冯美凤

（崇左市第二人民医院 广西 崇左 532800）

结核病是由结核分枝杆菌引起的一种慢性传染病,是全球最具威胁的传染病之一.据世界卫生组织统计,我国患结核病人数居世界第2 位,是全世界22 个结核病流行严重的国家之一[1]。患有结核病不仅增加了患者的痛苦，给患者及其家庭带来了巨大的经济压力，还威胁他人安全，成为社会公共卫生问题。尽早明确诊断，及时规范治疗多数患者可以治愈。当前，我国在结核病控制方面所面临的问题是结核病的早期诊断，尤其是痰菌阴性肺结核的诊断[2]。目前，实验室结核杆菌检测方法众多，寻找检测特异性强，操作简单、快捷的检测方法是临床关注的重点[3]。痰涂片荧光染色查找法、环介导等温扩增（LAMP）法是临床常用检测方法。现将这两种检验方法进行比较分析，为临床检测方法的选择提供参考。现报告如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取2017 年7 月—2018 年8 月，到崇左市第二人民医院就诊的98 例疑似肺结核患者，其中男性72 例，女性26 例，年龄18 ～78 岁，主要临床表现为咳嗽、气短、咯痰、胸痛、乏力、纳差、发热、盗汗以及消瘦等[5]非特异性结核感染症状。

1.2 检验方法

所有患者均收集其晨起痰液标本，即晨起深呼吸后，咳痰，由专门容器收集；若患者无法咯出痰液，则收集其咽试子标本，即肺部分泌物[6]。所有标本采集完毕后送检实验室进行检验，检验方法包括金胺O 荧光法、环介导等温扩增法（LAMP）。

1.2.1 检验仪器及试剂金胺O 荧光染色法（试剂：珠海贝索抗酸染色试剂盒，厂家：珠海贝索生物技术有限公司 批号：416051；仪器：生物显微镜EX30 厂家：宁波舜宇仪器有限公司）

1.2.2 金胺O 荧光法 用竹签挑取适量的痰液，制成20*15mm 的厚膜涂片，自然干燥，火焰固定后，滴加金胺O 染色液避光染色，水洗，用盐酸酒精液脱色，直至涂片无黄色为止，水洗，用复染色液染色，水洗，吸干水分，自然干燥，荧光显微镜下低倍镜检，抗酸杆菌为亮黄色。结果判定：观察50 个视野发现1-9 条抗酸杆菌，表示结核杆菌阳性。

1.2.3 环介导等温扩增（LAMP） 取痰标本与4 倍体积的氢氧化钠（4%）液化30min,取1ml 液化后的痰液离心弃上清液，沉淀用1ml 生理盐水（0.9%）悬浮，12000rpm 离心5min,弃去上清液，留沉淀物，100 恒温处理10 分钟，12000rpm 离心2 分钟，上清液做模版备用，加入反应液，3000rpm 离心30 秒，打开恒温扩增荧光检测仪，将反应管放入仪器内，开始反应，根据仪器给出的扩增曲线和出峰时间判定结果。

1.3 统计学方法

数据采用SPSS19.0统计学软件分析处理，计数资料采用率（%）表示，行χ2检验，计量资料用均数±标准差（±s）表示，行t 检验，P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2.结果

98 例疑似肺结核患者，涂片后经金胺O 荧光法镜检，检出痰结核杆菌阳性者24 例，阳性率24.49%；经环介导等温扩增（LAMP）检查，痰结核杆菌阳性56 例，阳性率57.14%。环介导等温扩增（LAMP）检查结果阳性率显著高于金胺O 荧光法检查，差异显著，χ2=21.628，P ＜0.05,差异具有统计学意义。见表。

表 两种方法检验结果比较

3.讨论

此次研究结果显示，金胺O 荧光染色涂片法检出结核杆菌阳性例数为24 例，阳性率24.50%；王成勇[7]在2004 年报道仅有40%～50%的活动性肺结核患者痰涂片呈阳性，涂片检出阳性率在19.9%～35%，本组实验患者涂片阳性率占24.49%，与文献资料报道相吻合。等温扩增检出结核杆菌阳性56 例,阳性率 57.14%，等温扩增检出结核杆菌阳性的阳性率高于荧光染色镜检阳性率，显著高于常规实验室诊断，在阳性检出率与金胺O 荧光染色涂片法相比明显列高，两组数据差异有统计学意义（P ＜0.05）。

综上，环介导等温扩增（LAMP）检查效果良好，能提高阳性检出率，全面评估患者病情进展程度，为治疗方案提供强有力的保障。

结核菌检查是确诊肺结核最具有特异性的方法，痰中找到结核菌是确诊肺结核的主要依据[8]。近年来，医疗事业不断发展，人们越来越重视结核病，在临床上也取得很大的成果，然而结核病患者还是在逐年增加。结核病在发展早期症状不明显，很难被发现，很难得到确诊，这样就会导致病情的延误，大大的延误治愈时间，而患者的身体机能也会出现下降的情况，导致疾病发生转移，甚至会出现进一步恶化，给患者的治疗带来很大的困难[9]。所以在临床诊疗过程中，选择合适的检验方法对患者做出诊断，从而制定行之有效的治疗方案至关重要。此次研究表明，涂片镜检金胺O 荧光染色法检验迅速，操作简单，实验设备要求不高，适用大量标本快速检查[9]。等温扩增（LAMP）利用基因片段扩增技术，技术操作简便，诊断快速、灵敏度高、费用低廉等，是一种准确率和检出率较高的检查方法，值得临床应用。