□张国红 张沥引（四川绵阳国红动物医院）

邓远明（四川梓潼县文昌镇畜牧兽医站）

猪圆环病毒病研究与综合防控策略

□张国红 张沥引（四川绵阳国红动物医院）

邓远明（四川梓潼县文昌镇畜牧兽医站）

（接上期）

5 公共卫生安全意义与疫苗研究

Mauro等指出：人的TT病毒（TTV，一种肝炎病毒）与其他动物圆环病毒有很多特异的型，尤其是鸡贫血病毒（CAV）。目前尽管只有一个学者报道过在给肝炎（非AG型）患者输血后，能分离出TTV，该病毒也属于动物圆环病毒属，并且在该病例中检测出了猪圆环病毒（PCV）抗体。由于该病毒很广泛地存在于猪体内，人和猪在环境接触、食物链关系等方面联系非常紧密，况且近年来不断出现的具有重大公共卫生意义的人兽共患病 （如SRRS、猪链球菌病、禽流感和人流感等）的暴发与流行，使人们有理由担心PCV和TTV在公共卫生意义上的联系。另外，随着基因治疗、器官移植等现代手段的需要和发展，因猪和人的亲源关系很近，器官大小和人匹配，于是人们提出以猪为研究模型和对象，将来应用经基因改造的猪器官移植到人体内。这一科学思路如果将人和动物的传染病医学专家排除在外，有可能引起人类感染包括PCV在内的很多新的传染病，这是我们都应该关注的问题。

自该病在我国报道以来，其免疫学及生物制品学方面的研究和探索很快成为一个热点。我国开展的研究主要包括以下几方面：

5.1 杆状病毒载体疫苗的研制。2005年，刘长明等将猪圆环病毒2型的ORF2在昆虫杆状病毒中进行了表达，该重组蛋白具有良好的免疫活性反应。昆虫细胞系表达系统要取得最佳的结果，必须有优质的培养介质和条件，对氧的需求量很大，大规模生产中必须搅拌，但搅拌过程又可能对细胞造成很大的压力。该系统无法进行连续性表达，糖基化方式与哺乳动物细胞存在一定差异，糖侧链甘露糖的成分较高，而复合寡糖缺乏，且糖蛋白的糖链结构多为简单的不分支结构，此外，宿主细胞生长慢，培养基昂贵。

5.2 伪狂犬病毒载体疫苗的研制。琚春梅等对表达了猪圆环病毒2型ORF2蛋白的重组为狂犬病病毒进行了生物学特性的研究，结果表明该重组病毒具有良好的遗传稳定性，能诱导小鼠产生特异性免疫应答，并对强毒的攻击具有一定的保护作用。

5.3 痘病毒载体疫苗的研制。金宁一等对 PCV2核酸疫苗和痘病毒载体表达PCV2 ORF2的亚单位疫苗作了比较，发现痘病毒载体表达系统制备的亚单位疫苗比核酸疫苗抑制PCV2病毒复制的效果要好，在临床试验中能使猪抵抗PCV2的攻击。

5.4 腺病毒载体疫苗的研制。王先炜等构建了含有猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组腺病毒，为研制PCV2重组腺病毒基因工程疫苗进行了探索。

5.5 嵌合病毒的研制。刘新文等构建了具有感染性的嵌合猪圆环病毒PCV2-1，该重组病毒有望成为圆环病毒疫苗的候选株。

5.6 核酸疫苗的研制。金宁一等构建了猪圆环病毒2型核酸疫苗，该疫苗能诱导小鼠产生良好的细胞免疫和体液免疫。

目前，一些国家已经研制出商品化的疫苗用于猪断奶后多系统衰竭综合征（PMWS）的防治，主要包括灭活疫苗、重组疫苗、DNA疫苗及嵌合病毒疫苗等。

我国国内也已有自主研发的猪圆环病毒灭活疫苗，如猪圆环病毒2型灭活疫苗SH株、猪圆环病毒2型灭活疫苗LG株和猪圆环病毒2型灭活疫苗DBN-SX07株上市。猪圆环病毒2型灭活疫苗LG株由哈尔滨兽医研究所研制，该产品以猪圆环病毒2型遗传标记毒株LG株为毒种，经细胞培养传代，优化了病毒增殖条件，由获得较高效价的病毒培养物制备而成。该产品采用的ISA15V佐剂属于水包油剂型，可刺激接种动物产生快速免疫应答反应，抗体效价高、持续时间长。猪圆环病毒2型灭活疫苗SH株是以南京农业大学为主要研发单位研究开发的，以PCV2分离株SH株接种PK15-B1克隆细胞制备抗原，浓缩后，经甲醛溶液灭活，与矿物油佐剂混合乳化制备而成。猪圆环病毒 2型灭活疫苗DBN-SH07株是由北京大北农集团研究开发的，以PCV2分离株DBN-SH07株接种敏感细胞株PK-15A培养，收获细胞培养物，经β-丙酰内酯灭活后，与矿物油佐剂混合乳化制备而成。上述3种获准生产的疫苗均为常规灭活疫苗。

