俞云贞，郑彩云

(福清市医院，福建福清 350300)



狭苞橐吾化学成分研究

俞云贞，郑彩云

(福清市医院，福建福清 350300)

[目的]研究狭苞橐吾Ligulariaintermedia的化学成分。[方法]采用甲醇提取，经硅胶柱层析和重结晶等方法提取分离活性成分，通过波谱技术进行结构鉴定。[结果]得到7种化合物，分别为蜂斗菜素(Ⅰ)、8β-hydroxyeremophil-7(11)-ene-12，8α(4β，6α)-diolide(Ⅱ)、蒲公英甾醇(Ⅲ)、 2-acetyl-5，6-dimetboxybenzofuran(Ⅳ)、8β-metboxyeremophil-7(11)-en-6α，15；8α，12-diolide(Ⅴ)、euparone(Ⅵ)、胡萝卜苷(Ⅶ)。[结论]化合物Ⅲ～Ⅵ均为首次从该植物中分离得到。

狭苞橐吾；倍半萜；苯并呋喃；三萜

菊科(Compositae)橐吾属是中药界熟知的药用植物，全世界约130种。绝大多数 种类产自亚洲，我国有111种，分布于全国各地，主产于西南山区，其中河南有 11种。狭苞橐吾(Ligulariaintermedia)是该属植物中的一种，为多年生草本，生长于海拔1 500 m以上的山坡林下、水边及草甸[1-2]。其根及根状茎名为山紫菀，在民间用于润肺化痰、止咳、平喘[3]。其化学成分主要有倍半萜类化合物如蜂斗菜素、 异蜂斗菜素，三萜类化合物如羽扇豆醇。研究表明，这几类化合物具有 丰富而独特的药理活性[4-7]。由于植物种类、生长地区不同，化合物成分差异较大[8-9]。为从狭苞橐吾中寻找新的生物活性较好的天然药物，笔者对采自河南牛 儿山的狭苞橐吾进行了系统的化学成分研究，通过硅胶柱层析和重结晶的方法对化合物进行分离，从其甲醇提取物中分离鉴定了7个化合物。

1　材料与方法

1.1材料狭苞橐吾于2010年6月采自河南省牛儿山，经山 东大学威海分校海洋学院赵宏副教授鉴定。

1.2仪器Bruker AM-400 核磁共振波谱仪测定(内标为TMS，德国Bruker 公司)；紫外分析仪(上海康华生化仪器制造有限公司)；色谱用硅胶和薄层色谱 GF 254 硅胶板均为青岛海洋化工厂产品。所用试剂均为分析纯。

1.3提取方法狭苞橐吾根约 15 kg，阴干粉碎，甲醇冷浸提取 4 次(每次7 d)，合并提取液，减压蒸馏得浸膏 800 g。所得浸膏经硅胶柱色谱，以正己烷-丙酮体系(20∶1、10∶1、5∶1、2∶1)梯度洗脱，分段收集。

2　结果与分析

2.1分离结果TLC 检测得4个部分 Fr.1～4。Fr.1(1.89 g)经石油醚-丙酮体系梯度洗脱得化合物Ⅲ(12 mg)；Fr.2(55 g)经硅胶色谱，以正己烷-乙酸乙酯体系梯度洗脱后，重结晶得化合物Ⅰ(55 mg)；Fr.3(3.21 g)以石油醚-丙酮体系梯度洗脱，分段收集得到化合物Ⅳ(15 mg)、化合物Ⅶ(23 mg)、化合物Ⅴ(3.0 mg)；Fr.4(1.89 g)以石油醚-丙酮体系经硅胶柱层析梯度洗 脱得化合物Ⅱ(6 mg)、重结晶得化合物Ⅵ(2 mg)。

2.2结构鉴定

2.2.1化合物Ⅰ。无色透明块状晶体，TLC 检识，遇 5%硫酸-乙醇溶液加热显色 后呈粉红色；1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ：0.98(3H，d，J= 6.8 Hz，H-15)，1.25(3H，s，H-14)，1.52(1H，m，H-1β)1.66(2H，m，H-2)，1.75(3H，s，H-13)，1.89(3H，brs，H-5’)，1.99(3H，d，J=1.5 Hz，H-4’)，2.03(1H，m，H-1α)，2.24(2H，m，H-6)，2.55(1H，m，H-4)，3.13(1H，dd，J=4.6，4.6 Hz，H-7)，4.83(1H，d，J=0.7 Hz，H-12α)，4.96(1H，ddd，J=3.8，4.4，4.4 Hz，H-3)，5.80(1H，d，J=1.8 Hz，H-12β)，5.80(H，s，H-9)，6.09(6H，m，H-3’)；13C NMR(500 MHz，CDCl3)δ：10.5(C-14)，15.8(C-15)，15.76(C-5’)，20.0(C-13)，20.6(C-4’)，30.6(C-2)，31.6(C-1)，40.0(C-5)，41.7(C-6)，47.3 (C-7)，50.3(C-4)，73.0(C-3)，114.4(C-12)，124.6(C-9)，127.9(C-2’)，138.1(C-3’)，143.3(C-11)，166.8(C-10)，167.6(C-1’)，198.5(C-8)。其核磁数据与文献[10]基本一致，故确定化合物 Ⅰ 为蜂斗菜素(图1)。

