杨小源，殷建峰甘肃省中医院，甘肃兰州730050；2庆阳市中医医院



通脑疏脉丸毒理学及药效学实验研究

杨小源1，殷建峰2△
1甘肃省中医院，甘肃兰州730050；2庆阳市中医医院

目的：观察通脑疏脉丸的急性毒性反应、对血瘀证模型大鼠血液流变学的影响、对大鼠血小板聚集和解聚的影响。方法：对通脑疏脉丸进行小鼠急性毒性实验，因未测出小鼠致死剂量，无法测定LD50，故改测最大给药量；药效学实验采用通脑疏脉丸高剂量组、低剂量组分别灌胃通脑疏脉丸7.5 g/kg（体质量）、2.5 g/kg（体质量）。结果：小鼠灌胃给药通脑疏脉丸，未发现明显毒性反应，1日最大给药量为67.9g/kg（体质量），是临床人日用量的136倍；通脑疏脉丸高、低剂量可使经肾上腺素和冰水处理后造成的血瘀证模型大鼠全血黏度及血浆黏度明显降低（P＜0.05），与模型对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。通脑疏脉丸高、低剂量对ADP诱导大鼠全血血小板聚集有明显抑制作用，能明显降低1、6分钟电阻值，与模型对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：通脑疏脉丸1日内剂量过大口服是安全的，能明显降低大鼠全血及血浆黏度，抑制血小板聚集和促进血小板解聚，有改善血液流变学异常的作用。

通脑疏脉丸；毒理学；药效学

通脑疏脉丸系庆阳市中医医院科研攻关课题，纯中药制剂，项目编号：庆阳市科技计划项目KZ2015-29。通脑疏脉丸由麻黄、细辛、桂枝、当归、干姜、川芎、葛根、赤芍、桃仁、红花、甘草等11味中药组成，其主要功效为温通振阳、化瘀通络。用于治疗缺血性脑中风引起的半身不遂，肢体麻木，言语不利，口眼歪斜等症状。本文就通脑疏脉丸毒理学、药效学进行了实验研究。

1　材料与方法

1.1实验药物通脑疏脉丸（甘肃省庆阳市中医院提供生产，批号：150401）；复方丹参片（广州白云山和记黄埔中药有限公司生产，批号：G4A040）；盐酸肾上腺素注射液（上海禾丰制药有限公司生产，批号：150411）；肝素钠注射液（2 mL/支（12500单位），江苏万邦生化医药股份有限公司生产，批号：1503102）。

1.2实验动物小鼠，BALB/c，SPF级，雌雄各办，体质量18～22 g，兰州大学实验动物中心提供，动物许可证号：SCXK（甘）2013-0002，医用动物合格证号：62000800000063；Wistar大鼠，SPF级，雌雄各半，体质量180～220 g，兰州大学实验动物中心提供，生产许可证号：SCXK（甘）2013-0002，医用动物合格证号：62000800000066。

1.3实验仪器NXE-1B型锥板粘度计（成都仪器厂提供）；WNG-201型红外血浆黏度计（成都仪器厂提供）；BS110S型sartorius电子天平（北京赛多利斯天平有限公司提供）；QX-200全血血小板聚集仪（上海医大仪器厂提供）。

1.4实验方法

1.4.1急性毒性实验

1.4.1.1LD50测定［1-3］预实验：取小鼠15只，雌雄各半，随机分为A、B、C 3组，每组5只。各组小鼠禁食不禁水16小时后分别灌胃给药，A、B、C组分别按0.04 mL/g体质量灌胃56.6%、28.3%、14.2%的通脑疏脉，各组均给药1次，观察给药后7天内小鼠死亡情况。

1.4.1.2最大给药量测定［4］取小鼠60只，雌雄各半，随机分为3组，每组20只。各组小鼠禁食不禁水，16小时后，按最大可给药体积0.04 mL/g体质量灌胃56.6%（最大可给药浓度）通脑疏脉丸，实验各组分别于1日内给药3次（间隔6小时）、2次（间隔6小时）、1次。观察记录各组小鼠给药后7天内的反应情况，以不产生死亡的最大剂量为最大给药量，并按下式计算相当于临床1日给药量倍数：

1.4.2血瘀证模型大鼠全血黏度及血浆黏度测定取正常喂养1周后的大鼠50只，随机分为5组，分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组、高剂量组、低剂量组，每组10只。各组大鼠给予普通饲料、自由饮水。正常对照组和模型对照组灌胃蒸馏水，阳性药对照组灌胃复方丹参片0.72 g/kg（体质量）（相当于临床用量15倍），受试药高、低剂量组分别灌胃通脑疏脉丸7.5 g/kg（体质量）（相当于临床用量15倍）、2.5 g/kg体质量（相当于临床用量15倍），均为0.01 mL/g（体质量）。各组每日给药2次，连续给药10日。除空白对照组外，从给药第2日起，给药30分钟后，其余各组大鼠皮下注射0.1%盐酸肾上腺素注射液0.000 8 mL/g（体质量），共2次，间隔4小时，在2次注射肾上腺素之间（前后各间隔2小时），将大鼠浸入4℃冰水中5分钟，连续2日，建立血瘀型模型［3-6］。实验前12小时禁食不禁水，各组大鼠从股动脉取血，用肝素抗凝，锥板黏度计和血浆黏度计测定大鼠全血黏度和血浆黏度。