6 综合防制措施

世界各国目前控制本病的经验证明，对共同感染源作适当的主动免疫和被动免疫对于本病有明显的效果。选择性的预防性投药和治疗，对控制细菌性的混合感染或继发感染，同样有效。但是至今对PCV2引起的相关疾病的病原和致病机制尚未完全了解，因此，还不能完全依赖特异性防制措施，只有同时结合良好的饲养管理，才能更好的控制疾病的发生。

在PCV2的防治中，有人尝试过用血清疗法，可达到一定的效果。其方法是采集本场育肥猪的血清，注射给断奶仔猪，一般采用腹腔注射。此法必须考虑供血者的选择、血清处理、血清贮存及注射方法等，并且只能在本场猪中采集血清。此外，也有通过“感染”物质的主动免疫来防制本病的报道。所谓的“感染”物质，通常是指本场感染猪的粪便、死产胎猪及木乃伊胎等，通过用这种“感染”物质对母猪，特别是初产母猪在配种前饲喂，能收到较好的效果。若对有一定抗体的母猪在妊娠80天后再作补充饲喂，则可产生高水平的免疫反应，并通过初乳传给仔猪。这种方法不仅对防制本病有效，而且对其他肠道病毒引起的繁殖障碍也有较好的效果。

此外，良好的饲养管理对于本病的防制至关重要。在这方面，应注意以下几个问题：首先，对病猪进行隔离饲养，严重感染猪可进行扑杀、焚烧等，以清除传染源。其次，要减少猪的应激。过早断奶、断奶后更换饲料及断奶后并窝并群都易造成猪的应激，因此，建议在有此病存在的猪场，仔猪断奶的日龄可以延迟至28天或35天，断奶后要继续饲喂断奶前的饲料至少l0天，对于断奶后的仔猪应采用小群或小栏原窝原群饲养，小栏间要有实体隔墙，这样可以减少相互间的争斗，并减少窝与窝之间的水平传播。过早或多次的疫苗注射也可引起免疫刺激及猪的免疫应激，从而促使仔猪产生临床症状，因而必须按照猪场或周边的疫病情况合理制定免疫程序，避免过早或多次对仔猪进行免疫。此外，降低饲养密度，注意通风和保暖，为猪群营造舒适的环境对减少疾病的发生亦相当重要。最后，要强化猪场的生物安全。猪场的生物安全不但要使用于猪场与外界之间，而且还要使用于猪场内部，即猪舍与猪舍之间。在猪场与外界之间，应减少后备母猪的购入数量。英国的一项调查认为，母猪的高更新率可能是造成猪圆环病毒相关疾病的一个危险因子，由于健康状态来源不同的种猪，其免疫力各不相同，造成猪群不稳定的免疫状态，而且大量引入种猪，有可能带入某种疾病，一旦发生某种疫病，可能造成猪圆环病毒相关疾病的加重或暴发。此外，断奶猪舍在进猪前必须严格清洗消毒，同时执行全进全出的饲养制度。在每个猪舍的入口处必须设计消毒池，饲养人员在进入前必须消毒。

6.1 Madec黄金法则

法国Madec等人进行了大规模猪场试验，其结果说明，环境控制方面严格完善的卫生措施对疾病控制有很高的价值。关于这些措施，Madec在2001年中期总结出了20条要点，后来在生产上归纳出了四条黄金法则（见下表），这对PCV的防治提供了一个可以借鉴的蓝本。

Madec的黄金法则

6.2 提供良好的饲养条件与措施

3周龄仔猪圈舍温度为28℃，每隔一周调低2℃，直至常温；批与批之间不混群。断乳期：猪圈小，原则上一窝一圈，猪圈分隔坚固；坚持严格的全进全出，并有与邻舍分割的独立粪尿排出系统；降低饲养密度（＞0.33平方米/仔猪）；增加喂料器空间（＞7厘米/仔猪）；改善空气质量（氨气＜10× 10-6）， 二氧化碳 （＜0.1%）,相对湿度（＜85%）；猪舍温度要适度。生长育肥期：猪圈小，壁式分隔；坚持严格的全进全出、空栏、清洗和消毒制度；从断奶后猪圈移出的猪不混群；整个育肥圈猪不再混群；降低饲养密度（＞0.75平方米/猪）；改善空气质量和保持圈舍温度。保育舍要有独立饮水和加药设施；严格的保健措施（断尾、断齿、注射时，严格消毒等）。将病猪及早移到隔离舍治疗或扑杀。