2.2.2化合物Ⅱ。无色透明针状晶体，TLC 检识，在 254 nm 紫外灯下有强烈荧光，经 5%硫酸-乙醇溶液加热难显色，于碘瓶中易显色；1H NMR(500 MHz，CH3COCH3)δ：1.26(3H，s，H-14)，1.43(1H，m，H-2β)1.45(1H，m，H-3α)，1.46(1H，m，H-2α)，1.67(1H，m，H-4)，1.77(1H，m，H-1β)，1.84(3H，d，J=2.1 Hz，H-13)，1.92(1H，m，H-3β)，2.06(1H，m，H-10)，2.17(1H，dd，J=5.2，5.2 Hz，H-9β)，2.25(1H，m，H-1α)，2.65(1H，dd，J=3.2，3.1 Hz，H-9α)，5.13(1H，q，J=5.9 Hz，H-6)；13C NMR(500 MHz，CH3COCH3)δ：9.0(C-13)，20.1(C-1)，20.2(C-14)，21.5(C-2)，25.1(C-3)，36.2(C-10)，37.0(C-9)，40.9(C-4)，45.4(C-5)，83.4(C-6)，104.1(C-8)，127.1(C-11)，153.78(C-7)，171.5(C-12)，176.0(C-15)。以上数据与文献[11]基本一致，故确定化合物Ⅱ为8β-hydroxyeremophil-7(11)-ene-12，8α(4β，6α)-diolide。其结构经 DEPT135 进一步确认(图1)。

2.2.3化合物Ⅲ。无色透明块状晶体，经薄层检识，于 254 nm 紫外灯下无荧光，遇 5%硫酸-乙醇溶液加热呈紫红色；1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ：0.76(3H，s，H-24)，0.79(3H，s，H- 28)，0.83(3H，s，H- 25)，0.94(3H，s，H- 23)，0.97(3H，s，H- 27)，1.03(1H，s，H- 26)，1.68(3H，s，H-30)，3.19(1H，dd，J=5.0，5.0 Hz，H-3)，4.56(1H，s，H-29b)，4.69(1H，s，H-29a)；13C NMR(500 MHz，CDCl3)δ：14.6(C-27)，15.4(C-24)，16.1(C-25)，16.1(C-26)，18.1(C-6)，18.4(C-28)，19.4(C-11)，21.0(C-29)，25.3(C-21)，27.6(C-12)，28.1(C-15)，29.7(C-2)，30.0(C-23)，34.4(C-7)，35.7(C-17)，37.3(C-10)，38.2(C-16)，38.8(C-1)，38.8(C-4)，40.1(C-22)，41.0(C-13)，42.9(C-19)，43.1(C-8)，48.1(C-14)，48.4(C-18)，50.6(C-9)，55.4(C-5)，79.1(C-3)，109.3(C-30)，151.0(C-20)。谱图显示其为三 萜类化合物，经解析并与文献[12]对照，其波谱数据基本一致，故确定化合物Ⅲ为蒲公英甾醇(图1)。

2.2.4化合物Ⅳ。无色透明块状晶体，TLC检测于254 nm紫外灯下有强烈蓝色荧光，遇5%硫酸-乙醇溶液加热呈黄绿色；1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ：2.57(3H，s，H-11)，3.94(3H，s，5-OMe)，3.97(3H，s，6-OMe)，7.06(H，s，H-7)，7.07(1H，s，H-4)，7.43(1H，s，H-3)；13C NMR(500 MHz，CDCl3)δ：26.2(C-11)，56.3(5-OMe)，56.3(6-OMe)，95.1(C-3)，102.8(C-7)，113.8(C-4)，119.1(C-9)，147.8(C-2)，151.5(C-5)，151.7(C-6)，152.4(C-8)，187.6(C-10)。其核磁数据与文献[13]基本一致，故确定化合物Ⅳ为2-acetyl-5，6-dimetboxybenzofuran(图1)。

