胡丽楠 门璐 姜立坤

适用于评定水痘活疫苗免疫反应的抗体检测法

胡丽楠 门璐 姜立坤

目的 评定水痘活疫苗免疫反应的抗体检测方法。方法 选择2016年某一地区监测报告水痘患者，为其接种水痘减毒活疫苗。分别用膜抗原免疫荧光抗体检测试验（FAMA）和ELISA等对患者的血清进行检测。结果 ELISA方法特异性好，但市售试剂敏感性较差，FAMA方法虽然繁琐，但因其较高的敏感性和特异性，更适合于疫苗免疫后的血清学评价。结论 水痘病毒IgG抗体的检测在筛选VZV易感人群、判断个体免疫状况、水痘疫苗免疫效果的评价以及免疫策略的研究、临床诊断等方面均具有重要意义。

水痘活疫苗；免疫反应；抗体检测方法

水痘作为一种带状疱疹病毒（VSV），最早被发现于1948年，是全世界性的高接触性传染病毒，VSV是一种包膜病毒，通过侵染呼吸道黏膜或淋巴系统，并通过内分泌循环的方式感染皮肤，从而诱发水痘，而水痘活疫苗是广泛应用于青少年临床使用以便于防治VSV感染的临床免疫手段，这是由于水痘活疫苗既诱导体液免疫又诱导细胞免疫，根据病毒的复制性而研发的一种高效的、长期免疫方法，同时接种活疫苗的人群体内免疫抗体水平有一定的变化，通过这些变化可以准确的了解接种人群的情况，因此，需要确定适用于评定水痘活疫苗免疫反应的抗体检测方法[1]。

1 资料及方法

1.1 一般资料

选取本院于2015年4月- 2016年4月来本院进行水痘活疫苗接种的60例患者作为研究对象，并将这60例研究对象分为A、B、C三组，其中A组20例，男10例，女10例，平均年龄为（9.0±2.5）岁；B组患者20例，其中男12例，女8例，平均年龄为（8.7±2.3）岁；C组患者20例，男11例，女9例，平均年龄为（9.5±1.8）岁，所有接种人群在接种活疫苗前均已进行过常规检查，所有患者均无过敏现象。3组患者年龄、性别等一般临床资料对比，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 研究方法

将这60例患者均接种统一标准的水痘活疫苗，将这60例患者的血清分为三组A、B、C，并将所有待检测的血清进行处理[2]。

A组血清采取用全VZV抗原作酶联免疫吸附测定（VARELISA），其中抗原为经超声波处理的MRG-S细胞的溶解物上清液，并与为感染的MRG-S细胞的溶解上清液的抗体水平进行对比，将处理过的A组血清蛋白分别与对照孔以及VZV抗原反应，检测待检血清的吸光值的增值（△A）及VZV抗原的平均光密度值，如△A超出限定曲线，则重新调整血清蛋白的稀释度。

B组血清采取糖蛋白抗原ELISA（gpELISA）的抗体检测方法进行检测，分析纯化VZV感染细胞的提取物得到的糖蛋白（gP）为抗原，将糖蛋白进行不同比例的稀释，并与已知VZV阳性血清以及硬性血清进行反应，从而探究gPELISA对抗体检测的灵敏性[3]。

C组血清采取增强中和检测法（ENt）检测抗体的水平，并将得到的抗体检测结果进行分析。此法采取补体与抗IgG参与而获得高敏感的抗体检测措施，利用适当的化学药剂对C组血清进行处理，并与MRG-S血清进行反应，分析检测结果，从而得出Ent的检测灵敏性[4]。

1.3 评定标准

所有的靶均是感染的MRG-S细胞的上清液，以为感染的MRG-S细胞作为阴性对比，人体血清作为阳性对比，荧光范围为0～4，检测的血清强度至少大于2，才能判定为抗VZV阳性，血清对照细胞无反应。

2 结果

通过临床诊断结合之病例可以确诊60例患者的情况，分别利用gpELISA、ENT以及VARELISA三种方法进行检测的血清蛋白中，根据所绘曲线及各检测系统的阳性判断指标可知gpELISA以及Ent的灵敏度相对较高，其中三种方法检测阳性率的差异具有统计学意义，因此结果具有一定的临床意义。

3 讨论

水痘主要是VZV病原体，VZV作为一种包膜病毒，通过体液循环作用于皮肤表面，进而诱发水痘，而作为急性病毒性传染病的水痘属于全球性接触性高感染疾病，20岁以下的青少年极易感染水痘，而多数患者在幼龄时感染过VZV的患者终身免疫，但是当潜伏于神经细胞中的VZV再次激活时，便会产生HZ病毒，二次感染多发生在成年人中，发病率随年龄的增高而增长，且相对于水痘，HZ不易治愈，易引发并发症，致患者死亡。VZV检测的方法众多，相应的活疫苗种类众多，包括传统水痘疫苗、带状疱疹疫苗、亚单位疫苗以及DNA疫苗等，而由于VZV的危害性，高效率、高灵敏的检测VZV病毒是十分重要的，重要使通过检测患者的抗体水平，从而分析患者的VZV病毒感染与否，因此研究适用于评定水痘活疫苗免疫反应的抗体检测方法具有十分重要的临床价值[5-8]。

综上所述，水痘作为一项全球性高接触性传染性疾病，如何检测以及如何防治具有十分重要社会意义以及临床价值，本文选取了全VZV抗原作酶联免疫吸附测定（VARELISA），糖蛋白抗原ELISA（gpELISA），增强中和检测法（ENt）三种方法检测相应的抗体水平，从而探讨患者的VZV感染情况以及相应的抗体检测水平。

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Antibody Detection Method for Assessing the Immune Response of Varicella Live Vaccine

HU Li'nan MEN Lu JIANG Likun Heilongjiang Provincial Center for Disease Control and Prevention of Harbin City, Harbin Heilongjiang 150056, China

Objective To evaluate the chickenpox vaccine immune response antibody detection methods. Methods Choose an area of 2016 monitoring report varicella patients, for their vaccination of live attenuated varicella vaccine. With membrane antigen immunofuorescence antibody test (FAMA) and ELISA to test the patient's serum. Results The specificity of ELISA method is good, but the commercial reagent sensitivity is poorer, FAMA method although trival, but because of its high sensitivity and specifcity, more suitable for vaccine after serological evaluation. Conclusion The chicken pox virus IgG antibody detection in the screening of susceptible VZV, judge the individual immune status, varicella vaccine immune effect evaluation and strategy research, clinical diagnosis is of great signifcance.

varicella vaccine; immune response; antibody detection method

R186

A

1674-9316（2017）02-0121-02

10．3969/j．issn．1674-9316．2017．02．076

黑龙江省哈尔滨市疾病预防控制中心，黑龙江 哈尔滨 150056

姜立坤，E-mail：hunannan1983@126．com