年龄等一般资料比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。

2.2 3组14C尿素酶呼气试验结果

PU组、CSG组14C尿素酶呼气试验阳性率分别为85.51%（183/214）、76.03%（111/146），明显高于对照组的42.37%（50/118），差异有统计学意义（P＜0.05）；PU组14C尿素酶呼气试验阳性率明显高于CSG组，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。

2.3 3组Hp抗体血清分型的比较

3组Hp抗体血清分型比较，差异具有统计学意义（P＜0.05）。PU组、CSG组Ⅰ型Hp感染率明显高于对照组，Ⅱ型Hp感染率低于对照组（P＜0.05）；PU组Ⅰ型Hp感染率明显高于CSG组，Ⅱ型Hp感染率低于CSG组（P＜0.05）。见表1。

表1 3组Hp抗体血清分型比较 例（%）

2.4 3组Ⅰ型Hp抗体检测结果比较

3组Ⅰ型Hp感染者CagA+VacA抗体和单一CagA/VacA抗体阳性率比较，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。PU组、CSG组CagA+VacA抗体阳性率均明显高于对照组，而PU组CagA+VacA抗体阳性率明显高于CSG组（P＜0.05）。PU组、CSG组CagA+VacA抗体阳性率均显著高于单一CagA/VacA抗体阳性率（P＜0.05）。见表2。

表2 3组Ⅰ型Hp CagA抗体、VacA抗体表达情况比较例（%）

3 讨论

我国Hp感染率为40%～65%，其中大部分Hp感染者发生慢性活动性胃炎，部分Hp感染者由胃黏膜炎症进一步发展为溃疡，甚至出现癌变[4]。Hp定植于胃黏膜上皮表面，可通过产生CagA、VacA和UreA、UreB等毒力因子，诱导胃黏膜发生免疫应答，释放各种炎性介质，导致胃黏膜细胞损伤[5]。在病变处黏膜受损时，Hp产生的黏液酶可降解黏液，促进H+反弥散，尿素酶水解黏膜上皮表面的尿素产生的氨使局部黏膜pH值升高，增加胃泌素释放，刺激胃酸分泌增加，过高的胃酸可加剧胃黏膜损伤，引起胃黏膜上皮炎性改变，最终形成溃疡[6]。本研究结果显示，PU组14C尿素酶呼气试验阳性率高达85.51%，CSG组14C尿素酶呼气试验阳性率也高达76.03%，均明显高于对照组的42.37%（P＜0.05），进一步证明了Hp感染在胃黏膜病变和消化性溃疡发生中的作用。

临床实践发现，Hp感染后产生的病理变化、临床后果并不一样，这与Hp菌株的基因多态性有关[7]。Hp的毒力因子较多，其中以CagA、VacA为主，是决定Hp致病力高低的重要毒力因子。CagA进入胃黏膜上皮细胞后，可诱导白细胞介素-8产生，引起中性粒细胞浸润，造成胃黏膜炎症损伤，同时可引起细胞信号转导通路改变，促进胃上皮细胞有丝分裂，诱导细胞骨架结构重排而致癌变[8]。VacA进入胃黏膜上皮细胞后可引起空泡样变性，并诱导细胞凋亡，使细胞间的紧密连接蛋白表达减少，削弱胃黏膜的屏障功能和修复功能，易形成溃疡，诱发癌变[9]。Ⅰ型Hp菌株分泌CagA和/或VacA，这类菌株毒性较大，可引起较严重的胃黏膜病变，长期Hp感染可使胃黏膜病变发生进展，甚至诱发癌变[10]。而Ⅱ型Hp菌株不表达CagA、VacA，为低毒力菌株，不会对胃黏膜造成实质性损害，大多只会导致胃黏膜浅表的炎症，长期Hp感染也可无明显临床症状。本研究结果显示，PU、CSG患者均以Ⅰ型Hp感染为主，且PU患者Ⅰ型Hp感染率明显高于CSG患者，提示Ⅰ型Hp菌株毒性更强，可导致较严重的胃黏膜损伤，与相关研究结果基本一致[11]。此外，本研究结果显示，PU、CSGⅠ型Hp感染者均以CagA抗体、VacA抗体同时表达为主，CagA+VacA抗体阳性率均显著高于单一CagA/VacA抗体阳性率，提示同时分泌CagA、VacA的I型Hp菌株为高毒力菌株，是消化性溃疡的主要致病菌。

综上所述，PU患者以CagA抗体、VacA抗体均阳性表达为主，Hp抗体血清分型检测增加了PU诊断结果的准确性。此外，对于PU Hp感染者应进行抗体血清分型检测，建议对于表达CagA抗体、VacA抗体的I型Hp感染者应及时、严格地行Hp根除治疗，其他患者可先行临床观察，以提高医疗资源有效利用率，同时可避免耐药菌株的产生。