李淑贞，杨晓晖，崔茂香，张兰兰沧州医学高等专科学校，河北沧州061001



通络玉液汤对2型糖尿病心肌病大鼠糖脂代谢及氧化指标的影响*

李淑贞，杨晓晖，崔茂香，张兰兰
沧州医学高等专科学校，河北沧州061001

目的：探讨通络玉液汤对糖尿病心肌病（DC）大鼠糖脂代谢的改善作用及其机制。方法：采用高糖高脂饮食+小剂量链脲佐菌素腹腔注射的方法复制2型糖尿病心肌病大鼠模型。将48只大鼠随机分为4组：正常对照组、糖尿病心肌病组、通络玉液汤4周组、通络玉液汤8周组。分别处理4～8周后，测定大鼠血糖（FBG）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）活性的改变，观察胰岛细胞的病理变化。结果：用药组大鼠FBG、TC、TG、LDL-C、MDA水平明显下降（P＜0.05），HDL-C水平、SOD活性明显上升（P＜0.05），且随干预时间的延长，治疗效果更加显著。结论：通络玉液汤可能通过抗氧化作用改善糖脂代谢紊乱、修复胰岛β细胞。

通络玉液汤；2型糖尿病心肌病；糖脂代谢；抗氧化

糖尿病心肌病（diabetic cardiomyopathy DC）是一种独立于冠心病、高血压、先天性心病和其他种类的心脏病之外的特异的心脏病变，发病率高、危害大，与糖尿病患者心血管疾病的高发生率和高病死率密切相关，是严重威胁人类健康的世界性公共卫生问题［1-4］。通络玉液汤在玉液汤、生脉散原方基础上加减化裁组成，具有益气养阴、活血通络之功效。本实验旨在高糖高脂喂养+小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立接近临床特征的实验性2型糖尿病心肌病大鼠模型的基础上，通过观察空腹血糖（FBG）、血脂、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）等指标，探讨该药对DC大鼠糖脂代谢的改善作用及其机制。

1　材料与方法

1.1实验动物SD大鼠，雄性，体质量150～180g，SPF级，中国人民解放军军事医学科学院卫生学环境医学研究所动物实验中心提供，合格证号：SCXK-（军）2009-003。

1.2药物及试剂通络玉液汤（生晒参、生黄芪、生山药、麦冬、知母、花粉、葛根、五味子、鸡内金等）中药饮片均购自沧州同仁堂药店。浸泡，煎煮、浓缩成每毫升含2.5 g生药的液体；链脲佐菌素（STZ），购自美国Sigma公司；FBG、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、MDA、SOD试剂盒均购自南京建成生物制品研究所。

1.3实验方法

1.3.1分组与造模48只SD雄性大鼠，适应性喂养1周后，参考董世芬等［3］方法，并根据预实验结果，分为正常对照组（NC组）和模型组。NC组一直采用基础饲料喂养，模型组先用高脂高糖饲料（20%蔗糖、10%猪油、2.5%胆固醇和67.5%基础饲料）喂养4周，然后一次性腹腔注射1%STZ 30 mg/kg，NC组仅给予等量枸橼酸钠缓冲液（pH=4.4）腹腔注射，不采血。72小时后测大鼠FBG，大于11.1 mmol/L认为是2型糖尿病模型成功大鼠，持续高脂高糖饲料喂养6周，即成DC模型。选择成模大鼠36只，随机分为3组：糖尿病心肌病组（DC组）、通络玉液汤4周组（TYD4周组）、通络玉液汤8周组（TYD8周组）；每组数量均为12只。

1.3.2给药方法DC模型成功后开始给药，TYD组灌服通络玉液汤25 g/（kg·d）；NC组和DC组每日灌服相应剂量的生理盐水，每周根据大鼠体质量以及饲料消耗来调整药物剂量。4周组连续灌药4周，8周组连续灌药8周。各组大鼠均以原饲料继续喂养至实验结束，整个实验过程中自由摄食和饮水。

1.4指标测定

1.4.1血生化指标测定实验结束后各组动物禁食12小时从颈总动脉取血2 mL，制备血清-20℃保存以备检测各生化指标。葡萄糖氧化酶法测定FBG，全自动生化分析仪测定TC、TG、LDL-C、HDL-C、MDA、SOD。

1.4.2胰腺组织形态学检查取胰腺以4%多聚甲醛固定，石蜡切片，常规HE染色，光镜下观察胰岛细胞的病理变化。

1.5统计学方法全部数据采用SPSS 16.0统计软件分析，计量资料用±s）表示，多组间比较用单因素方差分析和q检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2　结果

2.1血糖、血脂水平与NC组比较，DC组大鼠血清中FBG、TC、TG、LDL-C含量明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05），HDL-C水平明显下降，差异有统计学意义（P＜0.05）；经用药干预后，各治疗组大鼠血清中FBG、TC、TG、LDL-C含量明显降低，HDL-C含量明显升高，与DC组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；与TYD4组比较，TYD8组大鼠血清中FBG、TC含量明显降低，差异有统计学意义（P＜0.05），TG、LDL-C水平下降，HDL-C升高，但差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1　各组大鼠血糖、血脂水平的比较s）mmol/L

表1　各组大鼠血糖、血脂水平的比较s）mmol/L

注：与NC组比较，**表示P＜0.01；与DC组比较，△△表示P＜0.01；与TYD4组相比，★表示P＜0.05，★★表示P＜0.01，※表示P＞0.05。

组别NC组DC组TYD4组TYD8组只数12 12 12 12 FBG 5.82±1.12 22.57±2.84**14.91±2.48△△10.42±2.52△△★★TC 1.29±0.13 3.36±0.21**2.69±0.17△△2.50±0.19△△★TG 0.17±0.05 0.82±0.12**0.43±0.09△△0.34±0.07△△※LDL-C 0.33±0.10 0.79±0.08**0.66±0.08△△0.60±0.09△△※HDL-C 1.37±0.16 0.86±0.11**1.12±0.09△△1.16±0.09△△※

