庄 伟，车敬斌，王建民，高 鹏，张加宾

(济南市人民医院：1.检验科；2.眼科，山东济南 271100)

甲状腺相关眼病(TAO)临床发病率较高，可对患者视觉功能及正常生活造成严重影响。自身免疫性甲状腺病患者为TAO高发群体，尤其是Graves 病，有调查显示，Graves 病患者中，高达25%～50%可产生TAO[1]。当前普遍认为，人体内分泌功能障碍与TAO有关。以往报道称，可溶性黏附分子参与TAO的发病[2]。亦有报道指出，TAO影响因素包括眼眶内皮细胞受到损伤、存在炎性细胞浸润现象等，内皮细胞受损主要变化为黏附分子表达异常增加[3-4]。为进一步明确可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)以及可溶性血管细胞黏附分子1(sVCAM-1)在TAO发展中表达情况，本研究纳入TAO病例150例，分析血清sICAM-1、sVCAM-1表达水平及其与TAO病情关系。

1 资料与方法

1.1一般资料 将本院2016年8月至2018年3月期间收治的150例TAO患者纳入研究，入选标准：(1)与欧洲GO研究组(EUGOGO)提出的诊断标准[5]相符；(2)有确切甲亢病史或合并甲状腺功能性疾病；(3)首次发病，近6个月未接受免疫抑制剂、抗甲状腺素药物或者糖皮质激素治疗；(4)年龄≥18岁。排除标准：(1)伴随造血系统疾病或者肝肾功能异常；(2)合并肿瘤、自身免疫性疾病或者感染性疾病。包括男68例、女82例，患者年龄19～67岁，平均(50.79±6.47)岁，病程0.08～0.33年，平均(0.21±0.03)年。并将同期80例接受健康体检者纳入并作为对照组，包括男34例、女46例，年龄20～66岁，平均(50.23±6.40)岁。全部纳入研究者知情且自愿参与研究。

1.2方法 将TAO患者依据临床活动度评分(CAS)差异进行分组，CAS评分达到4分即为活动期，否则为非活动期，其中活动期组83例，非活动期组67例。同时按TAO病情严重程度进行分组，可以分为轻度组(n=48)、中重度组(n=55)、极重度组(n=47)。记录所有纳入研究者的一般资料[包括性别、年龄、病程、体质量指数(BMI)等]，采集纳入研究者空腹静脉血3 mL，经过10 min离心处理后，获得上层血清，将其置于EP冷冻管之中，且存储于温度为-80 ℃冰箱内，然后酶联免疫吸附(ELISA)双抗体夹心法完成sICAM-1、sVCAM-1浓度测定，采取美国R&D公司生产的检测试剂盒。选择Multiskan MS全自动酶标仪(购自美国Thermo Scientific公司)，调节波长450 nm，进行吸光度(A)值测定，以绘制标准曲线方式获得sICAM-1以及sVCAM-1水平计算结果。

1.3观察指标 比较活动期组、非活动期组与对照组、不同病情程度亚组的一般资料、血清sICAM-1、sVCAM-1水平，并进行相关性分析。

2 结果

2.1CAS分组及对照组间的比较 活动期组血清sICAM-1、sVCAM-1显著高于其余两组(P<0.05)，且非活动期组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

2.2不同病情程度组及对照组间的比较 不同病情程度组与对照组性别、年龄、BMI比较差异无统计学意义(P>0.05)；不同病情程度亚组间病程比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。

表1 CAS分组及对照组间的比较

注：与对照组比较，#P<0.05；与非活动期比较，*P<0.05；-表示该项无数据

表2 不同病情程度组及对照组间一般资料的比较

注：-表示该项无数据

2.3不同病情程度和CAS分期的患者及对照组sICAM-1、sVCAM-1水平比较 不同病情程度组中，活动期患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平显著高于同组内非活动期患者及对照组(P<0.05)，并且在极重度组、中重度组以及轻度组中水平的依次降低，组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 不同病情程度亚组CAS分期患者与对照组sICAM-1、sVCAM-1比较

