王 焱，侯连莉

（1.广东省食品药品职业技术学校，广东 广州 510663；2.珠海联邦制药股份有限公司中山分公司，广东 珠海 528467）

不同产地何首乌及制何首乌药材活性成分含量与性状分析

王 焱1，侯连莉2

（1.广东省食品药品职业技术学校，广东 广州 510663；2.珠海联邦制药股份有限公司中山分公司，广东 珠海 528467）

目的 以生、制药材为切入点，对不同产地何首乌及制何首乌药材活性成分含量进行比较，并分析药材外观性状与活性成分含量的相关性。方法 采用前期已经建立的高效液相色谱检测方法，以4批不同产地、性状的生、制何首乌药材为样品，同时测定二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚3种活性成分，并观察记录药材外观性状与活性成分含量的相关性。结果生何首乌与制何首乌中二苯乙烯苷及蒽醌类成分含量明显不同。生何首乌中的二苯乙烯苷含量明显高于制何首乌，但是游离蒽醌类成分难以检测出，而制何首乌中可检出大黄素及大黄素甲醚等游离蒽醌。制何首乌性状特征与活性成分含量具有相关性。结论 制何首乌外观颜色浅，丝络明显，其中含有的二苯乙烯苷较多，但大黄素含量较低；若颜色深，丝络不明显，则二苯乙烯苷含量较低，游离蒽醌类成分含量较高。

生何首乌；制何首乌；药材；质量评价；二苯乙烯苷；大黄素

自古以来，何首乌被认为具有延年益寿、延缓衰老之功效，是著名的滋补中药。现代研究表明，何首乌主要活性成分有蒽醌类、二苯乙烯类、磷脂类、黄酮类和酚类，可用于降血脂、抗衰老、提高免疫力、益智等[1]。为了寻找质量优良的何首乌药材，前期研究已经建立了高效液相色谱法对何首乌药材中二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚3种活性成分同时进行测定[2]。本研究在前期已经建立的高效液相色谱（HPLC）检测方法基础上，以4批不同产地、性状的生、制何首乌药材为样品，通过测定二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚3种活性成分，对不同产地何首乌及制何首乌药材活性成分含量进行比较，并建立药材外观性状与活性成分含量的相关性，旨在为何首乌药材的质量评价、炮制工艺、综合利用提供依据。

1 材料

1.1 仪器

Waters 600E高效液相色谱系统（手动进样器、Waters 2487紫外检测器、Empower色谱工作站），美国Waters公司；JA5003A分析天平（可准确称量到1 mg），上海精密科学仪器有限公司；AX205分析天平（可准确称量到0.01 mg），瑞士METTLER TOLEDO公司；XW-80A微型旋涡混合仪，上海沪西分析仪器厂；KQ-250E型超声波清洗仪，昆山市超声仪器有限公司。

1.2 药材

何首乌及制何首乌药材（购于天津、辽宁、内蒙古、山西），制何首乌样品经鉴定均为蓼科植物何首乌Polygonum nultiflorum Thunb.干燥块根的炮制品。

标准品：二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚，纯度均＞98%。

1.3 试剂

乙腈、甲醇为色谱纯（美国Fisher公司），水为超纯水（Millipore超纯水净化系统）。

2 测定方法[2]

2.1 方法学考察

采用高效液相色谱法测定何首乌中主要有效成分二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚的含量，并进行方法学考察，包括标准曲线的绘制、精密度和加样回收率。

2.2 供试品溶液制备

取不同产地何首乌及制何首乌药材各0.1 g，标明编号，置10 m l容量瓶中，精密加入色谱甲醇10 m l，置于超声仪中超声3小时后，冷却至室温，取1 m l置于离心管中，以14 000 rpm速率离心10min，取上清液用0.45μm的微孔滤膜过滤，即得。精密吸取上述各种供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定。

