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抗猪流行性腹泻中药复方制剂的急性毒性试验

2017-01-16徐国银洪伟鸣谈为忠杨利慧

中国畜牧兽医文摘 2017年7期
关键词:灌胃流行性制剂

徐国银洪伟鸣谈为忠杨利慧

(1.江苏省苏州市吴中区金庭动物防疫站,江苏苏州 215111;2.江苏农牧科技职业学院,江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室,江苏泰州 225300)

抗猪流行性腹泻中药复方制剂的急性毒性试验

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(1.江苏省苏州市吴中区金庭动物防疫站,江苏苏州 215111;2.江苏农牧科技职业学院,江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室,江苏泰州 225300)

为观察一种抗猪流行性腹泻的中药复方制剂对小鼠的安全性。根据《兽药试验技术规范汇编》的要求选用小白鼠进行了急性毒性试验研究,采用灌胃法进行了急性毒性试验,试验结果表明该复方制剂对小鼠没有毒性作用。

猪流行性腹泻 中药复方制剂 小鼠 急性毒性

猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的急性、接触性、高度传染性的一种消化道疾病,是危害养猪产业最重要的传染病之一。该病临床主要症状表现为急性肠炎以及呕吐、水样腹泻和脱水。PED的波及范围甚广,在全球均有病例报道。并且PED发病率高,各种年龄的猪都能感染发病,7日龄以下仔猪感染死亡率可高达80%~100%[1]。PED的频发给我国养猪产业造成了严重的经济损失[2]。

由于PEDV具有高度的变异性,给临床治疗带来了很多困难。目前,市面上预防PED主要是依靠PED弱毒苗和灭活苗。治疗PEDV的药物以西药为主,虽可缓解病情和降低死亡率,但极易引起致病病毒变异而导致产生耐药性,并存在动物体内药物残留等隐患[3]。因此,开展抗PEDV药物的研发对控制猪流行性腹泻病、促进养猪产业的健康发展有着十分重要的意义。随着人们对绿色畜产品的需求度越来越高,中草药作为化学药物的替代品用于防治畜禽疾病愈发得到大家的重视。本研究所用药物为江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室研制的一种用于防治猪流行性腹泻病的纯中药复方制剂,为全面评价其安全性和为临床安全科学用药提供依据,根据农业部《兽药试验技术规范汇编》的要求,进行了急性毒性试验研究。同时,也为后续深入探讨该复方制剂的药理作用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

健康清洁级昆明系小白鼠50只,雌雄各半,体重20±2g,购自江苏省扬州大学比较医学中心,预饲3d后开展试验。

1.2 试验药物

抗猪流行性腹泻的中药复方制剂由黄连、白头翁等10味中药精制而成,浓缩至1ml药液相当于1g药材。由江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室自行研制。

1.3 试验方法

将上述50只精神状态良好的小白鼠随机分成5组,每组10只,雌雄各半,其中,第Ⅰ~Ⅳ组为试验组,第Ⅴ组为空白对照组,正式灌胃给药前禁食12h,不禁水。根据预试验的剂量,分别按0.01、0.02、0.03、0.04ml/g·BW等四个不同剂量对实验动物进行灌胃。其中,空白对照组按0.04ml/g·BW灌服生理盐水。采用一次剂量直接灌入,灌胃完成后每天注意观察小鼠的精神状况、采食饮水情况和死亡情况,并及时如实记录。灌胃7d后统一剖检存活小鼠,观察主要脏器是否存在病变及其他异常[4-5]。

2 结果与分析

经一次剂量直接灌服不同浓度的药物后,各组实验动物均未见死亡。低剂量组灌胃后小鼠的采食饮水与精神状态均正常;高剂量组灌胃后小鼠经短暂休息与调整,均能较快地恢复正常活动,次日观察采食量和精神状态均显正常,整个试验周期内未见小鼠出现明显的中毒症状。第7d时剖检存活小鼠,观察主要脏器均未发现肉眼可见的明显病变(结果详见表1)。

3 讨论

(1)灌胃剂量达到高剂量时易导致小鼠的胃肠道功能发生紊乱,故而小鼠易表现出采食量下降和精神状态低迷等现象。伴随着时间推移,上述情况逐渐转好,并在次日后可恢复正常。

(2)剖检存活小鼠后未见心、肝、脾、肺等主要脏器出现肉眼可见的病变,由此可证明短期内该复方制剂对小鼠是安全的。

(3)急性毒性试验是临床评价药物安全性的一项重要指标,本试验通过经口灌胃给药的途径观察了该复方制剂的急性毒性。灌胃的最高剂量达到了0.04ml/g·BW,试验结果表明未发现对小鼠造成任何可见的毒性反应。

(4)根据农业部《兽药试验技术规范汇编》中结果评定标准应判定为无毒[4]。因此可认为临床上使用该复方制剂治疗猪流行性腹泻病是安全的。

[1]高君恺,刘浩飞,杨倩.猪流行性腹泻病毒的研究进展[J].南京农业大学学报,2014,37(1):1-5.

[2]Chen J F,Wang C B,Shi H Y,etal.Molecular epidemiology of porcine epidemic diarrhea virus in China[J].Arch Virol,2010,(155):1471-1476.

[3]李彬,刘浩飞,孙冰,等.猪流行性腹泻病毒Taq Man荧光定量PCR方法的建立与应用[J].江苏农业学报,2014,30(1):125-129.

[4]洪伟鸣,左伟勇,郁杰,等.鸡支康口服液的急性毒性试验[J].江苏农业科学,2013,41(7):218.

[5]郁杰,葛竹兴,邢晓玲,等.仔猪痢清口服液的急性毒性实验研究[J].中国兽药杂志,2009,43(3):29-30.

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