仔猪断奶后3～4周是预防猪圆环病毒病的关键时期。因此，最有效的方法和措施是尽可能减少对断奶仔猪的刺激。避免过早断奶和断奶后更换饲料，并在断奶前后的饲料中添加适当的复合多维、维生素和葡萄糖。断奶后要继续饲喂断奶前的饲料至少10天。避免断奶后并窝并群；避免在断奶前后1周内多次注射疫苗；降低饲养密度，减少应激反应，为仔猪提供舒适的环境。

6.3 适宜的疫苗接种

做好猪瘟、猪蓝耳病、猪细小病毒病、喘气病等疫苗的免疫接种工作。目前还没有有效的疫苗可以用来预防PCV的感染。虽然国内外已研制出基因工程苗、亚单位疫苗，但因PMWS并非仅由PCV引起, PCV-2的共同感染源很多，发病猪场首先要确定自身的共同感染源，并应用相应的疫苗对母猪实施合适的免疫，对确保妊娠期胎儿和哺乳仔猪的安全相当重要，与此同时，通过病原检测确定母源抗体消失后的仔猪和育成猪的共同感染源，采用合适的疫苗和药物防治，才能收到应有的效果。

近年来，在PCV2相关疾病的疫苗研究方面，许多学者进行了有益的探索。目前，有关该病的疫苗研究仅限于全病毒灭活疫苗、DNA疫苗、PCV1-PCV2重组疫苗及Cap蛋白基因工程亚单位疫苗，并取得重要研究进展。疫苗免疫作为防控PCV-2的主要手段，国内外研究者正在着力研究与开发各种PCV-2疫苗。国内多家兽用生物制品制造企业已有PCV-2灭活疫苗与亚单位疫苗注册上市，这些疫苗对我国PCV-2的控制发挥了巨大的作用。

6.4 综合抗感染防治

我们不主张饲养者把精力放在治疗上，因为某一种单一的治疗方法均不能获得显效，用抗生素治疗猪圆环病毒病无太大的效果，仅能减少继发性的细菌感染。但在实践中，采用定期保健和有序的疫苗免疫，可较好控制本病的发生。

6.4.1 群体防治

仔猪用药：哺乳仔猪在3、7、21日龄各注射一次赛利健10毫升+血尔康20毫升（两者混合后按0.2毫升/千克体重肌注）；断奶前1周至断奶后1周，在每1000千克饲料中添加 阿克舒1千克 （主要成分：阿莫西林+克拉维酸钾）+替服欣（主要成分：替米考星）1千克+速克（主要成分：紫锥菊提取物、金丝桃素），断奶前后各饲喂1周。

母猪用药：在母猪产前1周和产后1周，在每1000千克饲料中添加圆蓝口炎消（主要成分：黄连、黄芩、板蓝根、连翘等）2千克及多西福（主要成分：多西环素、蜂胶）1千克进行饲喂。

6.4.2 个体治疗

6.4.2.1 混合型感染

第一天：上午葡甲胺10毫升+金炮筒10毫升+双黄连10毫升，混合，按 0.4毫升/千克体重肌肉注射；下午博导1号注射液10毫升+猪白细胞干扰素8万国际单位，混合，按0.2毫升/千克体重注射。

第二天：上午特级头孢5毫升+大力神10毫升，混合，按0.2毫升/千克体重注射；下午博导1号注射液10毫升+猪白细胞干扰素8万国际单位，混合，按0.2毫升/千克体重注射。

第三天：上午红氟5毫升+攻克链红10毫升，混合，按0.2毫升/千克体重注射；下午博导1号注射液10毫升+猪白细胞干扰素8万国际单位，混合，按0.2毫升/千克体重注射。

6.4.2.2 皮炎肾病综合征

聚能核肽（转移因子）10毫升+九菌败毒针（鱼腥草提取物）20毫升,混合，按0.2毫升/千克体重肌肉注射，另一侧按0.2毫升/千克体重肌肉注射百草神针（板蓝根），每日一次，连用三日。

