吴冠吉，牟建军，刘富强，郑树慧，蒋伟，张敏

原发性高血压（EH）是最常见的心血管疾病之一。有报道炎症因素在EH的发生、发展及转归中也扮演着极其重要的角色[1]。研究发现高血压患者C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和黏附分子[如P-选择素、细胞黏附分子-1（sICAM-1）]等均明显高于血压正常个体，且呈高度相关。提示高血压可能是一种慢性低度的炎症状态性疾病，在高血压的形成、靶器官损害，尤其是参与动脉粥样硬化的发生都与炎症有着十分重要的关联[2]。盐是原发性高血压的重要易患因素之一。近来有关高盐摄入与炎症状态关系及其机制引起学者关注[3]。动物实验研究表明给盐敏感大鼠喂食高盐饮食，血浆TNF-α水平比低盐饮食显著升高[4]。目前有关盐负荷对血压正常盐敏感者体内炎症因子的影响方面报道较少。本文旨在通过对血压正常个体进行低盐和高盐饮食干预，探索盐负荷对体内炎症因子TNF-α、高敏C反应蛋白（hs-CRP）和MCP-1的影响。

1 资料与方法

1.1 研究对象

在陕西省眉县农村汉族人群中，选择年龄18～60岁，血压正常的自愿者参与试验，性别不限。通过筛查排除严重心血管疾病和肝脏、肾脏、糖尿病等急慢性疾病、影响血压或电解质代谢的内分泌疾病、炎症感染性疾病和孕妇、经常饮酒、吸烟以及不能够坚持完成试验者。共入选30例，年龄（48.7±6.1） 岁，其中男性15例，女性15例。所有参与者均签署知情同意书。

1.2 方法

基线调查和饮食干预：连续3天基线调查，包括病史询问，测量体重、身高、腰围、臀围、血压，采集1次空腹静脉血样，收集1次24小时尿、2次夜尿后进行为期2周的慢性盐负荷饮食干预。采取统一管理、集体配餐的方式，分 2个阶段进行：（1）低盐期（盐3 g/d），相当于（Na 51.3 mmol/d）干预7天；（2）高盐期（盐 18 g/d），相当于（Na 307.8 mmol/d）干预7天。为确保摄盐量精确，现场配备专业厨师，加工的食物本身不含盐和任何含盐制品，就餐时由营养监督员负责将定量的盐包撒入食物中，并监督受试者完成定量就餐。

血压的测量: 在基线调查和每个干预阶段的第2、5、6、7天测量血压。受试者静坐休息 5 min后采用英国产随机零点血压计测量。按照Korotkoff听音法量3次血压，每次测量间隔30 s，求其平均值。参与血压测量的工作人员均经过统一培训并通过合格认证考试。参考国外慢性盐负荷试验中盐敏感性判断标准[5]：于高盐饮食末平均动脉压（MAP） 较低盐饮食期 MAP 升高幅度≥10 %者为盐敏感者，＜10%则为盐不敏感者。MAP=舒张压+1/3 （收缩压-舒张压）。

血、尿标本的收集：每个干预阶段的第5、6、7天，收集3次尿标本（1次24小时尿，2次夜尿），各干预阶段的第6天留取血标本。（1）血标本采集：清晨空腹静脉采血，每次采血量为8 ml（4 ml非抗凝和4 ml EDTA抗凝），2 600 r/min 离心15 min,分离血清、血浆标本于-80℃冷冻保存待测。（2）尿标本收集：分发给参加者24小时或夜尿收集说明和收集容器，使用量筒测量体积，吸取5 ml的尿标本分别转移至每个尿贮存管置于-80 ℃冰箱保存待测。如24小时尿总量小于500 ml，或者收集时间小于22小时，或者总尿肌酐小于7 mmol/24 h尿收集不全，弃用，重新留取。

血浆炎症因子的测定：血浆hs-CRP用免疫放射比浊法测定，试剂盒购自浙江Elican生物公司。血浆TNF-α和单核MCP-1用酶联免疫吸附法（ELISA）测定，试剂盒购自上海Excell生物公司。检测方法严格按试剂盒说明书进行。试剂盒及检测方法的各项指标、室内质量控制指标和其他质控参数均在允许范围内。

尿钠的测定：采用火焰光度计（上海精密仪器仪表有限公司，型号AP1200）法测定尿钠浓度，结果乘以尿总量，以 mmol表示。

1.3 统计学方法

所有数据用SPSS19.0统计软件进行统计分析。数据用均数±标准差（±s）表示，两组受试者各阶段MAP变化比较采用重复测量设计资料的方差分析，组内比较采用配对t检验，组间一般资料比较采用独立样本t检验，两变量间的相关性用线性相关分析。以P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

30例受试者的一般特征（表1）：3O例受试者中共检出盐敏感者 10例（男性3例，女性7例），盐不敏感者20例（男性12例，女性8例），盐敏感检出率为33%。两者间年龄、性别、体重、腰围、体重指数、收缩压、舒张压、平均动脉压、空腹血糖、胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇比较差异均无统计学意义（P均＞0.05）。

表1 盐敏感者和盐不敏感者的一般特征（±s）

表1 盐敏感者和盐不敏感者的一般特征（±s）

注：1 mmHg=0.133 kPa

?