2.3 色谱条件

色谱柱Symmetry ShieldTMC18柱（5μm，4.6mm×150mm）；填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；流动相：乙腈-0.05%磷酸梯度洗脱（见表1）；流速：1.0m l/min；检测波长：254 nm；柱温：35℃，进样量为10μl。理论板数（n）按二苯乙烯苷峰计算，应不低于2 000。

表1 流动相梯度洗脱

3 样品测定

3.1 生何首乌样品含量测定

按上述测定方法，测定4种不同产地生何首乌药材中活性成分的含量，细粉编号：生NO.1、生NO.2、生NO.3、生NO.4，结果见图1、表2。

3.2 制何首乌样品含量测定

先对4种不同产地制何首乌药材进行性状比较，结果见表3。再按上述测定方法，测定4种不同产地制何首乌药材中活性成分的含量，细粉编号：制NO.1、制NO.2、制NO.3、制NO.4，结果见图2，表3、4。结果表明，不同产地的制何首乌中二苯乙烯苷和蒽醌类成分含量各不相同。

4 结论

（1）由实验结果可以看出，生何首乌中二苯乙烯苷及蒽醌类成分与制何首乌明显不同。生何首乌中的二苯乙烯苷含量明显高于制何首乌，但游离蒽醌类成分难以检测出，而制何首乌中可检出大黄素及大黄素甲醚等游离蒽醌。这可能是因为何首乌的炮制多采用黑豆汁煎煮法，在煎煮过程中二苯乙烯苷在高温下降解而致使含量降低，在生何首乌中以结合形式存在的蒽醌则会转化为游离蒽醌，从而在制何首乌中得以检出。有研究也比较了何首乌生品和炮制品成分的含量变化，结果发现炮制后降低了二苯乙烯苷的含量，升高了大黄素和大黄素甲醚的含量[3]；随炮制时间延长，对二苯乙烯苷含量也有影响[4]。

图1 生何首乌HPLC谱图（1.二苯乙烯苷）

表2 4种不同产地生何首乌药材含量测定

图2 制何首乌HPLC谱图（1.二苯乙烯苷；2.大黄素；3.大黄素甲醚）

表3 4种不同产地制何首乌药材性状比较结果

表4 4种不同产地制何首乌药材含量测定

（2）实验结果还表明，制NO.1样品（色浅，片状）大黄素含量明显少于其他样品；制NO.2样品（色深，块状）大黄素偏高；制NO.3样品二苯乙烯苷含量偏高；制NO.4样品（乌黑色，块状）二苯乙烯苷含量偏低，但其他成分都偏高。因此，制何首乌外观性状与其所含的活性成分含量有一定相关性：若制何首乌外观颜色浅，丝络明显，其中含有的二苯乙烯苷较高，但大黄素含量较低；若制何首乌外观颜色深，丝络不明显，则二苯乙烯苷含量较低且游离蒽醌类含量较高。

（3）本研究以生、制药材为切入点，通过对生、制何首乌药材中多种活性成分含量进行比较，并分析药材外观性状与活性成分含量的相关性，为何首乌药材质量评价提供科学依据；同时，也提示我们需加强何首乌药材炮制工艺的控制，为何首乌药材的合理使用建立标准。

[1]龚彦胜，张亚囡，黄伟，等.与功效、毒性相关的何首乌化学成分研究进展[J].中国药物警戒，2012，9（8）：472-475.

[2]王焱.高效液相色谱法同时测定制何首乌中多种活性成分[J].亚太传统医药，2016，12（167）：45-47.

[3]陈庆堂，卓丽红，徐文，等.何首乌炮制过程中5种化学成分的含量变化[J].中国实验方剂学杂志，2012，8（5）：66-71.

[4]刘世琪，王磊，越亮.高压炮制对何首乌中有效成分含量的影响[J].中国实验方剂学杂志，2013，19（21）：37-40.

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：1671-1246（2017）17-0101-03