张秀环 林杰 刘彬/河北省唐山市迁西县动物疫病预防控制中心

为了更好地了解禽流感灭活疫苗关于H7免疫后的抗体水平，评估重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗H7的免疫效果，在县城分别选择2个饲养水平良好的鸡场，对实验鸡接种重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗，对接种疫苗的试验鸡进行免疫应激观察。结果显示：试验鸡未出现不良免疫副反应，说明临床使用重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗的安全性较高。

一、材料和方法

1.试验用疫苗。由广东永顺生物制药股份有限公司生产并检验合格的重组禽流感病毒（H5N1Re-8株+H7N9H7-Re1株）二价灭活疫苗，生产批号为2017007

2.试验用鸡。在迁西县分别选择龙顺鸡场和颐园鸡场2个饲养管理水平良好的规模鸡场。

3.免疫情况（免疫日龄、剂量、方法等）。按照各试验场原制定的免疫程序，每只鸡接种疫苗（5周以下每只鸡 0.3 ml，5 周以上每只鸡 0.5 ml）。

鸡场 免疫日龄 剂量 方法 存栏 备注龙顺鸡场 57 0.5 ml/只 肌肉注射 2000 商品鸡颐园鸡场 210 0.5 ml/只 肌肉注射 3000 商品鸡

4.临床应用观察。接种后观察接种鸡未发现有明显免疫副反应，产蛋鸡个别产蛋下降3～3 d后恢复正常。观察接种后21 d以上的鸡只，接种鸡无禽流感病例发生，无鸡只死亡。

5.血清采集及检测方法。采用鸡翅静脉采血技术，用一次性采血器分别对两个鸡场进行抽检青年鸡、产蛋鸡采血3～5 ml，室温下静置，次日抽取血清1.5 ml放置离心管，做好标签。用哈尔滨维科生产的禽流感病毒亚型H7血凝抑制抗原进行检测禽流感H7抗体。

6.试验方法与判定标准。按照《河北省兽医实验诊断技术培训教材附录》提供的方法操作。以呈现“++++”血凝反应的血清最高稀释度作为该血清的抗体效价。

二、结果分析

1.试验结果。首先将两个鸡场内的抽检鸡群全部逐只采血，而后按设计要求分别进行相关免疫接种0.5 ml/只，接种后21 d，按统一方法采血化验，接种前后3次禽流感抗体比较，结果见表1～3。

2.结果。从以上不同鸡场疫苗免疫效果实验结果可见，免疫前鸡群抗体合格率均为0；第一次免疫后，鸡群抗体合格率分别为75%、90%；第二次免疫后，抗体合格率均为100%。

表1 接种前后抗体效价表

表2 临床观察表

3.分析。经过对鸡群免疫前后抗体合格率分析，免疫重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗后，鸡群接种无不良反应、免疫后无禽流感病例发生、成活率 100%，很好地保护了鸡群免受该病毒的侵害。

表3 抗体免疫合格率表