路振香 ， 武梦茹 ， 郭伟娜 ， 刘 畅

(安徽科技学院动物科学学院 ， 安徽 凤阳 233100)

鹅混合感染肠道沙门菌与葡萄球菌的诊治

路振香 ， 武梦茹 ， 郭伟娜 ， 刘 畅

(安徽科技学院动物科学学院 ， 安徽 凤阳 233100)

沙门菌感染禽类可导致下痢、伤寒、副伤寒等症状，该菌还可导致人兽共患疾病，引起禽类发病之后，再通过污染食物而使人中毒，对人类的身体健康构成威胁。鹅葡萄球菌病主要感染雏鹅，鹅感染后出现关节炎、败血病和脐炎等症状。随着养鹅业集约化快速发展，鹅感染葡萄球菌病例越来越多。

1 病例介绍

安徽明光某养鹅户饲喂5 000只肉仔鹅，于25日龄时突然出现死亡病例，3、4 d死亡超过200只，病鹅精神不振，离群，卧地不起，羽毛松乱，无光泽，排出黄白色、绿色稀糊状粪便。病死鹅的主要病理变化有肝周炎、心包炎、气囊炎，肠道广泛性出血。为了查明病因，并指导养殖户用药，特对病死鹅进行病原菌分离鉴定与药敏试验。

2 实验室诊断及结果

用病死鹅的肝脏组织，分别在血琼脂平板和麦康凯琼脂平板上划线进行病原菌的分离培养，纯化、革兰染色及镜检和生化试验:包括糖发酵试验、吲哚形成试验、甲基红试验及V-P试验和药敏试验，并对分离菌的16S rRNA序列进行PCR扩增、序列测定、同源性分析，试验结果如下。

从送检病死鹅的肝脏中分离到两株细菌，即菌株1和菌株2。菌株1命名为ptqj，该菌株在麦康凯琼脂平板上不生长；在鸡鲜血琼脂平板上呈灰色、湿润、圆形、不透明、低隆起、中等大小、光滑的菌落；在营养琼脂平板上呈灰白色、圆形隆起湿润光滑中等大小菌落。该菌为革兰阳性球菌。菌株2命名为sms，该菌在麦康凯琼脂平板上呈淡橘红色圆形湿润光滑隆起半透明中等大小菌落；在血琼脂平板上为银灰色圆形湿润光滑隆起半透明中等大小菌落；在营养琼脂平板上为灰白色圆形光滑湿润隆起半透明中等大小菌落。该菌为革兰阴性单杆菌。菌株1能发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇只产酸。菌株2能发酵甘露醇、麦芽糖只产酸，利用葡萄糖既产酸又产气，不能利用乳糖。菌株1吲哚形成试验、甲基红试验、V-P试验均呈阴性。菌株2吲哚形成试验和V-P试验呈阴性，甲基红试验呈阳性。

体外药敏试验结果显示，两株分离菌耐药都很严重，对新生霉素、阿米卡星、头孢唑肟、氧哌嗪青霉素、妥布霉素、头孢西丁、拉氧头孢、头孢他啶等多种抗菌药物均产生耐药性，对米诺环素、舒巴坦头孢哌酮敏感，让养殖户使用药敏试验中筛选出的敏感药物舒巴坦头孢哌酮进行治疗，用药后第3天发病鹅明显减少，死亡下降，第3天死亡停止，病鹅逐渐康复，大群鹅采食量上升，疫情得到了控制。

两株分离菌耐药都很严重，可能与当前的养鹅业的现状有很大关系，目前，鹅的养殖已经集约化由先前一户饲养几十只到目前饲养1 000只到18 000只甚至30 000只，已经是常态化，鹅是草食动物，但目前，由于养殖量大，养鹅户急于让鹅快速生长，多数养殖户采用高蛋白的肉小鸡饲料、肉小鸭饲料进行饲喂，使得鹅群中经常出现痛风病例，鹅的盲肠退化等现象，导致鹅的抵抗力下降，使得本来就潜伏在鹅群中的致病菌趁虚而入，导致鹅群中暴发相应的细菌性传染病，鉴于此，养殖户不得不经常超大剂量地使用抗菌药物进行预防，从而诱发致病菌产生耐药性，甚至多重耐药性。

对2株分离菌16S rRNA序列PCR扩增结果显示，扩增出了目的片段(图1)。

将2株分离菌的16S rRNA的序列在GenBank上进行比对，菌株1(ptqj)与登录号为KX525724.1的葡萄球菌同源性达到100%，故菌株1为葡萄球菌。菌株2(sms)与登录号为JF951183.1的肠道沙门菌同源性达到99%，故菌株2为肠道沙门菌。

图1 分离菌16S rRNA序列PCR扩增产物的琼脂糖凝胶电泳结果

图2 菌株1(ptqj)与6株葡萄球菌16S rRNA基因的进化树

图3 菌株2(sms)与3株肠道沙门菌16S rRNA基因的进化树

3 讨论

沙门菌在全世界范围内常常引起重大的公共健康事件[1]。在与食物有关的疾病的范围内，沙门菌扮演着重要角色。在养殖业中，畜禽类发生沙门菌病对养殖户来说会增加养殖成本，该病在成年家禽中常常表现为隐性感染，带菌动物可通过多种途径感染人类。近年来，由于细菌耐药性的问题日趋严重，因此，该病的防治愈加困难，在抗菌药物刚出现的时候，该病的防治对于人类和动物来说都不是一个很严峻的问题[2]。但是随着抗菌药物的广泛使用，尤其是滥用，细菌耐药性更加严重，有些疾病已经到了无药可用的境地。在过去的20年里，很多国家都报道出了沙门菌具有多重耐药性[3]。沙门菌病的防治已经陷入困境[4]。

葡萄球菌在自然界分布广泛，如动物体表、汗腺、毛发、呼吸道、消化道，当有外伤时，常常引起动物发病。因此，要加强饲养管理，并且做好一定的预防工作，如鹅的运动场地，放牧初的地面要松软，不能是砂石地面，鹅床要光滑，避免鹅掌及腿部有外伤，可降低该病的发生率，同时，一旦发生该病要及时诊断治疗，以便控制疾病的蔓延，减少损失。

安徽明光某养殖户送检的病死鹅是由于葡萄球菌与肠道沙门菌的混合感染而引起的，采用药敏试验中筛选出敏感药物头孢哌酮进行治疗，3 d后疫情便得到了控制。

[1] Su Lin-Hui, Wu Tsu-Lan, Chia Ju-Hsin. Increasing ceftriaxone resistance in Salmonella isolates from a university hospital in Taiwan[J]. Journal of Antimicrobial Chemotherapy,2005(6):60-75.

[2] 倪宏波, 何宏轩, 乔军. 预防兽医学检验技术[M]. 长春: 吉林人民出版社,2002:259-263.

[3] Davis M, Hancock A. Changes in antimicrobial resistance among Salmonella enterica serovar Typhimurium isolates from humans and cattle in the northwestern United States[J]. Emerging Infectious Diseases,1999，678-802.

[4] Hardy A. Salmonella: a continuing problem[J]. Postgraduate Medical Journal,2004，17-21.

S852.61+2

B

0529-6005(2017)08-0036-02

2017-06-18

安徽科技学院兽医学重点学科建设项目资助(AKZDXK2015A04)

路振香(1964-)女，副教授，硕士，主要从事动物传染病病原学的教学和科研工作，E-mail:Luzhenxiang2002@126.com