1.4.3大鼠血小板聚集和解聚实验［5-6］取大鼠40只，雌雄各半，随机分为4组，每组10只。通脑疏脉丸高、低剂量组分别灌胃通脑疏脉丸7.5、2.5 g/kg（体质量）；阳性药组灌胃复方丹参片0.72 g/kg（体质量）；正常对照组灌胃生理盐水，均为0.01mL/g（体质量）。各组每天灌胃1次，连续5天。于末次给药1.5小时，从颈静脉取血2 mL放入含25 U/mL肝素5 μL的试管中，混匀。取抗凝血0.5 mL，置硅化管中，加0.5 mL缓冲液，预热5分钟，待电阻值恒定后，以ADP（5 μmoL/L）诱导血小板聚集，读取1分钟电阻值。清洗并预热电极，读取6分钟电阻值。

1.5统计学方法所有数据均经SPSS 15.0统计学软件进行处理，计量资料用（χ±s）表示，采用t检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2　结果

2.1急性毒性实验给药后7天后3组均未出现死亡。见表1。

表1　小鼠LD 50预实验结果

2.2最大给药量测定给药后7天3组均未出现死亡，也未发现明显毒性反应。见表2。

2.3对血瘀证模型大鼠全血黏度及血浆黏度的实验结果通脑疏脉丸高、低剂量组可使血瘀证大鼠高、中、低切变率下的全血黏度和血浆黏度明显降低。高剂量组与模型对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05），低剂量组与模型对照组比较，差异也有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表2　小鼠最大给药量实验结果

表3　通脑疏脉丸对血瘀证模型大鼠全血、血浆黏度的影响mpa·s

2.4对大鼠血小板聚集和解聚的实验结果通脑疏脉丸高、低剂量连续给药5天，对ADP诱导的血小板聚集有明显抑制作用，可以显著降低1分钟电阻值，高、低2个剂量组与正常对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；高、低剂量组对血小板自动解聚均有明显促进作用，可以显著降低6分钟电阻值，高、低2个剂量组与正常对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表4。

表4　通脑疏脉丸对大鼠血小板聚集和解聚的影响

3　结论

对小鼠灌胃给药通脑疏脉丸，未发现明显毒性反应，1日最大给药量为67.9g/kg（体质量），是人临床日口服剂量的136倍。对经肾上腺素和冰水处理后造成的血瘀证模型大鼠全血和血浆黏度增高，通脑疏脉丸具有明显降低全血和血浆黏度的作用。通脑疏脉丸还有抑制对ADP诱导大鼠全血血小板聚集和促进血小板解聚的作用。

综上所述，通脑疏脉丸1日内剂量过大口服是安全的，其具有降低大鼠全血及血浆黏度，抑制血小板聚集和促进血小板解聚的作用。

［1］陈奇.中药药理研究方法学［M］.北京：人民卫生出版社，1993：113-118.

［2］姜华.芦荟鼻安软膏药效学及毒理学实验研究［J］.西部中医药，2003，16（1）：40-41.

［3］李伦，刘琳，李传枉，等.3种活血化癖药对实验性血疲证模型大鼠作用的比较研究［J］.中医药学报，2011，39（6）：37-39.

［4］吴清河，李清浩，梁颂名，等.女金丹抗炎和对血液流变学影响的实验研究［J］.广州中医药大学学报，1996，13（1）：41-43.

［5］武新梅，江明华.抗凝剂、孵育温度及时间对电阻抗法检测全血血小板聚集的影响［J］.检验医学教育，2005，12（4）：41-44.

［6］陈奇.中药药理研究方法学［M］.北京：人民卫生出版社，2000：581-585.

Experimental Study on Toxicology and Pharmacology of TongNao ShuMai Pills

YANG Xiaoyuan1，YIN Jianfeng2△
1 Gansu Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine，Lanzhou 730050，China；2 Qingyang Municipality Hospital of Traditional Chinese Medicine

Objective：To observe acute toxic reaction of TongNao ShuMai pill and its effects on the hemorheology，platelet aggregation and depolymerization of the rat model of blood-stasis pattern.Methods：Acute toxic test of TongNao ShuMai pill was conducted on the mice，because the lethal dosage and LD50 were not detected out，maximum administration dosage was tested.In the pharmacodynamic study，the rats were divided into low dosage group and high dosage group.They accepted TongNao ShuMai pill in the concentrations of 7.5g/kg body mass and 2.5g/kg body mass respectively.Results：No obvious toxic reaction was found after the mice received intragastric administration of TongNao ShuMai pill.The maximum administration dosage was 67.9g/kg within one day，which was 136 times of human dosage；TongNao ShuMai pill in the low and high dosage could lower the blood and plasma viscosity of the rat model of blood-stasis pattern notably（P＜0.05）which were caused by adrenaline and ice water.Compared with model control group，the differences had statistical meaning（P＜0.05）.TongNao ShuMai pill in the low and high dosage could inhibit whole blood platelet aggregation of ADP-induced rats obviously，and it could obviously decrease one，six resistance values，the difference showed statistical meaning compared with the model control group（P＜0.05）.Conclusion：It's safe to take TongNao ShuMai pill orally in large dose within one day，which could obviously decrease whole blood and plasma viscosity，inhibit platelet aggregation，promote platelet depolymerization and improve abnormal hemorheology.

TongNao ShuMai pill；toxicology；pharmacology

R285.5

A

1004-6852（2016）06-0013-03

2016-02-15

杨小源（1970—），男，副主任中药师。研究方向：中药制剂与中药炮制。

△殷建峰（1969—），男，副主任中药师。研究方向：中药制剂与中药鉴定。