林翠波，林 安，何海新，李 玲

(福建省肿瘤医院妇科，福建 福州 350014)

抑癌基因P16和FHIT在宫颈病变组织中的表达及意义

林翠波，林 安，何海新，李 玲

(福建省肿瘤医院妇科，福建 福州 350014)

目的探究抑癌基因P16、脆性组氨酸三联体(FHIT)在宫颈病变组织中的表达及意义。方法选取福建省肿瘤医院自2015年5月至2017年5月收治的40名宫颈癌患者作为宫颈癌组，另选择同时期收治的40名宫颈上皮内瘤病变(CIN)患者和40名健康成年人分别作为CIN组、对照组，采用免疫组化的方法对三组人员的抑癌基因P16、FHIT的表达水平进行测量。结果宫颈癌组与CIN组、对照组比较，抑癌基因P16、FHIT的阳性率均较低，CIN组与对照组比较抑癌基因P16、FHIT的阳性率均较低，差异均有统计学意义(χ2=5.36～6.12，均Plt;0.05)。宫颈癌组织中临床分期Ⅰ期P16阳性率明显高于Ⅱ期、Ⅲ期，Ⅱ期P16阳性率明显高于Ⅲ期，病理分级中高分化的P16阳性率明显高于中分化、低分化，中分化P16阳性率明显高于低分化，宫颈癌组织中无淋巴结转移的P16阳性率、FHIT阳性率明显高于有淋巴结转移的组织，差异均有统计学意义(χ2=5.23～5.36，均Plt;0.05)。结论抑癌基因P16、FHIT的表达水平与宫颈病变的进展有一定的关系，同时可能与宫颈癌的发生发展有关。

抑癌基因P16；脆性组氨酸三联体；表达；宫颈癌变

宫颈癌作为临床上一类发病率较高的女性生殖道恶性肿瘤，发病率仅次于乳腺癌，对女性患者的生命健康造成了较大的威胁，因此，对于该病发病原因及作用机制进行有效的探讨至关重要[1]。尽管宫颈癌的发生发展存在基因改变的复发性及多因素性，但其中也存在细胞增殖及细胞凋亡调控等因素的作用。有研究报道指出，抑癌基因功能的丧失与表达均会导致宫颈组织发生一系列的病理性改变，引起细胞的异常增殖与表达，最终引起宫颈癌组织的病变[2]。现针对福建省肿瘤医院收治的宫颈癌患者、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)患者及健康成年人宫颈组织中抑癌基因P16(p16 gene)、脆性组氨酸三联体(fragile histidine traid,FHIT)的表达水平进行研究，结果总结报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取福建省肿瘤医院自2015年5月至2017年5月收治的40名宫颈癌患者作为宫颈癌组，另选择同时期收治的40名CIN患者和40名健康成年人分别作为CIN组、对照组。宫颈癌组年龄为45～58岁，平均年龄为(52.36±2.78)岁；CIN组年龄为47～60岁，平均年龄为(53.29±2.45)岁；对照组年龄为49～60岁，平均年龄为(53.78±2.95)岁。三组一般资料比较无明显差异(均Pgt;0.05)，具有可比性。全部研究对象均签署了关于本次研究的知情权同意书，试验符合医学伦理学审查。

1.2方法

收集上述三组患者的宫颈组织标本，宫颈癌组织标本收集于手术切除过程用于病理检查的宫颈组织，CIN及正常宫颈组织是行子宫肌瘤子宫全切除术获得。所有宫颈组织予以10%的福尔马林溶液固定，石蜡包埋后，切片厚度约为4μm，采用免疫组化的方法对三组研究对象的抑癌基因P16、FHIT的表达水平进行测量，选择的试剂包括兔抗人FHIT多克隆抗体、鼠抗人单克隆P16抗体，采用PBS作为阴性对照，试剂均购自福州迈新公司。免疫组化的方法严格按照试剂盒说明书进行。宫颈癌的临床分期标准参考国际妇产科联盟(FIGO)(2009年)宫颈癌分期[3]：Ⅰ期，肿瘤仅局限在宫颈部位，尚未考虑向宫体方面侵犯；Ⅱ期，宫颈癌的侵犯已经超出了子宫的范围，但仍未累及骨盆壁或阴道下方1/3的部位；Ⅲ期，肿瘤已经对盆腔壁造成侵犯，行直肠检查可见宫颈肿瘤与盆腔壁之间未存在间隙，或肿瘤已经累及阴道的1/3以下部位。根据取得宫颈癌组织标本后在显微镜下对细胞的形态进行分类，宫颈癌的病理分级包括高分化、中分化及低分化三类。