盐敏感者和盐不敏感者低盐期、高盐期平均动脉压变化值（△MAP）变化趋势：图1显示，盐敏感者低盐、高盐期第2、5、6、7天平均动脉压变化值△MAP均明显大于盐不敏感者（P均＜0.01）。

图1 盐敏感者和盐不敏感者低盐、高盐期△MAP变化

盐敏感者和盐不敏感者低盐期、高盐期24小时尿钠排泄量变化（表2）：两者24小时尿钠排泄量低盐期均较基线明显降低，盐负荷后较低盐期均明显升高（P均＜0.001）。

盐敏感者和盐不敏感者低盐期、高盐期血浆炎症因子水平的变化（表3）：两者血浆hs-CRP水平高盐期与低盐期比较差异均无统计学意义（P＞0.05）；而TNF-α和MCP-1水平两者均为高盐期较低盐期增高，差异均有统计学意义（P均＜0.01）。

表2 盐敏感者和盐不敏感者低盐期、高盐期24小时尿钠排泄量变化（±s）

表2 盐敏感者和盐不敏感者低盐期、高盐期24小时尿钠排泄量变化（±s）

注：与同组基线比较*P＜0.01；与同组低盐期比较△P＜0.001

?

表3 盐敏感者和盐不敏感者低盐期、高盐期血浆炎症因子水平的变化（±s）

表3 盐敏感者和盐不敏感者低盐期、高盐期血浆炎症因子水平的变化（±s）

注：hs-CRP:高敏C反应蛋白；TNF-α：肿瘤坏死因子-α；MCP-1：单核细胞趋化蛋白-1。与同组低盐期比较*P＜0.01

?

3 讨论

近年来，高血压作为一种慢性低度炎症性疾病逐渐被越来越多的学者所接受。一些横断面及前瞻性研究显示，高血压患者循环中炎性因子水平明显增高，并且其增高的程度预示着高血压的发生、发展[6]。最近研究显示，高盐负荷可诱发一种炎症状态，并认为这种炎症最终导致心血管及死亡事件的发生[7,8]。Gu等[4]在Dahl盐敏感性大鼠中研究发现，与低盐饮食相比，高盐饮食其血浆TNF-α水平增加了5倍。Shen等[9]报道，高盐饮食显著增加Dahl盐敏感性大鼠循环中白细胞计数，而在盐不敏感大鼠体内无此变化。本研究中我们发现，无论是盐敏感者还是盐不敏感者，血浆hs-CRP水平高盐期与低盐期比较均无明显差异，而TNF-α和MCP-1水平两者均是高盐期较低盐期显著增高，组间同期比较无明显差异。提示在血压正常人群中，高盐饮食可诱发一种炎症状态，并且这种炎症状态可能独立于血压的盐敏感性之外。

大量动物实验及临床研究结果显示，炎症因子与高血压的发生发展有关。Vongpatanasin等[10]对野生型小鼠研究发现，CRP引起血管紧张素Ⅱ受体（AT2）表达下调，后者对血管壁产生直接作用，从而导致内皮细胞一氧化氮（NO）生成减少。高浓度CRP可间接促进血管收缩，白细胞黏附，血小板活化和血栓形成[11-13]。此外，CRP还可以上调血管紧张素Ⅰ受体（AT1）的表达，影响肾素-血管紧张素系统从而促进高血压的发生。上述变化预示动脉粥样硬化及内皮功能障碍的进展，内皮结构和功能的改变最终导致高血压的发展[14]。这些发现不仅在CRP，而且在关于TNF-α的横断面研究中也得到了证实。国内外研究报道，原发性高血压患者血浆TNF-α浓度明显高于血压正常个体，并与血压增高的幅度呈正相关[15]。TNF-α可破坏血管内皮细胞结构和功能的完整性，导致内皮功能障碍，使其合成和释放舒血管物质减少，分泌缩血管物质增多，间接促使血管收缩，外周血管阻力增加，血压升高。TNF-α可以和血管紧张素Ⅱ引起血清活性氧簇（ROS）增加，进而减少内皮依赖性的NO合成，抑制血管舒张，增加血管收缩[16]。TNF-α还可诱导核转录因子-κB（NF-κB）的激活，增加下游炎性标志物MCP-1的表达[17]。MCP-1通过细胞表面趋化因子受体-2（CCR-2）使单核细胞聚集，产生炎症反应，在高血压所致的血管重构中发挥着重要作用[18,19]。

晚近，Elmarakby等[20]研究表明，TNF-α对醋酸脱氧皮质酮（DOCA）-盐敏感性高血压大鼠的肾脏损害起促进作用，并且这种作用独立于血压升高之外，盐负荷引发的炎症状态得到了越来越多学者的关注。细胞外研究已证实，高盐摄入可导致活性氧生成增加，活化转录因子，使得促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）p38磷酸化从而调节细胞因子的表达[21]。由于高盐摄入可使MAPK p38磷酸化，并且刺激促炎性细胞因子的合成及基因表达，因此盐负荷可能通过MAPK p38与炎症发生联系。高盐摄入与炎症的上述联系可能是高盐与心血管事件相互关联的分子机制。

综上所述，我们研究发现，高盐饮食可诱发一种炎症状态，这种炎症状态可能独立于血压的盐敏感性之外。有关高盐摄入引起心血管事件的分子机制仍不十分清楚，盐负荷与炎症之间的关系还有待于进一步深入研究。