林开颜 张 晋 殷 立 白 梅 石晓燕 樊永娜 王 蓉 张 华 赵学发 刘三都*

（贵州省黔南州人民医院，贵州 黔南 558000）

全自动毛细管血红蛋白电泳对育龄夫妇地中海贫血筛查的诊断价值

林开颜 张 晋 殷 立 白 梅 石晓燕 樊永娜 王 蓉 张 华 赵学发 刘三都*

（贵州省黔南州人民医院，贵州 黔南 558000）

目的 探讨全自动毛细管血红蛋白电泳法对育龄夫妇地中海贫血筛查的诊断价值。方法 选取2014年6月至2016年3月参加黔南州地中海贫血防控试点县级医疗机构送检符合地中海贫血筛查对象的17936例育龄夫妇孕前标本，进行毛细管血红蛋白电泳测试，观察血红蛋白的异常组分布情况，进行分型；同时与血液常规检测、基因诊断比较分析。结果 地中海贫血电泳筛查表型阳性对象中，毛细管电泳对α-地中海贫血筛查阳性率显著高于血常规筛查；对β-地中海贫血筛查阳性率与血常规筛查无显著性差异。结论 全自动毛细管血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中有较高价值，尤其是对β-地中海贫血筛查的准确率高于血常规筛查，能够为育龄夫妇孕前地中海贫血筛查提供可靠依据，值得推广。

地中海贫血；血红蛋白电泳测试；诊断价值

地中海贫血（以下简称地贫）即珠蛋白生成障碍，属于遗传性溶血性贫血疾病，发病机制在于遗传基因缺陷，导致血红蛋白（Hb）中的珠蛋白链合成缺损，最终使患者处于贫血状态[1]。全自动毛细管电泳技术能准确分离Hb正常和异常组分，可为地中海贫血及Hb病提供可靠的诊断依据，全自动毛细管Hb电泳测试能够迅速明确Hb的异常情况，因此在地中海贫血的诊断上具有重要作用。近年来发展迅速，是分离Hb组分的首选方法。本文选取我州地中海贫血试点送检的育龄夫妇孕前血标本进行分析，探讨其诊断价值，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选取2014年6月至2016年3月参加黔南州地中海贫血防控试点县级医疗机构送检送检符合地中海贫血筛查对象的17936例待生育夫妇血标本，进行血常规、Hb电泳测试，观察Hb的异常组分布情况，并进行基因分型。

1.2 方法

1.2.1 采集静脉血4 mL，分两管于EDTA-K2的抗凝管中，一管在采血机构检测血常规；另一管保存于2～8 ℃冰箱中，1周内冷链包转送至黔南自治州人民医院检验科进行Hb电泳。血液学初步筛查由县级医疗机构血细胞自动计数仪测定，包括平均红细胞容积（MCV）测定和平均红细胞Hb含量（MCH），血常规筛查地中海贫血阳性判断标准为血常规MCV＜80 f和（或）MCH＜27 pg[2]。

1.2.2 Hb毛细管区带电泳标本的采集及处理用一次性真空采血管（含EDTA K2抗凝剂）抽取人群静脉空腹血液2～3 mL，摇匀抗凝，置于2～8 ℃冰箱冷藏，7 d内检测。电泳操作采用法国sebia公司Capilaiys2全自动毛细管电泳仪及配套试剂行Hb电泳，根据Hb成分，进行地中海贫血表型阳性的分型。质控品取SEBIA公司提供的正常HbA2作室内质控物。参加年度广西自治区临床检验中心室间质量评价成绩合格。Hb电泳正常参考值[3]成人男女HbA2为2.5%～3.5%，且未出现异常Hb带。如出现HbA2＜2.5%，或出现异常Hb条带（HbH、Bart’s），判为α-地中海贫血表型阳性；如出现HbA2＞3.5%，和（或）HbF≥5.0%，则判为β-地中海贫血表型阳性。若出现其他异常Hb区带则判为异常Hb病。

1.2.3 基因诊断对于待生育夫妇筛查表型均为阳性者，单独采集标本送贵州省人民医院检验科临床分子生物学实验室进行基因诊断。

1.3 观察项目和指标：两种初筛方法检测地中海贫血表型阳性率，地平表型阳性分型，地中海贫血表型阳性基因检测。

1.4 统计学方法：分析软件采用SPSS18.0版本，其中电泳测试结果作为计数资料，采用χ2检验，P＜0.05视为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 Hb电泳和血常规筛查结果：17936例待生育夫妇中，Hb电泳法共筛查出地中海贫血表型阳性2415例（13.5%），其中α-地中海贫血表型阳性1479例（8.3%），β-地中海贫血表型阳性936例（5.2%）；血常规筛查出地中海贫血表型阳性2558例（14.3%），Hb电泳阳性检出率占血常规阳性检出率的94.4%（P＞0.05）。

2.2 Hb电泳筛查α-地中海贫血、β-地中海贫血表型阳性与血常规筛查表型阳性比较：两种检测方法对比：Hb电泳法检出的α-地中海贫血表型阳性1479例中，血常规筛查的地中海贫血表型阳性例数为983例，占Hb电泳阳性检出率的66.5%，两种筛查方法阳性检出率有统计学意义（P＜0.05）；Hb电泳法检出的β-地中海贫血表型阳性936例中，血常规筛查的地中海贫血表型阳性数为871例，占Hb电泳阳性检出率的93.1%，两种筛查方法阳性检出率无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

