蔡双双 ， 郑国红 ， 刘发志

(湖北三峡职业技术学院农学院 ， 湖北 宜昌 443000)

2例犬传染性性病肿瘤的病理学诊断

蔡双双 ， 郑国红 ， 刘发志

(湖北三峡职业技术学院农学院 ， 湖北 宜昌 443000)

犬传染性性病肿瘤(CTVT)，也被称为犬传染性交媾性肿瘤和Sticker′s肉瘤，是一种能够在犬之间主要通过性传播的一种传染性生殖道肿瘤疾病，本病是自然发生的同种移植性肿瘤，其形成原因目前尚不清楚[1]。一般发生于性成熟的有交配经历的年青犬，多发年龄在 2～ 5 岁，没有交配经历的幼犬或青年犬等还未发现过有该病的报道[2-3]。CTVT 转移不常见，但有报道可转移入局部淋巴结、脑、眼睛、鼻丸以及胸腹部的内脏器官[1，4]，多见于幼犬和免疫缺陷的犬。本试验将2例疑似犬传染性性病肿瘤组织进行病理组织学观察，并对Vimentin、CK、Lysomes和AAT四个指标进行了免疫组织化学染色，结合临床症状对该肿瘤进行病理学诊断，从而丰富犬传染性性病肿瘤的临床资料。

1 试验材料与方法

1.1 试验材料 本试验中雌性犬病例由主人送往深圳市福华宠物医院就诊的金毛犬。另一例雄性犬由主人送往武汉市明星宠物医院就诊的日本秋田犬，切除的疑似肿瘤组织送往华中农业大学动物医学院病理实验室制作蜡块并保存。

1.2 试验试剂 鼠抗CK抗体(1∶200)，鼠抗Vimentin抗体(1∶200)，DAB显色液(固体)，SABC试剂盒，5%BSA封闭液，均购自武汉博士德生物工程有限公司；兔抗Lysomes抗体(1∶200)，兔抗AAT(1∶200)抗体，购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

1.3 试验方法

1.3.1 临床诊断 通过对病犬的临床检查，了解发病过程，了解疑似肿瘤的位置，初步诊断后，经主人同意切除肿瘤。并对切除肿瘤观察病理特征。

1.3.2 肿瘤组织的病理学检查 将切除的肿块放在10%福尔马林溶液中固定3 d后取材、脱水、浸蜡、包埋。并将组织切成3微米厚度的切片。一部分进行H.E.染色，观察病理变化；另一部分进行免疫组织化学法(SABC法)染色，染色指标包括Vimentin、CK、Lysomes和AAT。H.E.染色采用常规的染色方法，免疫组织化学SABC染色方法参考武汉博士德生物工程有限公司的即用型SABC免疫组化试剂盒内说明书。

1.3.3 采图与观察 将H.E.染色切片和免疫组化切片在显微镜下观察，并通过NIS-Elements高清晰度彩色图文分析系统配合Nikon80i生物光学显微镜对典型病变进行显微采图。

2 结果

2.1 雌性金毛犬的临床症状和病理学检查结果 本病例为两岁雌性金毛犬，患犬在就诊前2个月分娩，分娩后开始阴道流血不止，虽经治疗，但是没有明显疗效。对阴道部进行检查发现有疑似肿瘤肿块，对肿块进行切除。

对疑似肿瘤组织的病理组织学检查可见瘤组织位于阴道黏膜(见中插彩版图1A)，瘤组织内血管丰富，瘤细胞多呈圆形或卵圆形，细胞体积大小不一，细胞核大且多为圆形或卵圆形，细胞质较丰富(见中插彩版图1B)。

免疫组织化学染色结果显示，瘤组织内瘤细胞的Vimentin表达阳性(见中插彩版图1C)，CK表达呈阴性(见中插彩版图1D)，Lysomes表达呈强阳性(见中插彩版图1E)，AAT呈部分表达阳性(见中插彩版图1F)。

A：瘤组织位于阴道黏膜下(H.E.染色)； B：瘤细胞排列密集，多为圆形(H.E.染色)； C：瘤细胞的Vimentin表达阳性(DAB-IHC)； D：瘤细胞CK表达呈阴性(DAB-IHC)； E：瘤细胞Lysomes表达呈强阳性(DAB-IHC)； F：瘤细胞AAT呈部分表达阳性(DAB-IHC)。

2.2 雄性秋田犬的临床症状和病理学检查结果 本病例为3岁雄性日本秋田犬。患犬就诊时精神尚可，食欲正常，行动亦未见异常，但见病犬包皮口的皮毛上有血迹，并且龟头部有滴血现象。经检查发现该犬阴茎根部有直径约3 cm的肿物，怀疑为肿瘤。经与主人沟通同意手术切除阴茎。手术切除阴茎后可清楚地看到肿瘤，瘤体基本呈粉红色，与包皮及阴茎的颜色一致。表面呈菜花样，分叶明显，质地脆而易脱落，局部有出血和坏死(见中插彩版图2A)。

