周巍

[摘要] 目的 通过检测尿液中的核基质蛋白22，探讨其在膀胱癌筛查中的临床应用价值。 方法 收集2017年6～12月在我院就诊的189例可疑膀胱癌患者的尿液标本，对其进行尿液核基质蛋白22检测与尿液脱落细胞学检查，比较这两种检查方法对膀胱癌的诊断结果。 结果 尿液核基质蛋白22和脱落细胞学检测的敏感性分别为80.0%和57.6%，特异性分别为40.4%和94.2%，两组敏感性和特异性比较差异均有统计学意义（P<0.05）。且两种检查方法对膀胱癌的阳性预测率分别为68.8%和29.1%，两者比较差异显著。 结论 尿液核基质蛋白22作为新的标记物在临床应用中对患者创伤性较小、敏感度较高，在膀胱癌的诊断中与尿脱落细胞结合筛查可作为首选方法。

[关键词] 膀胱癌；尿液核基質蛋白22；脱落细胞学；敏感性；特异性

[中图分类号] R737.14 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2018）16-0132-03

[Abstract] Objective To investigate the clinical value of detecting nuclear matrix protein 22 in urine in the screening of bladder cancer. Methods Urine samples of 189 suspected bladder cancer patients who were treated in our hospital from June 2017 to December 2017 were collected. We performed urinary nuclear matrix protein 22 test and urine exfoliated cytology test to the urine samples. The diagnostic results of bladder cancer of the two tests were compared. Results The sensitivities of urinary nuclear matrix protein 22 and exfoliative cytology were 80.0% and 57.6%， and the specificities were 40.4% and 94.2%， respectively. There were significant differences in sensitivity and specificity between the two groups（P<0.05）. The positive predictive rates of the two methods for bladder cancer were 68.8% and 29.1%， respectively， with significant difference between the two methods. Conclusion Urine nuclear matrix protein 22 as a new marker is less invasive and has high sensitivity in the diagnosis of bladder cancer. Urine nuclear matrix protein 22 combined with exfoliative cytology may be the preferred method in clinic.

[Key words] Bladder cancer； Urine nuclear matrix protein 22； Exfoliative cytology； Sensitivity； Specificity

膀胱癌是指发生在膀胱黏膜上的恶性肿瘤，是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，也是全身十大常见肿瘤之一，占我国泌尿生殖系肿瘤发病率的第一位[1，2]。我国膀胱癌年龄标准化发病率男性为3.8/10万，女性为1.8/10万。近年来，我国部分城市肿瘤发病率报告显示膀胱癌发病率有增高趋势。膀胱癌男性发病率为女性的3～4倍。膀胱癌的发生是复杂、多因素、多步骤的病理变化过程，既有内在的遗传因素，又有外在的环境因素。

目前临床上筛查膀胱癌的方法较多，包括常规检查、尿脱落细胞检查、X造影检查、膀胱镜以及B超检查[3]。膀胱镜检查是常用的可靠方法，可明确膀胱肿瘤的数目、大小、形态等。但存在尿道狭窄或膀胱有活动性出血不能进行膀胱镜检查，在出血或炎症情况下准确性降低，另外在原位癌与正常组织难以区别。而尿液脱落细胞学检查虽然快速与简便，但敏感性略低[4]。尿液核基质蛋白22（NMP22）诊断试剂盒能简便、快速对可疑尿液标本进行筛查[5]。本研究分别采用尿脱落细胞学与NMP22试剂盒检测了2017年6～12月就诊的189例可疑膀胱癌患者的尿液标本，通过检测结果比较来探讨NMP22在膀胱癌筛查中的临床应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2017年6～12月在我院泌尿外科收治的189例可疑膀胱癌患者为研究对象。其中男121例，女68例，年龄37～81岁，平均（59.6±3.2）岁。后经手术病理或膀胱镜活检确诊膀胱癌患者85例，其他泌尿系疾病患者104例。排除标准：泌尿系器械留置，合并有其他泌尿系恶性肿瘤者。

1.2 诊断方法

所有研究对象留取新鲜尿液标本100 mL送检，在2 h内对送检标本进行脱落细胞学分级检查和NMP22胶体金法定性检查。尿脱落细胞学检查将涂片中的细胞变化用四级分级方法表示，分为阴性、核异质，可疑和阳性四级[6]。尿脱落细胞学检查能够客观地反映细胞学所见。所有操作由同一具有副高职称的人员进行，并对分级结果进行阴性和阳性统计。NMP22胶体金检测严格按照说明书进行操作，所有标本在2 h内检测完成。该试剂盒利用装在塑料盒中的横流免疫层析条带定性检测患者尿样中的核基质蛋白。试验使用了两种不同的单克隆抗体：一种是捕获抗体，另一种是报告抗体。将未经处理的尿样加4滴到塑料盒的样品孔中，反应30 min后读取定性结果。阳性结果：仔细观察检测板的检测（T）区。在对照（C）线存在时，检测（T）区的任何完整线，均表示结果阳性。阴性结果：仔细观察检测板的检测（T）区。如果存在对照（C）线，而在检测（T）区无任何颜色线条出现，即表示结果为阴性。无效结果：如果程式对照（C）区无条带出现，或检测（T）线涂抹不清或不完整，试验无效，必须用新检测板重测。无效结果的最常见原因是未能向加样孔加足4大滴尿样或尿液中有气泡[7]。