2.2各组大鼠血清SO D活性、M D A含量与NC组比较，DC组大鼠血清中MDA含量明显升高（P＜0.01），SOD水平明显下降（P＜0.01）；经用药干预后，各治疗组大鼠血清中MDA含量明显降低，SOD含量明显升高，与DC组比较有显著差异（P＜0.05）；与TYD4组比较，TYD8大鼠血清中MDA含量明显降低（P＜0.05），SOD水平明显上升（P＜0.01）。见表2。

2.3胰岛细胞的病理学变化光镜下观察：NC组大鼠胰岛清晰可辨且体积较大，胰岛细胞的数量最多且细胞分布均匀，细胞核居中，胞浆丰富均匀；DC组大鼠胰岛体积缩小，细胞数量减少，分布稀疏，腺泡细胞间有明显的脂肪空泡，胞浆疏松，嗜酸性染色明显减弱，细胞核固缩，胰岛内有少量的淋巴细胞浸润；与DC组比较，各治疗组大鼠胰岛细胞有不同程度的修复增生，胰岛体积相对增大，细胞数目相对增多，胞浆较丰富。见图1。

表2　各组大鼠血清SO D活性、M D A含量比较±s）

表2　各组大鼠血清SO D活性、M D A含量比较±s）

注：与NC组相比，**表示P＜0.01；与DC相比，△表示P＜0.05，△△表示P＜0.01；与TYD4组比较，★表示P＜0.05。

组别NC组DC组TYD4组TYD8组例数12 12 12 12 SOD/（nU·mL-1）261.40±61.58 143.59±15.09**190.86±28.34△234.35±46.46△△★MDA/（nmol·mL-1）3.69±0.87 7.24±1.68**5.93±0.71△4.68±0.83△△★

图1　各组大鼠胰腺组织HE染色（×400）

3　讨论

胰岛素抵抗和β细胞功能障碍是2型糖尿病主要发病机制［4-9］。本实验先采用高糖高脂饮食喂养大鼠，诱导其产生胰岛素抵抗，并引起血脂升高，继以小剂量链脲佐菌素腹腔注射，破坏大鼠胰岛β细胞，造成大鼠胰岛素分泌缺陷，成功复制出与临床2型糖尿病心肌病的发生发展过程较相似的2型糖尿病心肌病大鼠模型［10-14］。大量研究表明高血糖是诱发糖尿病心肌病的主要病因。长期高血糖刺激，诱导氧化应激反应，产生过量高活性的自由基，导致心肌细胞坏死，心肌肥厚、纤维化，影响心脏正常功能，最终导致糖尿病心肌病的发生［15-17］。

中医学中并无糖尿病心肌病之名，大部分医家将其归属于“消渴”“胸痹”“真心痛”等范畴。中医认为消渴病经久不愈，耗气伤阴，导致气阴两伤，久病及心，因虚致瘀，瘀血痹阻心脉，形成消渴病心病即糖尿病心肌病。气阴两虚，瘀血阻络为其主要病机。

通络玉液汤是在玉液汤、生脉散原方基础上加减化裁而成，具有益气养阴、活血通络之效。本实验显示，模型组大鼠FBG升高，血清中MDA水平升高，SOD活性下降，TC、TG、LDL-C增高和HDL-C降低，与文献描述一致。给予通络玉液汤干预后，糖尿病心肌病大鼠FBG、MDA水平明显下降，SOD活性明显上升，TC、TG、LDL-C降低和HDL-C增高，且随干预时间的延长，治疗效果更加显著，表明通络玉液汤的抗氧化作用可能是改善糖脂代谢紊乱、修复胰岛β细胞的作用机理之一。

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The Effects of TongLuo YuYe Tang on Oxidation Index，Glucose and Lipid Metabolism of the Rats with Type Two Diabetic Cardiomyopathy

LI Shuzhen，YANG Xiaohui，CUI Maoxiang，ZHANG Lanlan Cangzhou Medical College，Cangzhou 061001，China

Objective：To explore the mechanism of TongLuo YuYe Tang improving glucose and lipid metabolism of type two diabetic cardiomyopathy（DC）rats and its improvement effects.Methods：DC rat model was prepared by the method of high sugar and high fat diet，and peritoneal injection of small dose of streptozotocin.All 48 rats were randomized into four groups：normal control group，DC group，the group of TongLuo YuYe Tang for four weeks and the group of TongLuo YuYe Tang for eight weeks，the levels of FBG，TC，TG，LDL-C and HDL-C，the contents of MDA and the activity of SOD in the rats were detected，pathological changes of islet cells were observed after dealing in four to eight weeks respectively.Results：The levels of FBG，TC，TG，LDL-C and MDA decreased obviously in the medication groups（P＜0.05），the level of HDL-C and the activity of SOD rose notably（P＜0.05），as the intervention time prolonged，therapeutic effects became more evident.Conclusion：TongLuo YuYe Tang could improve the disorder of glucose and lipid metabolism and repair islet β cells by antioxidant effects.

TongluoYuye Tang；type 2 diabetic cardiomyopathy；glucose and lipid metabolism；antioxidation

R285.5

A

1004-6852（2016）06-0004-03

2015-12-28

2013年沧州市科学技术研究及发展指导计划项目（编号131302077）。

李淑贞（1971—），女，硕士学位，副教授。研究方向：中医药防治糖尿病、心肌病。