蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉对小鼠免疫功能的作用

2020-02-10赵海燕

中文信息 2020年2期

赵海燕

摘要：目的探讨蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉对小鼠免疫功能的作用。方法 KM雄性小鼠176只，随机平均分为对照组、低剂量组（110mg/kg.bw）、中剂量组（220mg/kg.bw）和高剂量组（440mg/kg.bw），连续灌胃30d后，进行碳粒廓清实验、二硝基氟苯诱导小鼠迟发性变态反应和血清溶血素测定。结果与对照组比较，蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉中、高剂量组（220mg/kg.bw、440mg/kg.bw）能顯著增加小鼠碳廓清指数K及吞噬指数α;在迟发型变态反应实验中，中、高剂量组（220mg/kg.bw、440mg/kg.bw）能显著增加小鼠耳肿胀度，差异均具有统计学意义（P<0.05，P<0.01）;但各剂量组对小鼠抗体积数均无显著性差异。结论蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉具有良好的免疫调节作用，可增强小鼠的免疫功能。

关键词：蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉小鼠免疫功能

中图分类号：R-33文献标识码：A文章编号：1003-9082（2020）02-0-01

冬虫夏草属于传统的滋补中药材，价格昂贵，且野生资源枯竭，逐渐被人工虫草菌粉所替代[1]。在1980年时，研究者在天然冬虫夏草中分离出多个菌种，包括蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉等，大量临床实践表明，蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉可有效提高免疫功能。本实验观察了蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉对小鼠免疫功能的作用。

一、实验材料与方法

1.受试样品

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉（批号：20180912，江苏某药业有限公司提供）。

1.1受试动物

KM种雄性小鼠，体重18～22g（由西安交通大学实验动物中心提供，质量合格证号：SCXK（陕）2014-0219）

1.2主要试剂与仪器

DNFB（二硝基氟苯）、SRBC（绵阳红细胞）、Na2CO3、印度墨汁、UB8100B紫外可见分光光度计、电子天平、打孔器、离心机。

2.方法

2.1剂量选择及动物分组

试验设对照组（纯水）及低剂量组（110mg/kg），中剂量组（220mg/kg），高剂量组（440mg/kg）（分别相当于人体推荐用量的5倍、10倍和20倍）。各剂量组分别取受试物1.1g、2.2g、4.4g加纯水至200mL，充分混匀后灌胃。灌胃量均为20mL/kg.bw，每天一次，连续灌胃30天。

实验动物共分为4个指标测定组，每个指标测定组均分别包括对照组和受试物三个剂量组，每组11只动物。

2.2脏器/体重比值测定

连续灌胃30天后，称取动物体重，颈椎脱臼处死动物，取出动物的脾脏、

胸腺，分别称出脾脏、胸腺重量，计算脏器/体重比值（以mg/10g表示）。

2.3小鼠碳粒廓清实验

从小鼠尾静脉注入4倍稀释的墨汁，立即计时，分别于2min、10min从小鼠内眦静脉丛取血20μL，加到含2mL0.1% Na2CO3溶液的试管中，混匀，用UB8100B紫外可见分光光度计，在600nm波长处测定OD值（用0.1% Na2CO3溶液作空白对照）。将小鼠处死，取肝、脾脏，称重，计算碳廓清指数K和吞噬指数α。

2.4二硝基氟苯诱导的小鼠迟发型变态反应实验

小鼠灌胃25d后，每组小鼠腹部皮肤脱毛，用50μL二硝基氟苯溶液涂抹致敏，5d后将10μL二硝基氟苯溶液涂抹小鼠右耳两面进行攻击，24h后处死小鼠，用打孔器取下左右耳壳8mm直径的耳片，称重，以两耳片重量之差值表示肿胀度。

2.5血清溶血素的测定（血凝法）[2]

小鼠连续灌胃的第26d，每只小鼠腹腔注射2%SRBC 0.2mL免疫，连续灌胃4d后，进行小鼠眼眶取血，按标准“血凝法”观察血球凝集程度进行血清溶血素的测定。

2.6数据统计

数据处理采用 SPSSl7.0 统计软件分析，P<0.05为差异有统计学意义。

二、结果

1.脏器/体重测定结果

在四个指标测定组中，各剂量组与对照组相比，初始体重、中期体重、末期体重及体重增重均无显著性差异。各剂量组与对照组小鼠相比，其脾脏/体重比值均无显著性差异，其胸腺/体重比值均无显著性差异，见表1。

2.单核-巨噬细胞功能测定结果（小鼠碳廓清实验）中、高剂量组与对照组小鼠相比，其碳廓清指数K及吞噬指数α均有显著性差异（P<0.05，P<0.01），见表2。

3.细胞免疫功能测定结果（迟发型变态反应实验）

各剂量组小鼠的耳廓肿胀度均高于对照组，且随剂量的增加而增加。与对照组相比，220、440mg/kg剂量组差异有统计学意义（P<0.05，P<0.01），见表3。