1.3结果判断标准

在光镜下随机选择5个完整且不重叠的高倍视野进行观察，共500个细胞，观察并判断是否着色：0分，切片中无阳性细胞或仅有5%以下的细胞着色；1分，切片中有5%～50%的细胞呈现炎性表达；2分，可见至少50%的细胞呈现阳性的表达，见图1。将≥1分判断为阳性标准。

图1 P16、FHIT细胞浆染色阳性(免疫组化ABC×100)

Fig.1 P16 and FHIT cell pulp staining was positive (immunohistochemistry ABC×100)

1.4统计学方法

采用SPSS 19.0进行统计学处理及分析，计数资料比较采用χ2检验，计量资料比较采用t检验，Plt;0.05为有统计学意义。

2结果

2.1抑癌基因P16和FHIT在不同宫颈组织中的表达

与CIN组、对照组比较，宫颈癌组抑癌基因P16、FHIT阳性率均较低，CIN组较对照组抑癌基因P16、FHIT阳性率低，差异具有统计学意义(χ2=5.36～6.12，均Plt;0.05)，见表1。

表1 抑癌基因P16、FHIT在不同宫颈组织中的表达[n(%)]

2.2抑癌基因P16、FHIT在宫颈癌组织中的表达及与临床病理特征的关系

宫颈癌组织中临床分期Ⅰ期P16阳性率明显高于Ⅱ期、Ⅲ期，Ⅱ期P16阳性率明显高于Ⅲ期，病理分级中高分化的P16阳性率明显高于中分化、低分化，中分化P16阳性率明显高于低分化，宫颈癌组织中无淋巴结转移的P16阳性率、FHIT阳性率明显高于有淋巴结转移的组织，差异具有统计学意义(χ2=5.23～5.36，均Plt;0.05)。宫颈癌组织中不同临床分期、病理分级中FHIT阳性率相比无明显差异(Pgt;0.05)，见表2。

表2 抑癌基因P16、FHIT在宫颈癌组织中的表达及与临床病理特征的关系[n(%)]

3讨论

3.1 FHIT基因在宫颈癌中的作用机制

FHIT基因是近年来在临床工作中发现的一类新型候选抑癌基因，其作用机制为通过其编码的蛋白质参与细胞周期的调节过程。有研究报道指出，FHIT蛋白在良性的上皮细胞组织中具有较高的表达水平，但当其水平降低时，即表现出失活的情况时，恶性上皮肿瘤的发生率则会同时明显升高，最终引起肿瘤的发生发展[4]。另有资料显示，在绝大多数的恶性肿瘤组织及细胞中能够发现FHIT基因的高频率缺失及异常表达的情况[5]。本次研究结果显示，宫颈癌组与CIN组、对照组分别相比抑癌基因FHIT的阳性率均较低，CIN组与对照组相比FHIT的阳性率均较低，宫颈癌组织中无淋巴结转移者FHIT阳性率明显高于有淋巴结转移的组织，差异具有统计学意义(Plt;0.05)。但宫颈癌组织中不同临床分期、病理分级的FHIT阳性率相比无明显差异(Pgt;0.05)。结果提示，抑癌基因FHIT可能参与了宫颈癌变，且虽然其在宫颈癌的不同临床分期及病理分级之间无明显差异，但与淋巴结的转移相关，认为抑癌基因FHIT可作为预测及判断宫颈癌发生及转移的可靠指标[6]。