注：与对照组比较，▲P<0.05；与同组内非活动期比较，#P<0.05；与轻度组活动期比较，*P<0.05；与中重度组活动期比较，△P<0.05

2.4相关性分析 非活动期患者病情程度与血清sICAM-1、sVCAM-1无显著相关性(P>0.05)；活动期患者病情程度与血清sICAM-1、sVCAM-1呈正相关(P<0.05)。见表4。

表4 相关性分析

3 讨论

当前，医学界尚未阐明TAO具体发病机制，考虑到眼眶属于无淋巴器官部位，故临床对其研究通常将免疫细胞与免疫分子作为重点[6-8]。免疫球蛋白超家族包括sVCAM-1与sICAM-1，这两种物质常见于多种细胞膜以及细胞外基质，生理与病理机制中，sVCAM-1与sICAM-1分子主要由配体-受体结合途径发挥自身作用。以往报道称，sVCAM-1与sICAM-1对于白细胞识别、有效转导以及黏附起着介导作用，而白细胞与相应血管内皮细胞均通过黏附方式形成级联反应，从而对机体免疫系统起到调节功效[9-10]。血清sICAM-1的来源普遍认为有两种学说：其中一种是认为细胞膜表面合成并分泌细胞间黏附分子1(ICAM-1)，同时于细胞膜结合部位产生蛋白水解反应，膜外部分主要脱落进入血液系统，并以sICAM-1形式存在；另一种则认为人体内编码ICAM-1的相应mRNA可以经剪切作用将编码跨膜区域以及胞内区碱基有效去除，然后翻译形成sICAM-1。有报道指出，病变组织处合成与分泌的ICAM-1存在一定独特性，能够进入血液系统转变为sICAM-1分子，同时结合体内淋巴功能相关抗原1(LFA-1)配体，作用于淋巴细胞，使得静息状态、未激活状态相应免疫活性细胞大量黏附于病变处，从而发挥定靶功能[11-12]。在体内血液循环带动下，淋巴细胞可以移动至靶器官，sICAM-1分子会结合淋巴细胞表面LFA-1，从而对淋巴细胞有效释放膜信号，最终跨膜游出[13-14]。

本研究通过观察发现，对照组血清样本内有sICAM-1、sVCAM-1检出，提示健康人体血清里面存在一定水平的sICAM-1、sVCAM-1。由于自身免疫性疾病的发生可导致黏附分子表达水平提高及脱落增加，造成血清中检测出的可溶性黏附分子呈现异常升高趋势，因此TAO评估指证可能包括可溶性黏附分子变化。本研究中，活动期组血清样本sICAM-1、sVCAM-1表达明显高于对照组及非活动期组，同时对照组与非活动期组表达无显著差异，与赵勇[15]研究观点相符。说明TAO活动期患者眼睑部位、甲状腺局部存在炎症，可加快黏附分子生成速率，但是TAO非活动期患者血清sICAM-1、sVCAM-1表达正常，可能因为该时期炎症细胞浸润已经开始消退。本研究中，不同病情程度组中活动期患者血清sICAM-1、sVCAM-1表达水平较对照组显著增高，而且在极重度组、中重度组以及轻度组中呈依次降低，表明活动期TAO病情越严重，血清sICAM-1、sVCAM-1表达水平越高，对于TAO活动期患者而言，病情程度能影响sICAM-1、sVCAM-1表达。本文相关性分析显示，活动期患者病情程度与血清sICAM-1、sVCAM-1表达呈显著正相关，而非活动期患者则无此相关性，与张晓斌等[16]观点一致。说明TAO活动期，随着病情加重，将导致sICAM-1、sVCAM-1水平随之升高。

4 结论

TAO活动期病情越严重，血清sICAM-1、sVCAM-1表达水平越高，对其进行检测能为TAO诊治提供参考。