朱 烈，周 宏，李旦阳，许敏球

（宁波市鄞州区农业信息与农产品质量检测服务中心，浙江　宁波　315192）



定虫隆、虫酰肼和茚虫威在花菜中的残留动态研究

朱 烈，周 宏，李旦阳，许敏球

（宁波市鄞州区农业信息与农产品质量检测服务中心，浙江宁波315192）

摘 要：研究建立了定虫隆、虫酰肼和茚虫威3种农药在花菜中的液相串联质谱检测方法，并采用田间试验方法研究了定虫隆、虫酰肼和茚虫威在花菜中的残留消解动态规律。结果表明：采用乙腈提取，PSA净化，净化液经氮气吹至近干后用1 mL 0.1%甲酸溶液/乙腈（V︰V=8︰2）定容，采用液相串联质谱测定，外标法定量。在10～1 000 µg/kg添加水平范围内，定虫隆、虫酰肼和茚虫威在花菜中添加回收率在70.5%～98.4 %之间，变异系数为5.9%～9.1 %，在花菜的检出限分别为2.5、0.25和0.5 µg/kg，符合农药残留检测分析的要求。田间残留试验表明：定虫隆、虫酰肼和茚虫威在花菜中降解符合动力学曲线，在花菜中的消解半衰期分别为2.6、4.2和1.7 d。

关键词：定虫隆；虫酰肼；茚虫威；花菜；残留；消解；液相串联质谱

定虫隆、虫酰肼和茚虫威是3种高效低毒农药，对蔬菜上的小菜蛾、甜菜夜蛾、斜纹夜蛾、菜青虫等害虫均有良好防效［1-5］。花菜是我国广泛种植且深受老百姓喜爱的蔬菜，近年来在生产上广泛推广使用这3种农药防治斜纹夜蛾、菜青虫和甜菜夜蛾等害虫。研究采用快速样品前处理技术和液相色谱串联质谱方法分析定虫隆、虫酰肼和茚虫威花菜中的残留量及田间消解状况，以期为定虫隆、虫酰肼和茚虫威在花菜生产中的安全应用提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验试剂有乙腈、甲酸（HPLC级），氯化钠、无水硫酸镁（分析纯）。供试药剂为定虫隆、虫酰肼和茚虫威，其标准品纯度≥98.0 %（德国Dr.Ehrenstorfer.GmbH公司）。PSA 填料（Agilent公司），40～60 µm。供试作物花菜种植于宁波市鄞州区。

主要试验器材有Acquity UPLC XevoTM TQ MS液相色谱串联质谱仪（美国Waters公司）、色谱柱Acquity UPLC BEH C18柱（2.1 mm×100 mm，1.7 µm）、氮吹仪、超声波清洗器、匀质器（IKA T25）、离心管、容量瓶等。

1.2 田间试验设计

试验共设3个处理，分别为5%定虫隆乳油（1 000倍）、5%虫酰肼乳油（1 500倍）、10%茚虫威乳油（1 000倍）和空白对照；田间试验设计参照NY/T 788-2004农药残留试验准则进行，每个处理重复3次，每个小区面积30 m2，小区按照浓度由低到高排列，小区间设保护行。在花菜生长到成熟个体一半大小时施药，施药方式均为对水手动均匀喷雾。

喷药前以及喷药后1 h、1 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d、21 d、28 d采样。每小区随机取蔬菜样品6株，总量不少于3 kg；蔬菜切碎混匀，四分法留样，所有样品用塑料袋封装、编号，贮存在-20℃冰箱中保存待测。

1.3 分析方法

1.3.1 提 取 称取5.00 g花菜样品于100 mL离心管中，加入20.0 mL乙腈，在匀质机中以10 000 r/min的速度匀质1 min，加入5 g氯化钠和5 g无水硫酸镁，盖上盖子，剧烈震荡1 min后以5 000 r/min离心3 min，使乙腈和水相分层，吸取上层乙腈提取液待净化。

1.3.2 净 化 取3.00 mL上层乙腈溶液于10 mL刻度离心管中，离心管中事先加入50 mg PSA，手动振摇1 min，5 000 r/min离心3 min，准确吸取1.00 mL净化液在40℃水浴中氮气吹至近干，残渣用1.00 mL0.1%甲酸/乙腈溶液（V︰V=8︰2）溶解，在旋涡混合器上混匀，过0.2 μm滤膜后备用。

