许孟军

（江苏省盐城市妇幼保健院 江苏 盐城 224001）

浅论临床上不同来源的金黄色葡萄球菌的耐消毒剂抗力及耐消毒剂基因

许孟军

（江苏省盐城市妇幼保健院 江苏 盐城 224001）

目的：探讨临床上不同来源的金黄色葡萄球菌的耐消毒剂抗力及耐消毒剂基因。方法：采集我院医护人员、患者、医用物品表面的金黄色葡萄球菌共204株，其中有耐甲氧西林金黄色葡萄球菌46株。将这204株金黄色葡萄球菌随机分成A、B两组，每组各有102株金黄色葡萄球菌。我们对这两组金黄色葡萄菌的耐消毒剂抗力进行检测，并对204株金黄色葡萄球菌和46株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐消毒剂基因进行检测，然后对检测的结果进行观察和分析。结果：（1） A组金黄色葡萄球菌在浓度为20%的含氯消毒液中的存活率为61.76%（63/102），B组金黄色葡萄球菌在浓度为30%的含氯消毒液中的存活率为32.35%（33/102）。两组金黄色葡萄球菌在不同浓度消毒剂中的存活率相比差异有统计学意义（P＜0.05）。（2）在这204株金黄色葡萄球菌中，耐消毒剂qacA基因的检出率为10.08%，耐消毒剂PVL基因的检出率为20.35%。其中，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐消毒剂qacA基因的检出率为34.69%，耐消毒剂PVL基因的检出率为45.28%。结论：医护人员、患者、医用物品表面的金黄色葡萄球菌均存在一定程度的耐消毒剂抗力，且耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐消毒剂qacA基因与耐消毒剂PVL基因的检出率较高。因此，医院应严格执行院内感染的控制制度，做好医院的消毒工作，适当地提高消毒液的浓度，以降低院内感染的发生率。

不同来源；金黄色葡萄球菌；耐消毒剂抗力；耐消毒剂基因

金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，属于葡萄球菌属，它可引发多种严重的感染，有“嗜肉菌”的别称。金黄色葡萄球菌可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎、败血症、脓毒症等严重的感染性疾病。有研究指出，金黄色葡萄球菌致病力的强弱主要取决于其自身产生的毒素和侵袭性酶。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌是金黄色葡萄球菌中的一种，临床研究表明，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌是引发院内感染的主要病原菌。金黄色葡萄球菌对消毒剂耐药基因的命名来源于其对季胺类化合物（quaternary ammonium compounds，qac）的耐药性，其耐药基因的编码主要为qacA、qacB和qacC。为了研究临床上不同来源的金黄色葡萄球菌的耐消毒剂抗力及耐消毒剂基因，本研究采集了我院不同来源的金黄色葡萄球菌204株，对其进行耐消毒剂抗力和耐消毒剂基因检测。现将研究结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 菌种来源 采集我院医护人员、患者、医用物品表面的金黄色葡萄球菌共204株，其中有耐甲氧西林金黄色葡萄球菌46株。这204株金黄色葡萄球菌主要来自于患者的痰液、血液、脓液、胸腹水、分泌物以及医护人员的手、鼻腔和医用物品的表面。我们将这204株金黄色葡萄球菌随机分成A、B两组，每组各有102株金黄色葡萄球菌。

1.2 方法

1.2.1 进行菌种鉴定 将采集到的204株金黄色葡萄球菌进行分离培养，并用ATB全自动细菌分析仪对其进行菌种鉴定。

1.2.2 进行耐消毒剂抗力检测的方法 取两支试管，将这两支试管分别标记为A试管和B试管。取A组金黄色葡萄球菌培养液1mL注入A试管中，并在其中注入浓度为20%的含氯消毒液。取B组金黄色葡萄球菌培养液1mL注入B试管中，并在其中注入浓度为30%的含氯消毒液。将A试管和B试管中的液体摇匀后置于37℃的培养箱中进行培养，培养的时间为48h。48h后，分别取A试管和B试管中的上层菌液0.5ml进行检测，计算出两组金黄色葡萄球菌的存活率。