3.2 P16基因在宫颈癌中的作用机制

通常情况下，哺乳动物细胞周期调控过程中的G1～S期之间的调控点可作为细胞增殖等一系列变化的调控关键点，一旦该调控点发生异常的改变，则可能引起肿瘤的发生与发展[7]。尤其是有P16所参与的调控途径，一旦发生改变，例如出现P16失活或异常等情况，则可能导致细胞无法正常增殖而出现失控，另外，伴随发生错误的细胞周期进展紊乱的情况，这就在一定程度上增加了细胞癌变的发生可能，引起肿瘤细胞的发生与发展[8-9]。结合本次研究结果，宫颈癌组与CIN组、对照组分别相比抑癌基因P16阳性率均较低，CIN组与对照组相比抑癌基因P16阳性率均较低，宫颈癌组织中临床分期Ⅰ期P16阳性率明显高于Ⅱ期、Ⅲ期，Ⅱ期P16阳性率明显高于Ⅲ期，病理分级中高分化的P16阳性率明显高于中分化、低分化，中分化P16阳性率明显高于低分化，宫颈癌组织中无淋巴结转移者16阳性率明显高于有淋巴结转移的组织，差异具有统计学意义(Plt;0.05)。提示P16与宫颈癌的发生发展存在一定的关系，当P16表达降低或缺失时能够加重病情，证实了P16的表达对肿瘤细胞的分化及转移起到了调控的作用，需引起临床工作者的重视[10-11]。

综上所述，抑癌基因P16、FHIT的表达水平与宫颈病变的进展有一定的关系，同时可能与宫颈癌的发生发展有关，但由于本次研究样本量有限，在收集数据方面可能存在缺陷，通过进一步深入分析可获得精确的结论。

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[专业责任编辑：安瑞芳]

ExpressionsoftumorsuppressorgeneP16andFHITincervicallesionsandtheirsignificance

LIN Cui-bo, LIN An, HE Hai-xin, LI Ling

(DepartmentofGynecology,FujianTumorHospital,FujianFuzhou350014,China)

ObjectiveTo explore the expressions of tumor suppressor gene P16 and fragile histidine triad (FHIT) in cervical lesions and their significance.MethodsForty patients with cervical cancer admitted in Fujian Tumor Hospital from May 2015 to May 2017 were selected in cervical cancer group, and at the same period 40 patients with cervical intraepithelial neoplasia (CIN) were selected in CIN group and 40 healthy adults in control group. Expression levels of tumor suppressor gene P16 and FHIT in three groups were measured by using immunohistochemical method.ResultsPositive rate of tumor suppressor gene P16 and FHIT in cervical cancer group was lower than that in CIN group and the control group, and that in CIN group was lower than that in the control group with significant differences (χ2value ranged 5.36-6.12, allPlt;0.05). Positive rate of P16 in cervical cancer tissue in stage Ⅰ was significantly higher than that in stage Ⅱ and Ⅲ, and that in stage Ⅱ was much higher than that in stage Ⅲ. Positive rate of P16 in well differentiated cervical cancer tissue was obviously higher than that in moderately and poorly differentiated cancer tissues, and that in moderately differentiated cancer tissue was significantly higher than in poorly differentiated cancer tissue. Positive rate of P16 and FHIT in cervical cancer tissue without lymph node metastasis was much higher than that in cancer tissue with lymph node metastasis. All differences had statistical significance (χ2value ranged 5.23-5.36, allPlt;0.05).ConclusionExpression levels of tumor suppressor gene P16 and FHIT are associated with progress of cervical lesions, and they may be related to occurrence and development of cervical cancer.

tumor suppressor gene P16; fragile histidine triad (FHIT); expression; cervical cancer

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.11.015

R737.3

A

1673-5293(2017)11-1362-02

2017-07-10

林翠波(1979—)，女，主治医师，主要从事妇科临床医疗工作。

李 玲，副主任医师。