1.3.3 色谱条件 （1）HPLC条件：仪器为Acquity UPLC XevoTM TQ MS液相色谱串联质谱仪；色谱柱为Acquity UPLC BEH C18柱。流动相A为0.1%甲酸水溶液，流动相B为乙腈，梯度淋洗。梯度洗脱程序：0～0.5 min，20%B；0.5～3.5min，20%～90%B； 3.5～4.5 min，90%B；4.5～5.1 min，90%～20% B；5.1～6.5 min，20%B。流速：0.3 mL/min。柱温：30℃。进样体积：10 μL。（2）MS/MS条件：采用电喷雾离子源ESI（+）进行分析；毛细管电压3.0 kV；锥孔电压12 V；离子源温度150℃；锥孔反吹气流量50 L/h；RF透镜电压0 V；脱溶剂气温度5 000℃；脱溶剂气流量1 000 L/h。质量分析器条件：分析器1低端分辨率与高端分辨率皆为14 V；入口透镜电压为1 V；出口电压为3 V；分析器2低端分辨率与高端分辨率都为15 V。多离子反应检测模式检测（MRM），各物质的分析条件详见表1。

表1 MRM监测模式下氯虫苯甲酰胺质谱条件

1.3.4 标准曲线绘制 采用外标法定量，以1.3.3的色谱条件进样检测分析，根据峰面积与进样浓度绘制标准曲线。其中，定虫隆标样稀释成0.5、5、50、200、500 µg/L的标准溶液，虫酰肼标样稀释成0.1、2、20、50、200 µg/L的标准溶液，茚虫威标样稀释成0.2、5、20、50、200 µg/L的标准溶液再进行检测。

1.3.5 添加回收率 将空白花菜样品切碎，经植物组织捣碎机高速捣碎，称取5.00 g样品于100 mL离心管中，向其中分别添加定虫隆、虫酰肼和茚虫威标准溶液，添加浓度分别为10.0，100和1 000 µg/kg，每个浓度设3次重复，并按1.3的分析方法测定回收率。

2 结果与分析

2.1 各农药的标准曲线

经基质加标试验确定定虫隆、虫酰肼和茚虫威的基质效应均不明显，因此研究采用外标法对3种农药进行定量，检测得到定虫隆的线性回归方程为y=43.729x+165.23，相关系数R=0.997 1；虫酰肼的线性回归方程为y=836.39x+3187.9，相关系数R=0.996 8；茚虫威的线性回归方程为y=293.02x+522.2，相关系数R=0.999 0。结果表明，该试验中定虫隆、虫酰肼和茚虫威的分析测定方法符合农药残留检测要求。

2.2 方法的回收率、精密度和最低检出浓度

由表2可知，定虫隆在花菜样品中的添加回收率在80.9%～87.4%之间，变异系数为5.9% ～8.4%；虫酰肼在花菜样品中的添加回收率在88.5%～98.4%之间，变异系数为6.6%～9.3 %；茚虫威在花菜样品中的添加回收率在70.5%～80.5%之间，变异系数为5.6%～9.1 %。采用1.3的分析方法，定虫隆、虫酰肼和茚虫威的检出限分别为2.5、0.25、0.5 µg/kg，符合我国农药残留最低检出浓度的要求。

表2 定虫隆、虫酰肼和茚虫威在花菜中的添加回收率及变异系数

2.3 定虫隆、虫酰肼和茚虫威在花菜中的消解动态

定虫隆、虫酰肼和茚虫威在花菜中的消解动态田间试验结果见表3。定虫隆、虫酰肼和茚虫威在花菜中的原始沉积量分别为0.898、0.499和0.417 mg/kg，施药7 d后在花菜中的降解分别达到93.21%、93.59% 和97.36%。经统计分析得出定虫隆、虫酰肼和茚虫威在花菜中降解符合动力学曲线，其中定虫隆在花菜的消解方程式为Ct=0.399 5e-0.270 3t，R2=0.810 3，半衰期为2.6 d；虫酰肼在花菜的消解方程式为Ct=0.146 8e-0.165 1t，R2=0.798 1，半衰期为4.2 d；茚虫威在花菜的消解方程式为Ct=0.210 9e-0.417 2t，R2=0.927 8，半衰期为1.7 d。