1.2.3 进行耐消毒剂基因检测的方法 采用无锡克隆遗传技术研究所生产的试剂对这204株金黄色葡萄球菌与其中的46株耐甲氧西林金黄色葡萄球的耐消毒剂基因进行检测，其中靶基因的引物序列为：qacA 基 因：P1:5—AAAATCGATGGTAAAGGTTGGC—3；P 2:5—A G T T C T G C A G T C C G G A T T T G C—3；PVL基 因：P1:GTGCCAGACAATGAATTACCC；P2:TTCATGAGTTTTCCAGTTCACTTC。反应条件为：在93℃的条件下反应2min。再于93℃的条件下反应20s，于55℃的条件下反应30s，于72℃的条件下反应60s，这样持续循环35个周期。然后再于72℃的条件下反应 5min。总反应的体积为50μl。

1.3 观察指标 （1）比较两组金黄色葡萄球菌在不同浓度消毒液中的存活率。（2）计算204株金黄色葡萄球菌与46株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐消毒剂qacA基因和耐消毒剂PVL基因的检出率。

1.4 统计学方法 用SPSS20.0软件对本研究中的所有数据进行处理，计量资料采用均数±标准差（±s）表示，用t检验，计数资料采用（%）表示，用χ2检验。P＜0.05时，表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组金黄色葡萄球菌在不同浓度的消毒液中存活率的比较 A组金黄色葡萄球菌在浓度为20%的含氯消毒液中的存活率为61.76%（63/102），B组金黄色葡萄球菌在浓度为30%的含氯消毒液中的存活率为32.35%（33/102）。两组金黄色葡萄球菌在不同浓度消毒剂中的存活率相比差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表1。

表1 两组金黄色葡萄球菌在不同浓度的消毒液中存活率的比较[ n（%）]

2.2 204株金黄色葡萄球菌与46株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐消毒剂qacA基因和耐消毒剂PVL基因的检出率 在204株金黄色葡萄球菌中，耐消毒剂qacA基因的检出率为10.08%，耐消毒剂PVL基因的检出率为20.35%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐消毒剂qacA基因的检出率为34.69%，耐消毒剂PVL基因的检出率为45.28%。详见表2。

表2 204株金黄色葡萄球菌与46株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐消毒剂qacA基因和耐消毒剂PVL基因的检出率

3 讨论

在医学领域中，消毒剂被广泛应用于医院的各项消毒工作中。有研究指出，消毒剂的广泛使用与病菌消毒剂抗力的提高存在着一定的关系。消毒剂的滥用提高了金黄色葡萄球菌等病原菌的耐药性，加速了病菌的传播和感染，且在一定程度上还会导致其发生基因变异。

本次研究的结果显示，A组金黄色葡萄球菌在浓度为20%的含氯消毒液中的存活率为61.76%，B组金黄色葡萄球菌在浓度为30%的含氯消毒液中的存活率为32.35%，两组金黄色葡萄球菌在不同浓度消毒剂中的存活率相比差异有统计学意义（P＜0.05）。在这204株金黄色葡萄球菌中，耐消毒剂qacA基因的检出率为10.08%，耐消毒剂PVL基因的检出率为20.35%。其中，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐消毒剂qacA基因的检出率为34.69%，耐消毒剂PVL基因的检出率为45.28%。

综上所述，医护人员、患者、医用物品表面的金黄色葡萄球菌均存在一定程度的耐消毒剂抗力，且耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐消毒剂qacA基因与耐消毒剂PVL基因的检出率较高。因此，医院应严格执行院内感染的控制制度，做好医院的消毒工作，适当地提高消毒液的浓度，以降低院内感染的发生率。

[1] 葛忆琳,朱仁义,陈越火,刘倩,江宁,蒋诚. 临床分离的金黄色葡萄球菌对消毒剂抗力及其抗药基因研究[J]. 中国消毒学杂志,2010,06:658-660+662.

[2] 徐丹,张振国,吕鹏,陈玉凤,栾明春,薄志坚,侯君,肖冰.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因与消毒剂抗性的研究[J]. 中国微生态学杂志,2014,12:1393-1395.

[3] 倪俊,许献荣,陈瑞彩. 国内耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因特征Meta分析[J]. 中国感染控制杂志,2015,03:149-158+165.

[4] 徐丹,陈玉凤,栾明春,薄志坚,侯君,肖冰,任月. 临床分离金黄色葡萄球菌耐药性及耐消毒剂基因的检测[J]. 中国消毒学杂志,2015,05:507-509.

[5] 冯莉. 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因及耐消毒剂基因研究[J]. 中华医院感染学杂志,2009,03:244-246.

[6] 卢中一,陈勇,陈伟,韩黎. 金黄色葡萄球菌对消毒剂的抗性及其流行病学研究进展[J]. 中国感染控制杂志,2014,07:442-446.

R187

B

2095-7629-（2017）2-0006-02