6.4.2.3 圆环呼吸与多系统衰竭综合征巨能1号（白细胞介素）按0.2毫升/千克体重肌肉注射，另一侧按0.1毫升/千克体重肌肉注射金泰妙（泰妙菌素），每日一次，连用三日。

6.4.2.4 增生性肠炎

高免肽血清（黄芪提取物）10毫升+百草神针 （穿心莲提取物）10毫升,混合，按0.4毫升/千克体重肌肉注射，另一侧赛利健（盐酸头孢噻呋）10毫升+痢炎双杀（大蒜苦参提取物+抗菌肽），混合，按0.2毫升/千克体重肌肉注射，一日一次，连用三次。

6.4.3 中兽医辩证

圆环病毒感染在中兽医学领域应归属于瘟疫范畴。瘟疫为感受异气（疫气、杂气、戾气、疠气），病邪从口鼻侵入动物机体而发病。在伏邪理论中，阐述病邪潜伏的机理时，常认为邪气伏匿于某特殊部位，这个特殊的部位就是膜原。膜原为瘟疫的主要病位中心，邪伏膜原，如鸟栖巢，如兽藏穴，营卫所不关，药石所不及。膜原与腠理互为表里，与玄府相关为用，邪伏膜原，必然影响到玄府腠理。玄府腠理闭郁，气液不步，营卫受伤，气血不畅，痰浊瘀血内生，损伤脏腑，即邪气盘踞于膜原，内外隔绝，表气不能通于内，里气不能通于外。治疗瘟疫，应避疫邪猖獗之势，宜疏达膜原，开通玄府，使毒邪溃退，让邪气分离膜原。邪毒即离膜原，乃观其变，或出表，或入里，然后可导邪而去，邪尽方愈。邪离膜原，当导邪外出，同样要开通玄府郁结，畅通邪气的出路，疏利气机，因势利导，邪尽则病愈。

瘟疫为感受温热疫毒病邪所致，驱逐疫邪，清热解毒，其前提是开通玄府，未有玄府郁结而热能清、毒能解。所以，开通玄府，疏利宣导，畅达气机，透达伏邪为治疗瘟疫的原则。透、泄为瘟疫的主要治法。透、泄的目的是畅通出路，从腠理、玄府、诸窍达邪外出。凡治病，总宜使邪有出路，宜下出者，不泄之不得下也；宜外出者，不散之不得外也。邪既入，则以逐秽为第一要义。上焦如雾，升而逐之，兼以解毒；中焦如沤，疏而逐之，兼以解毒；下焦如渎，决而逐之，兼以解毒。

透重在向外疏透，开通玄府，畅达气机，达邪外出。有言：治病透字最为先，不得透字总不沾，在表宜透发，在里宜透穿。泄重在通泄六腑，六腑通则玄府亦通，又以通泄阳明为要，假大肠为去路，导邪外出，一窍通而百窍通也。

处方一：黄芪 150克、黄芩100克、板蓝根 70克、党参60克、茵陈50克、槟榔100克、金银花80克、连翘80克、厚朴80克、草果50克、甘草30克,每次煎水1000毫升，煎熬1小时，共煎3次，合并煎液浓缩至1500毫升,每千克体重口服0.5毫升，每天1次，连用3天。

处方二：荆芥150克、陈皮 150克、槟榔120克、杏仁200克、干姜100克、半夏100克、苦参60克、板蓝根70克、紫花地丁70克、穿心莲60克、桔梗80克、厚朴80克、草果50克,将所述原料药材混合后粉碎,每次煎水2000毫升，煎熬1小时，共煎3次，合并煎液浓缩至3000毫升,加酒精2000毫升，静置48小时后取上清液，回收酒精后得药液1500毫升,每千克体重口服0.2毫升，每天1次，连用3天。本方具有清热解毒、泻火通便、扶正祛邪、消肿散痈功能，对猪圆环病毒病引致的皮炎肾病综合征和肺炎综合征具有良好的治疗作用。

处方三：对圆环病毒引致的增生性肠炎兽医学认为，此类腹泻多由外感秽浊时邪，疫毒之气入里生湿发热而致，故有湿胜者泻之说。邪气入里，湿热内胜，脾不运湿，则泄泻。秽浊之气扰乱胃气，胃气上逆，出现呕吐。粪呈黄色或灰白色，舌红、脉数、苔腻均为湿热之象。方剂：党参 150克、土炒白术200克、干姜150克、甘草100克、茯苓200克、泽泻100克、桂枝100克、厚朴120克、草果60克、槟榔80克。水煎3次，得滤液3000毫升，每千克体重口服0.2毫升，每天1次，连用3天。