刘光耀 刘 莉

（江苏省泰州市中医院病理科，江苏 泰州 225300）

ADAM8基因在胃癌组织中的表达及与临床病理特征的关系

刘光耀 刘 莉

（江苏省泰州市中医院病理科，江苏 泰州 225300）

目的在胃癌组织中对ADAM8基因进行检测，对其表达情况进行分析。方法对医院筛选纳入的36 例胃癌患者的癌组织及其相应的癌旁组织（癌旁组）采用免疫组织化学法检测及PCR技术分别对其ADAM8基因表达情况进行分析。结果ADAM8在癌组织中呈现高表达，不同肿瘤直径大小、不同临床分期、不同浸润度及有无转移等差异具有显著性（P＜0.05）。ADAM8在胃癌组织中的阳性表达率（63.9%）高于其相应的癌旁正常组织（22.2%），差异具有显著性（P＜0.05）。经实时定量PCR检测胃癌组织中ADAM8mRNA的表达水平较癌旁组织中 ADAM8mRNA表达水平明显升高，二者间差异显著（P＜0.05）。结论ADAM8基因在胃癌细胞株中的表达较正常细胞者中呈现高表达，可能与其胃癌的发生发展相关，可作为胃癌预后的相关评价指标。

ADAM8基因；胃癌组织；表达；临床病理

胃癌在目前临床中作为一种较为常见的、多发的、严重的恶性肿瘤，已在欧美等发达国家恶性肿瘤发病率位居前列，大多数患者确诊时发现淋巴结的转移，病死率较高，对患者的生命健康及生活质量产生严重的影响[1]。目前对于胃癌的具体发病机制尚不十分清楚，多数学者认为其发生发展的过程受多种因素的共同影响，而胃癌的复发、转移是多阶段、多因素、多基因综合作用和长时间的发展而产生的结果。因此胃癌的早期诊断与转移的判断显得相当重要[2-3]。因此本文通过测定ADAM8基因在胃癌患者体内中的表达状态，对其临床治疗提供积极的指导意义。

1资料与方法

1.1 一般资料：我院收治胃癌患者36例，依据临床资料确定为胃癌，均经胃镜与活检、手术和病理切片证实，入选患者均符合诊断标准。其中胃癌组男20例，女16例，年龄均在42～78岁，平均为（53.6±7.1）岁，取胃癌及癌旁组织标本。所有患者经院伦理委员会通过审批，并在知情同意书签字。

1.2 方法[4]

1.2.1 免疫组织化学（IHC）染色：收集标本采用对其ADAM8基因抗体免疫组织化学染色，ADAM8单克隆抗体的工作浓度为1∶150。采用免疫组化法检测基因的表达。所有标本均采用10%的甲醛溶液固定，石蜡包埋，切片；采用ADAM8基因单克隆抗体，对切片进行免疫组化，所有操作步骤均严格按照说明书进行。以PBS代替一抗作为阴性对照，拍照观察。

1.2.2 PCR术：切取1～2 mm大小组织，利用抗兔通用型免疫组化试剂盒（上海基因科技），使用Trizol试剂一步法提取组织mRNA，用反转录试剂盒逆转录成cDNA（-20 ℃储存备用），再进行扩增，采用10 μL反应体系其反应条件为：预变性95 ℃，4 min；变性95 ℃，10 s；退火65 ℃，30 s，延伸72 ℃，30 s共36个循环。每个样品3个复孔，取CT平均值。

1.3 统计学分析：对所得的结果用SPSS14.0统计软件进行比较分析，采用t检验方法适用于计量资料用均数±标准差即（x-±s）；计数资料采用χ2检验。组间若P＜0.05时差异有显著性。

2 结 果

2.1 ADAM8基因在胃癌组织及其癌旁组织中的表达：在胃癌组织中ADAM8阳性染色呈棕黄色或棕褐色，而在癌旁组织的细胞中呈现不表达或弱表达状态。ADAM8基因在癌细胞组织的阳性表达率达到63.9%，而在癌旁组织中阳性表达率为22.2%，与癌旁组织相比，癌组织明显高于癌旁正常组织中的表达，差异具有显著性（P＜0.05）。

2.2 ADAM8表达与胃癌患者临床病理特征的关系：在筛选出的36例胃癌细胞组织表达情况分别与临床病理特征不同肿瘤直径大小、不同临床分期、不同浸润度及有无转移等具有相关性，组间差异显著（P＜0.05）。细胞癌组织不同临床体征间的分析结果见表1。

2.3 RT-PCR检测胃癌组织及正常胃黏膜组织中ADAM8的表达：经实时定量PCR检测胃癌组织及癌旁组织中ADAM8mRNA的表达结果显示在胃癌中ADAM8mRNA表达水平为（0.796±0.113），在癌旁组织中的表达水平是（0.221±0.105），二者间差异显著（P＜0.05）。

3 结 论

胃癌在临床中恶性程度高，目前我国发病率居世界之首发展较迅速且发病较隐匿，胃癌的主要临床表现在早期多不显著，患者就诊不及时已到癌症的中晚期阶段，病死率较高。若能够进行早期发现、诊断及早期治疗，有利于显著性的延长胃癌患者的生存期[5]。探寻有效的诊断和治疗方法，ADAM8基因作为解聚素和金属蛋白酶家族的一员，可参与多种膜结合受体、细胞因子等蛋白的水解过程。有关研究表明，在多种恶性肿瘤组织中ADAM8基因被检测出呈现异常高表达状态，其在乳腺癌、胃癌等多种肿瘤组织中具有高表达趋势，最终将致肿瘤的产生[6]。

表1 ADAM8mRNA表达结果

在本研究中结果显示，胃癌与正常癌旁组织的ADAM8基因表达水平比较发现，癌患者的ADAM8基因表达水平明显高于正常组织患者（P＜0.05）；且均与患者年龄、性别、转移成都无明显相关（P＞0.05），采用免疫组织化学方法检测胃癌组织和胃正常黏膜组织中ADAM8的表达显示胃癌组织的表达阳性率明显高于胃正常黏膜组织。提示ADAM8基因表达增高与胃癌的发生发展有关。ADAM8蛋白表达、肿瘤大小、病理类型和肿瘤分期是影响患者预后的危险因素。

[1] Kato M,Asaka M.Recent development of gastric cancer prevention[J].Jpn J Clin Oncol,2012,42(11):987-994.

[2] Shuang J,Qi S,Zheng J,et al. A case-control study of laparoscopyassisted and open distal gastrectomy for advanced gastric cancer[J].J Gastrointest Surg,2011,15(1):57-62.

[3] Mac Lellan SJ,Mac Kay HJ,Ringash J,et al. Laparoscopic gastrectomy for patients with advanced gastric cancer produces oncologic outcomes similar to those for open resection[J].Surg Endosc,2012,26(7):1813-1821.

[4] Nobes JP,Langley SE,Klopper T,et al. Aprospective,ran-domized pilotstudy evaluating the effects of metformin and lifestyle intervention onpatients with prostate cancer re-ceiving androgen deprivation therapy[J].B J UInt,2012,109(10):1495

[5] Aljada A,Mousa SA.Metforminandneoplasia:implicationsandind ications[J].Pharmacol Ther,2012,133(1):108.

[6] Uehara T,Mitsuhashi A,Tsuruoka N,et al. Metformin potentiates the anticancer effects of cisplatin under nor-moxic conditions in vitro[J].Oncol Rep,2015,33(2):744.

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