对疑似肿瘤组织的病理组织学检查可见瘤组织位于皮肤表皮下，瘤细胞多呈圆形或卵圆形，细胞体积大小不一，细胞核为圆形或卵圆形，细胞质较丰富(见中插彩版图2B)。

免疫组织化学染色结果显示，瘤组织内瘤细胞的Vimentin表达阳性(见中插彩版图2C)，CK表达阴性(见中插彩版图2D)，部分瘤细胞Lysomes表达阳性(见中插彩版图2E)，AAT呈强阳性表达(见中插彩版图2F)。

A：瘤组织位于皮肤表皮下(H.E.染色)； B：瘤细胞排列密集，多为圆形(H.E.染色)； C：瘤细胞的Vimentin表达阳性(DAB-IHC)； D：瘤细胞CK表达呈阴性(DAB-IHC)； E：部分瘤细胞Lysomes表达呈阳性(DAB-IHC)； F：瘤细胞AAT呈强阳性表达(DAB-IHC)

3 讨论

犬的传染性性病肿瘤组织呈大小不一的结节状，有些结节融合后形成菜花样结构。其主要生长在母犬的阴蒂窝、阴道内壁和外阴表面，或生长在公犬的包皮内侧面和阴茎上。母犬表现为阴道长时间持续性滴血，十分容易与发情相混淆，但其不愿意交配。公犬主要表现为包皮口有淡红色血性分泌物，在其包皮内侧或阴茎上会出现与母犬一样形态的增生物。本文中两例病犬的临床表现和眼观病变与文献报道一致[5-7]，可以诊断为传染性性病肿瘤。

通过对大量的CTVT对溶菌酶和AAT的表达情况分析，证实了这两个标记可以应用在CTVT，它们用于鉴别诊断是有用的，因为他们的表达可以排除淋巴瘤、无色素性黑色素瘤、低分化癌、低分化的肥大细胞瘤(Mozosetal,1996；Perezetal,1998)。

实验中CTVT对波形蛋白的表达呈阳性，对角蛋白的表达呈阴性。这些结果与以前的研究结果是一致的。因为9/10的淋巴瘤不表达波形蛋白，所以这种抗体可以用来鉴别生殖器外的CTVT和某些类型的淋巴瘤。角蛋白和波形蛋白的联合应用可以用来鉴别外阴CTVT和低分化癌[4，8]。

据实验结果可知，该肿瘤对溶菌酶，AAT，波形蛋白特异性免疫染色的反应为阳性，对角蛋白的免疫染色为阴性，表明该肿瘤细胞来源于组织细胞。通过对该病例中病犬的临床症状，血常规检查，生化检验以及病理学诊断，可以确诊该肿瘤为传染性性病肿瘤。

本实验立足于宠物临床实际病例的诊断，运用实验室免疫组化诊断的方法对其进行确诊，大大提高了临床肿瘤病例诊断的科学性，具有较大的临床价值和意义。

志谢：深圳市福华宠物医院和武汉市明星宠物医院提供肿瘤病例资料。

[1] Perez Jose, Day Michael J, Mozos Elena.Immunohistochemical study of the local inflammatory infiltrate in spontaneous canine transmissible venereal tumor at different stages of growth[J].Veterinary Immunology and Immunopathology, 1998，164:133-147.

[2] 刘占斌，戴宗浩，龚剑锋，等.犬的传染性性病肿瘤[J].中国工作犬业，2008，12：38-39.

[3] 应璐，胡延春.犬传染性交媾性肿瘤病例[J].中国兽医杂志，2005，41(5): 38.

[4] Marchal T, Chabanne L, Kaplanski C,etal．Immunophenotype of the canine transmissible venereal tumor[J].Veterinary Immunology and Immunopathology, 1997，57:1-11.

[5] 张信军，陈静，徐剑蓉.犬传染性性病肿瘤的诊治[J].畜牧与兽医，2014，46(4):98-100.

[6] 李培德，侯凤香，胡霖，等.诊治犬传染性性病肿瘤[J].中国兽医杂志，2015，51(6)：86-87.

[7] 董悦农，袁占奎，杨万莲.犬转移性性肿瘤的治疗[J].中国兽医杂志，2005，41(5):34-35.

[8] Mozos E, Mendez A, Gomez-Villamandos J C,etal. Immunohistochemical Characterization of Canine Transmissible Venereal Tumor[J].Veterinary Pathology,1996,33:257-263.

S858.292

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0529-6005(2017)08-0076-02

2017-03-20

蔡双双(1967-)，女，教授，本科，主要从事动物药理、动物疫病防治的教学和技术推广工作，E-mail：541311891@qq.com