1.3评价指标

分别计算NMP22检测、尿脱落细胞检查两种方法对膀胱癌的检出率。最终以患者的组织病理学诊断结果作为判断依据，分别对NMP22与尿脱落细胞学检查诊断膀胱癌的敏感度、特异性、准确度进行计算。

1.4统计学方法

采用SPSSl7.0软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差表示，多样本均数比较采用方差分析，计数资料比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

研究结果显示，NMP22检测和尿脱落细胞检查两种方法对膀胱癌的检测阳性率分别为68.8%（130/189）和29.1%（55/189）。以组织病理学诊断结果为依据，则其检测敏感度分别为80.0%（68/85）、57.6%（49/85），特异性分别为40.4%（42/104）、94.2%（98/104），准确度分别为58.2%（110/189）、77.8%（147/189）。可见NMP22检测在阳性率和敏感度方面要显著高于尿脱落细胞检查，而在特异性和准确度方面低于尿脱落细胞检查，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表1、表2。

3 讨论

早期诊断膀胱癌并给予相应的治疗对改善患者预后有着十分重要的意义[8]。为了提高无创检测膀胱癌的水平，尿液膀胱癌标记物的研究受到了很大的关注，美国FDA已经批准NMP22、FISH等用于膀胱癌的检测，其中NMP22是受关注较多的一种，在检测膀胱癌的临床研究中显示了较高的性能。NMP22是参与维持细胞核功能的一种三维网状结构蛋白，参与构成细胞核内部框架，并与DNA复制、RNA合成、激素合成有关。进一步研究表明核基质蛋白参与了基因表达的调节和协调[9，10]。核有丝分裂器蛋白在核基质蛋白中占有很大的比例，在肿瘤细胞内，核有丝分裂器蛋白的升高与恶性细胞的细胞核结构/形态改变相符合。由于细胞死亡（如凋亡），该蛋白从细胞内释放出来并达到可检测的水平。据报道，膀胱癌上皮细胞内NMP22的表达量是正常的25倍之多，所以NMP22可能作为膀胱癌特有的标记物[11-13]。利用胶体金法可以快速检测尿液中的NMP22含量，且具有较高的敏感度和特异性，在早期膀胱癌的筛查中具有很好的应用价值[14]。

杨青等[15]的研究表明，尿脱落细胞学检查对膀胱癌诊断的敏感性为42.6%，特异性为86.7%。在本研究中分别采用尿脱落细胞检查和NMP22检测两种方法对189例可疑膀胱癌患者尿液标本进行了检查，结果表明NMP22检测在阳性率和敏感度上均相对较高，证明NMP22可以作为膀胱癌检测的敏感指标。因此可将NMP22列入体检项目中，可以排除高危人群，对出现血尿或疑似膀胱癌患者，NMP22检测能快速辅助医生进行诊断。NMP22也可适用于长期吸烟史、化工职业等高危因素人群筛查、有临床血尿的患者以及中低危非肌层浸润性膀胱癌患者术后的随诊。但NMP22的检测结果特异性比较低，仅为40.4%，因此不能作为确诊膀胱癌的唯一手段。任何可以导致核基质蛋白在尿液中出现的疾病均可以产生阳性结果。阳性结果也可见于某些患泌尿道良性疾病，前列腺癌和活动癌症治疗期的患者。单独使用NMP22检测试剂盒（胶体金法）的结果不能被看作是膀胱恶性疾病有或无的证据。在疾病诊断和患者护理中要综合考虑其他临床认可的试验和检查手段。

尿脱落细胞学作为常用传统方法，其对分级低的膀胱癌敏感性较低，一方面是由于肿瘤细胞分化较好，其特征与正常细胞相似，不易鉴别。另一方面由于癌细胞之间粘结相对紧密，无足够多的癌细胞脱落到尿中而被检测到，所以尿细胞学阴性并不能排除低级别尿路上皮癌的存在。但细胞脱落学检查特异性高达94.2%，可与NMP22联合检测，提高检出率和特异性的同时减少膀胱镜有创检测给患者带来的痛苦。

总之，尿NMP22检测在膀胱癌的筛查中具有较高的敏感度，可以将其作为膀胱癌的首选筛查方法，在临床上可联合细胞脱落学检查，减少漏诊，做到早发现、早治疗。

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（收稿日期：2018-02-05）