2.3 Hb电泳筛查α-地中海贫血、β-地中海贫血表型阳性结果与基因检测结果比较：在17936例待生育夫妇中，选取全自动毛细管Hb电泳法地中海贫血筛查夫妇表型双阳152例患者行基因检测。其中，α-地中海贫血表型阳性数为79例，基因确诊45例，与基因诊断符合率为56.96%；β-地中海贫血表型阳性数为73例，基因确认72例，与基因诊断符合率为98.63%，另外4例为a复合β型地中海贫血。见表2。

表1 两种初筛方法对α地中海贫血、β-地中海贫血筛查表型阳性结果的比较（n）

表2 Hb电泳与基因检测对地中海贫血分型结果比较（n）

3 讨 论

Hb电泳是地中海贫血筛查的最主要方法。临床上分离Hb组分的应用方法有醋酸纤维膜电泳法、琼脂糖凝胶电泳法、全自动毛细管电泳法及高效液相色谱（HPLC）法。醋酸纤维膜电泳法和琼脂糖凝胶电泳法因样本处理复杂，人工操作步骤繁琐，耗时长，且分析灵敏度及重复性均不佳，以逐渐被淘汰；高效液相色谱（HPLC）法操作简单，自动化程度高，但成本较高，在临床上应用受到一定限制；全自动毛细管电泳法具有操作简便、重复性好、省时、高效等特点，且能准确分离Hb正常及异常组分含量，能为地中海贫血的诊断提供重要依据[4-5]，临床上应用较为广泛。本研究通过对17936例待孕育龄夫妇血标本进行血常规和Hb电泳分析，血常规筛查出地中海贫血表型阳性2558例（14.3%），Hb电泳筛查出地中海贫血表型阳性2415例（13.5%），平行比较二者地中海贫血筛查阳性结果，发现血常规分析对地中海贫血表型阳性检出率略高于Hb电泳法，Hb电泳阳性检出率占血常规阳性检出率的94.4%。本研究结果提示血常规分析在地中海贫血筛查中灵敏度高于Hb电泳技术。文献报道[6]Hb电泳联合血常规指标进行地中海贫血筛查具有更好的准确性和特异性，可提高地中海贫血筛查的准确率。Hb电泳与血常规筛查α-地中海贫血、β-地中海贫血表型阳性结果比较显示，血常规检测阳性者与α-地中海贫血符合率为66.5%（P＜0.05），具有统计学意义；与β-地中海贫血符合率93.1%（P＞0.05），无统计学意义。

本研究应用血常规分析及Hb电泳对地中海贫血筛查时发现，Hb电泳对α-地中海贫血筛查阳性符合率明显低于β-地中海贫血阳性符合率，这可能与α-地中海贫血表型较复杂有关。本文选取的152例Hb电泳筛查表型阳性者的基因检测结果显示，对α-地中海贫血、β-地中海贫血确诊符合率分别为56.96%、98.63%，Hb电泳技术对筛查β-地中海贫血的确诊率明显高于α-地中海贫血，与相关的报道相似[7]。其主要原因为由于某些小细胞低色素性贫血如Hb病、缺铁性贫血等，可引起MCV、MCH及A2的下降，导致α-地中海贫血筛查假阳性升高。

文献报道[8]Hb电泳对β-地中海贫血具有较高的检出率，原因是由于一些静止性α-地中海贫血患者其MCV、MCH及HbA2均正常，通过Hb电泳不能筛查出这些患者，故导致α-地中海贫血检出率降低。提示如何进一步提高对α-地中海贫血筛查的准确率值得研究。

综上所述，全自动毛细管Hb电泳技术具有操作简单、快捷、高效等优点，能较准确地进行地中海贫血的筛查，可以用于大规模人群筛查地中海贫血，对孕前育龄夫妇健康筛查中提供有关地中海贫血临床诊断信息以及地中海贫血的遗传咨询、优生优育等方面具有重要临床价值。

[1] 范丽红,何平亚.血红蛋白电泳对妊娠妇女地中海贫血筛查的研究[J].浙江预防医学,2013,25(5):13-15.

[2] 田佩玲,郑立新,李铭臻,等.14143名育龄人群β-地中海贫血检查结果分析[J].中华血液学杂志,2009,30(5):337-338.

[3] 张之南,沈悌.血液病诊断及疗效标准[M].3版.北京:科学出版社,2007:29-35,40-41.

[4] 贾冰,林志芳,纪新梅,等.常用筛查方法在地中海贫血诊断中的临床应用[J].检验医学与临床,2010,7(13):1339-1340.

[5] 王燕燕,李晓辉,徐西华,等.地中海贫血诊治进展与我国现状[J].中国实用儿科杂志,2013,28(6):473-474.

[6] Yang Z,Chafn CH,Easley PL.Prevalence of elevated hemoglobin A2 measured by the Capillarys Systerm[J].Am J ClinPATHOL,2 011,131(1):42-48.

[7] 黎彩鹏,陈泳言.血红蛋白电泳检测数据的进一步统计分析[J].中国优生与遗传杂志,2007,5(15):39-40.

[8] 李文瑞,叶敏南,彭琪.2898例全自动血红蛋白电泳检测结果分析[J].国际检验医学杂志,2015,36(4):437-439.

R556

B

1671-8194（2016）34-0028-02

国家卫计委地中海贫血防控试点项目（贵州）-国卫办妇幼函【2015】874号

*通讯作者：E-mail： liusandu@126.com