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蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉对小鼠免疫功能的作用

2020-02-10 10:52:53 《中文信息》 2020年2期

赵海燕

摘 要:目的 探讨蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉对小鼠免疫功能的作用。方法 KM雄性小鼠176只,随机平均分为对照组、低剂量组(110mg/kg.bw)、中剂量组(220mg/kg.bw)和高剂量组(440mg/kg.bw),连续灌胃30d后,进行碳粒廓清实验、二硝基氟苯诱导小鼠迟发性变态反应和血清溶血素测定。结果 与对照组比较,蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉中、高剂量组(220mg/kg.bw、440mg/kg.bw)能顯著增加小鼠碳廓清指数K及吞噬指数α;在迟发型变态反应实验中,中、高剂量组(220mg/kg.bw、440mg/kg.bw)能显著增加小鼠耳肿胀度,差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);但各剂量组对小鼠抗体积数均无显著性差异。结论 蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉具有良好的免疫调节作用,可增强小鼠的免疫功能。

关键词:蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉 小鼠 免疫功能

中图分类号:R-33文献标识码:A文章编号:1003-9082(2020)02-0-01

冬虫夏草属于传统的滋补中药材,价格昂贵,且野生资源枯竭,逐渐被人工虫草菌粉所替代[1]。在1980年时,研究者在天然冬虫夏草中分离出多个菌种,包括蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉等,大量临床实践表明,蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉可有效提高免疫功能。本实验观察了蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉对小鼠免疫功能的作用。

一、实验材料与方法

1.受试样品

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉(批号:20180912,江苏某药业有限公司提供)。

1.1受试动物

KM种雄性小鼠,体重18~22g(由西安交通大学实验动物中心提供,质量合格证号:SCXK(陕)2014-0219)

1.2主要试剂与仪器

DNFB(二硝基氟苯)、SRBC(绵阳红细胞)、Na2CO3、印度墨汁、UB8100B紫外可见分光光度计、电子天平、打孔器、离心机。

2.方法

2.1剂量选择及动物分组

试验设对照组(纯水)及低剂量组(110mg/kg),中剂量组(220mg/kg),高剂量组(440mg/kg)(分别相当于人体推荐用量的5倍、10倍和20倍)。各剂量组分别取受试物1.1g、2.2g、4.4g加纯水至200mL,充分混匀后灌胃。灌胃量均为20mL/kg.bw,每天一次,连续灌胃30天。

实验动物共分为4个指标测定组,每个指标测定组均分别包括对照组和受试物三个剂量组,每组11只动物。

2.2脏器/体重比值测定

连续灌胃30天后,称取动物体重,颈椎脱臼处死动物,取出动物的脾脏、

胸腺,分别称出脾脏、胸腺重量,计算脏器/体重比值(以mg/10g表示)。

2.3小鼠碳粒廓清实验

从小鼠尾静脉注入4倍稀释的墨汁,立即计时,分别于2min、10min从小鼠内眦静脉丛取血20μL,加到含2mL0.1% Na2CO3溶液的试管中,混匀,用UB8100B紫外可见分光光度计,在600nm波长处测定OD值(用0.1% Na2CO3溶液作空白对照)。将小鼠处死,取肝、脾脏,称重,计算碳廓清指数K和吞噬指数α。

2.4二硝基氟苯诱导的小鼠迟发型变态反应实验

小鼠灌胃25d后,每组小鼠腹部皮肤脱毛,用50μL二硝基氟苯溶液涂抹致敏,5d后将10μL二硝基氟苯溶液涂抹小鼠右耳两面进行攻击,24h后处死小鼠,用打孔器取下左右耳壳8mm直径的耳片,称重,以两耳片重量之差值表示肿胀度。

2.5血清溶血素的测定(血凝法)[2]

小鼠连续灌胃的第26d,每只小鼠腹腔注射2%SRBC 0.2mL免疫,连续灌胃4d后,进行小鼠眼眶取血,按标准“血凝法”观察血球凝集程度进行血清溶血素的测定。

2.6数据统计

数据处理采用 SPSSl7.0 统计软件分析,P<0.05为差异有统计学意义。

二、结果

1.脏器/体重测定结果

在四个指标测定组中,各剂量组与对照组相比,初始体重、中期体重、末期体重及体重增重均无显著性差异。各剂量组与对照组小鼠相比,其脾脏/体重比值均无显著性差异,其胸腺/体重比值均无显著性差异,见表1。

2.单核-巨噬细胞功能测定结果(小鼠碳廓清实验)中、高剂量组与对照组小鼠相比,其碳廓清指数K及吞噬指数α均有显著性差异(P<0.05,P<0.01),见表2。

3.细胞免疫功能测定结果(迟发型变态反应实验)

各剂量组小鼠的耳廓肿胀度均高于对照组,且随剂量的增加而增加。与对照组相比,220、440mg/kg剂量组差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),见表3。

4.体液免疫功能测定结果(血清溶血素的测定)

各剂量组与对照组小鼠相比,其抗体积数均无显著性差异,见表4。

三、讨论

本文通过实验表明,蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉在220、440mg/kg剂量下,明显增强小鼠单核-巨噬细胞功能及DNFB诱导的小鼠迟发性变态反应。结果表明,蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉具有明显增强小鼠细胞免疫功能的作用。

参考文献

[1]傅惠英,张利棕,寿旗扬,等.中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉小鼠免疫功能调节作用的比较[J].中国比较医学杂志,2012,22(9):16-20.

[2]卫生部卫生法制与监督司.保健食品检验与评价技术规范(2003版)[S].北京:人民卫生出版社,2003:22-34.