表3 定虫隆、虫酰肼和茚虫威在花菜中的消解试验结果（mg/kg）

3 结 论

研究采用快速样品前处理技术和液相色谱串联质谱法，建立了同时检测定虫隆、虫酰肼和茚虫威3种农药在花菜中残留量的分析方法，并对3种农药在花菜中的消解动态进行了分析。结果表明，该检测方法简便、快速、重现性好、准确度高，添加回收率和检出限都能满足3种农药同时定量分析的要求，具有一定的新颖性和实用性。田间残留消解试验结果表明，定虫隆、虫酰肼和茚虫威在花菜中的原始沉积量分别为0.898、0.499和0.417 mg/kg，在花菜中降解符合动力学曲线，消解半衰期分别为2.6、4.2和1.7 d。从检测数据来看，定虫隆、虫酰肼和茚虫威在花菜中均可较快地消解。据检索，定虫隆、虫酰肼和茚虫威在花菜中MRL值在我国分别为2、0.5和1 mg/kg，在日本分别为2、0.5和3 mg/kg［6-8］。参考两国MRL值，结合研究中3种农药在花菜中的消解动态规律，定虫隆、虫酰肼和茚虫威在花菜生产上施用较安全，建议安全间隔期为7 d。

参考文献：

［1］ 许小龙，顾中言，韩丽娟. 杀虫剂对小菜蛾、甜菜夜蛾、斜纹夜蛾的毒力研究［J］. 华东昆虫学报，2002，11（1）：81-85.

［2］ 陈彩霞，许燎原，陈庭华，等. 几种生物农药防治小菜蛾药效比较［J］.植物保护，2001，27（4）：43-44.

［3］ 冯 坚. 双酰肼类昆虫生长调节剂研究开发进展［J］. 现代农药，2004，3（2）：4-8.

［4］ 徐玉红，刘国光，吕文英. 共存物质对虫酰肼水解作用的影响［J］.农药，2006，45（7）：472-474.

［5］ 陈永兵，何紫萱，陈盂贵. 15%茚虫威悬浮剂防治甜菜夜蛾幼虫［J］.植物保护，2004，30（4）：83-84.

［6］ 李畅方，何 强，徐伟松，等. 茚虫威在甘蓝和土壤中的残留量及消解动态研究［J］. 农药科学与管理，2005，26（12）：8-11.

［7］ 周 航，王京文，杨文叶，等. 虫酰肼和呋喃虫酰肼在京葱上的消解动态［J］. 浙江农业科学，2010，（6）：1349-1350.

［8］ GB 2763—2014，食品中农药最大残留限量［S］.

（责任编辑：成 平）

Degradation of Chlorfluazuron， Tebufenozide and Indoxacarb in Cauliflower

ZHU Lie，ZHOU Hong，LI Dan-yang，XU Min-qiu
（Yinzhou Agricultural Information and Agricultural Products Quality Inspection Service Center， Ningbo 315192， PRC）

Abstract：A high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometric method was developed for the determination of chlorfluazuron， tebufenozide and indoxacarb in cauliflower. Meanwhile the residue and degradation of three kinds of pesticides in cauliflower were investigated. The samples were extracted with aeetonitrile and purified by PSA. The solution after purification was evaporated to nearly dry by nitrogen blowing and redissolved with 1 mL 0.1% formic acid-water： aeetonitrile （8∶2）by volume. The mass spectrometer was operated under multiple reaction monitoring （MRM） mode. The experimental results showed that the average recoveries of chlorfluazuron， tebufenozide and indoxacarb stood with a range of 70.5%-98.4% at three spiking levels from 10 µg/kg to 1 000 µg/kg with their relative standard deviations of 5.9%-9.1% in cauliflower. The lowest concentrations detected were 2.5， 0.25， and 0.5 µg/kg in cauliflower， respectively. The degradation of three kinds of pesticides in cauliflower could be described with kinetic curve. The half-life of chlorfluazuron， tebufenozide and indoxacarb were 2.6， 4.2 and 1.7 d in cauliflower， respectively.

Key words：chlorfluazuron； tebufenozide； indoxacarb； cauliflower； residues； degradation； liquid chromatography-tandem mass spectrometric

中图分类号：S481+.8

文献标识码：A

文章编号：1006-060X（2016）05-0061-03

DOI：10.16498/j.cnki.hnnykx.2016.05.018

收稿日期：2016-03-25

基金项目：宁波市农科教结合项目（2012NK18）

作者简介：朱 烈（1980-），男，浙江乐清市人，农艺师，主要从事农药残留分析和农产品质量安全监测工作。