侯 萍，李晓丰，李剑平

沈阳中心血站检验科，辽宁沈阳 110044

对献血者进行正确的血型鉴定是保证临床用血安全、有效输血的前提条件。沈阳中心血站每年都有几万人次的无偿献血者，检验科会对送检的血样进行ABO血型初筛，初筛ABO血型正反定型不一致的标本会送到沈阳中心血站血型参比室进行进一步的血型鉴定，确保血型正确无误。本文对沈阳中心血站检验科2018年1月至2019年1月送检的疑难血型288例献血者的相关资料进行回顾性分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 收集沈阳中心血站检验科2018年1月至2019年1月送检的288例献血者疑难血型血样，其中男148例，女140例；年龄20～55岁。

1.2试剂与仪器 抗A、抗B、抗A1、抗AB、抗H、ABO标准细胞、筛选细胞和谱细胞购自上海血液生物医药有限责任公司[1]；另一组抗A 、抗B和 ABO标准细胞购自北京金豪制药股份有限公司。所有试剂均在有效期内使用。人类ABO血型基因检测试剂盒购自天津秀鹏公司。仪器为Olympus显微镜，Kubota细胞洗涤离心机。

1.3方法 本研究对沈阳中心血站检验科送检的ABO血型正反定型不符标本用试管法进行血型血清学鉴定。包括2个厂家的试剂结果比对，不规则抗体筛选和鉴定、红细胞吸收-放散试验、型物质等，具体方法参考文献[2-3]。沈阳中心血站对部分ABO血型正反定型不符的标本进行PCR序列特异性引物(PCR-SSP)红细胞基因分型[4-5]。所有试验方法均严格按照试剂说明书和本实验室操作规程执行。

2 结 果

2.1献血者ABO血型不符原因分析 2018年1月至2019年1月共采集106 061例血样，沈阳中心血站检验科送检ABO血型正反定型不符标本288例，占0.27%，在正反定型不符的血标本中，血清中抗体减弱196例，占68.06%；不规则抗体26例，占9.03%；ABO亚型22例，占7.64%；冷凝集素3例，占1.04%；抗原减弱3例，占1.04%；抗体减弱加不规则抗体1例，占0.35%；其他37例，占12.85%。

2.2部分标本血清学结果和基因分型结果比较 本研究对其中11例正反定型不符的标本进行PCR-SSP红细胞基因分型检测，血清学检测原因、结果与基因分型结果比较见表1。

表1 部分标本血清学结果和基因分型结果比较

3 讨 论

准确鉴定献血者血型对临床血液正确发放和安全输血至关重要。2018年1月至2019年1月沈阳中心血站共检测106 061例无偿献血者血样，其中288例为ABO血型正反定型不符，占0.27%。根据回顾性数据对ABO血型正反定型不符的献血者采用以下方法确定血型：(1)抗体减弱,反定型多加几滴血清，同时延长反应时间，并在4 ℃冰箱放置一段时间后观察结果。(2)ABO亚型,该种血型不符多为红细胞上A或B抗原减弱，通过正定型加做抗A1、抗AB和抗H，反定型加做A2细胞，并通过加做吸收-放散试验和型物质确认[6-7]，同时对血清学方法不能完全定型的标本进行PCR-SSP红细胞基因分型[8]。(3)冷凝集素,冷凝集素在冬天或者天气较冷的季节献血人群发生较多，献血者血清在低温和标准红细胞和自身细胞发生凝集反应，通过将含有冷凝集素的试管放到37 ℃孵育或者用37 ℃盐水反复洗涤细胞至不凝集，然后重新定型[9]。(4)不规则抗体,对O细胞出现凝集，而自身细胞阴性的献血者进行抗体筛选和抗体鉴定，抗体鉴定检出多为室温抗体，有抗M和抗P1[10-11]，对检出有特殊抗体或者未鉴定出具体抗体的献血者血浆报废，红细胞洗涤后应用于临床。献血者多为健康人群。(5)人为因素,沈阳中心血站对检验科送检的疑难血型重新定型，如发现定型完全错误或者为正常血型，多与初筛人员未按照标准操作规程操作或者责任心不强有关，需加强相关人员的学习和培训[12-13]。

总之，造成献血者ABO血型鉴定困难的原因很多[14]，但最常见的为献血者自身抗体或抗原减弱、不规则抗体产生，冷凝集素，以及工作人员的责任心不强等人为因素。作为采供血机构的血液中心，准确鉴定ABO血型是临床用血的前提。工作人员如遇到疑难ABO血型应认真分析其可能出现的原因，在排除环境、试剂及人为等因素后，应重新认真进行试验或者加做其他试验，以确保每名献血者血型的准确性，最终保证临床用血安全。