2.2.5化合物Ⅴ。无色透明针状晶体，薄层层析后，于254 nm紫外灯下有较强荧光，并置于碘瓶中易显色；1H NMR(500 MHz CDCl)δ：1.28(3H s H-14) 1.45(2H，m，H-2)，1.45(2H，m，H-3)，1.78(1H，dd，J=13.6，13.6 Hz，H-9α)，1.91(2H，m，H-1)，2.01(3H，d，J=2.01 Hz，H-13)，2.20(1H，m，H-10)，2.24(1H，dd，J=12.2，3.3 Hz，H-4)，2.29(1H，dd，J=1.36，5.1 Hz，H-9β)，3.22(3H，s，H-OMe)，4.90(2H，q，J=2.0 Hz，H-6)；13C NMR(500 MHz，CDCl3)δ：9.1(C-13)，19.3(C-1)，20.1(C-14)，20.9(C-2)，24.2(C-3)，34.6(C-9)，35.3(C-10)，40.9(C-4)，44.7(C-5)，77.3(C-8)，82.6(C-6)，129.3(C-11)，151.2(C-7)，170.4(C-12)，174.9(C-15)，50.5(C-16)。分析波谱数据，推测该化合物与化合物Ⅱ为同一类。与文献 [14]核磁数据对照表明化合物Ⅴ为8β-metboxyeremophil-7(11)-en-6α，15；8α，12-diolide。其结构经DEPT135进一步证明(图1)。

2.2.6化合物Ⅵ。淡黄色粉末，TLC检测于254 nm紫外灯下有较强荧光，5%硫酸-乙醇溶液显色后置于365 nm紫外灯下可见强烈橙色荧光；1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ：2.59(3H，s，H-Me)，2.60(1H，s，H-13)，2.73(1H，s，H-11)，7.10(1H，s，H-7)，7.46(1H，s，H-4)，8.17(1H，s，H-3)，12.54(1H，s，H-OH)；13C NMR(500 MHz，CDCl3)δ：26.4(C-13)，26.8(C-11)，100.4(C-7)，113.1(C-3)，118.4(C-5)，119.7(C-9)，126.9(C-4)，153.7(C-2)，160.0(C-6)，163.4(C-8)，187.9(C-12)，204.0(C-10)。其核磁数据与文献[15]对照基本一致，故确定化合物Ⅵ为euparone(图1)。

2.2.7化合物Ⅶ。白色粉末，薄层层析遇5%硫酸-乙醇加热显色，为粉红色。与胡萝卜苷标准品共薄层，Rf值一致，故确定化合物Ⅶ为胡萝卜苷(图1)。

图1　化合物结构示意Fig.1　Structural formulas of the compounds

3　小结

该研究对采自河南牛儿山的狭苞橐吾进行系统的化学成分研究，通过硅胶柱层析和重结晶的方法对化合物进行分离，从其甲醇提取物中分离鉴定了7个化合物，分别为蜂斗菜素(Ⅰ)、8β- hydroxyeremophil-7(11)-ene-12，8α(4β，6α)-diolide(Ⅱ)、蒲公英甾醇(Ⅲ)、 2-acetyl-5，6-dimetboxybenzofuran(Ⅳ)、8β-metboxyeremophil-7(11)-en-6α，15；8α，12-diolide(Ⅴ)、euparone(Ⅵ)、胡萝卜苷(Ⅶ)。其中，化合物Ⅲ～Ⅵ均为首次从该植物中获得。部分化合物的生物活性还有待进一步测定，以期为该药材的品质鉴定及新药开发提供科学依据。

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Study of Chemical Components ofLigulariaintermedia

YU Yun-zhen, ZHENG Cai-yun

(Fuqing Hospital, Fuqing, Fujian 350300)

[Objective] To study the chemical components ofLigulariaintermedia. [Method] Active components were isolated fromL.intermediaby methanol extraction, silica column chromatography, and recrystallization, and their structures were determined by spectral analysis. [Result] Eight compounds were isolated fromL.intermedia, including petasitin (Ⅰ), 8β-hydroxyeremophil-7(11)-ene-12,8α(4β,6α)-diolide(Ⅱ), taraxasterol (Ⅲ), 2-acetyl-5,6-dimetboxybenzofuran (Ⅳ), 8β-metboxyeremophil-7(11)-en-6α,15;8α,12-diolide (Ⅴ), euparone (Ⅵ), and daucosterol (Ⅶ). [Conclusion] Compounds Ⅲ-Ⅵ were firstly isolated from the plant.

Ligulariaintermedia; Sesquiterpenes; Benzofuran; Triterpenoid

俞云贞(1970- )，女，福建福清人，主管药师，从事天然药物化学研究。

2016-05-18

S 567.23+9

A

0517-6611(2016)19-121-03