王旭平　赵丽倩　李东红　孙子梅　毕胜利,#　任　熙 　张雅莉　安和兵

0313-3022316；E-mail：zchbsl@163.com



窒息新生儿脐血胰岛素样生长因子1和免疫球蛋白水平变化*

王旭平1赵丽倩2李东红1孙子梅1毕胜利1,#任熙1张雅莉1安和兵1

0313-3022316；E-mail：zchbsl@163.com

【摘要】目的：观察窒息新生儿脐血中胰岛素样生长因子1(IGF-1)及其结合蛋白-3(IGFBP-3)和免疫球蛋白IgG、IgM、IgA以及补体C3、C4水平的变化。方法：选择临产急性胎儿窘迫孕妇，娩出新生儿正常者30例为窘迫组，娩出新生儿窒息者30例为窒息组，同期剖宫产正常新生儿30例为对照组。采集各组新生儿脐动脉血，用ELISA检测血清IGF-1和IGFBP-3水平；用免疫比浊法检测免疫球蛋白IgG、IgM和IgA及补体C3、C4含量。结果：窘迫组和窒息组新生儿脐血IGF-1、IGFBP-3、IgG、IgA水平均显著对照组(P<0.05)；窒息组新生儿脐血IGF-1、IGFBP-3、IgG、IgM、IgA、C3水平更低于窘迫组(P<0.05)。结论：窒息新生儿IGF-1、IGFBP-3减少，体液免疫功能低下。

【关键词】窒息新生儿；胰岛素样生长因子1；免疫球蛋白；补体

在世界范围内，每年发生新生儿窒息(Neonatal Asphyxia)大约400万例，超过100万患儿由于严重缺氧而死亡[1]；即使从急性缺氧阶段恢复过来，大部分患儿也可能发展为缺血缺氧性脑病，出现永久性神经系统损害，部分患儿甚至会出现不同器官或系统功能障碍[2]。由于新生儿窒息的病因复杂、缺氧持续时间及个体反应差异显著，使其愈后难以准确估计。胰岛素样生长因子1(Insulin-like Growth Factor 1，IGF-1)是一种和胰岛素原结构高度同源、包括70个氨基酸残基，分子量约7.6 kD的多肽，分布于肝脏、脑、眼、血液、骨骼等组织和器官以及胚胎组织[3]。研究表明，IGF-1通过内分泌、旁分泌或自分泌方式产生后，与胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGF Binding Protein-3，IGFBP-3)结合，对婴幼儿骨骼、心血管和脑发育起至关重要的作用。已有研究表明，窒息新生儿外周血及脐带血IGF-1含量分别明显低于正常新生儿[4-6]，且与新生儿发生急性肾功能衰竭相关[7]，但对IGFBP-3水平变化未见报道；同时鉴于重度窒息患儿外周血血清免疫球蛋白及补体水平呈明显降低[8]；考虑脐血中体液免疫指标也可能存在变化。所以，本文检测分析了窒息新生儿脐血IGF-1和IGFBP-3以及体液免疫指标免疫球蛋白IgG、IgM和IgA以及补体C3、C4的变化，为临床研究窒息新生儿生长发育和免疫状态提供实验室依据。

1资料与方法

1.1对象和分组

2012-09—2014-12，来河北北方学院附属第二医院产科分娩孕妇、年龄21-40岁，孕周37-42周；排除存在高血压、心脏病、营养不良或肥胖、糖尿病以及肝肾功能障碍者。临产时60例出现急性胎儿窘迫孕妇，娩出正常新生儿30例(窘迫组)，娩出窒息新生儿30例(窒息组)。另选同期正常剖宫产新生儿30例为对照组。急性胎儿窘迫诊断标准(至少符合以下一项)[9]：(1)胎心率>160次/min或<120次/min，晚期减速或重度变异减速；(2)羊水Ⅱ-Ⅲ度胎粪污染；(3)胎动由频繁至减少甚至消失。新生儿窒息诊断标准：胎儿娩出后，进行1分钟阿普加(Apgar)评分，评分内容包括皮肤颜色、心搏速率、呼吸、肌张力及运动、反射等五项体征[10]；Apgar评分≤7分，为出现新生儿窒息[11]。

1.2标本采集

胎儿娩出后，迅速采集脐带动脉血8ml，2 500r/min离心15min，分离血清—70℃冰箱储藏批检。

1.3检测指标和方法

从冰箱取出血清标本，常温复融后检测以下指标。

1.3.1IGF-I、IGFBP-3：特异性人IGF-I和IGFBP-3试剂盒购自上海巧伊生物科技公司(批号20130107-20140430)，采用ELISA严格按试剂盒说明书检测血清IGF-I和IGFBP-3含量。

1.3.2体液免疫指标：使用全自动生化分析仪(日本日立7180型)，采用免疫比浊法上机检测血清IgG、IgM和IgA及补体C3、C4的含量。试剂购自四川迈克生物科技股份有限公司，IgG批号：0312032；IgM批号：1013041；IgA、C3、C4批号：0314021、0315022、0316203。

1.4统计学处理

2结果

2.1各组脐血IGF-1、IGFBP-3水平

组间比较，IGF-1和IGFBP-3差异均有统计学意义(P<0.01)。窘迫组IGF-1、IGFBP-3水平均显著低于对照组(t=6.021、10.326，P<0.01)；窒息组更低于窘迫组(t=11.087、13.509，P<0.01)。见表1。

表1　各组新生儿脐血IGF-1、IGFBP-3水平均=30)

注：与对照组比较，1)P<0.01；与窘迫组比较，2)P<0.01

2.2各组脐血免疫球蛋白和补体水平

组间比较，IgG、IgM、IgA和补体C3水平差异具有统计学意义(P<0.01)；各组补体C4水平差异无统计学意义(P>0.05)。窘迫组IgG和IgA水平显著低于对照组(t=2.786、3.601，P<0.01)，IgM和补体C3、C4与对照组无明显差异(t=0.841、1.826、1.221，P>0.05)；窒息组IgG、IgM、IgA、C3水平较窘迫组更低(t=4.406、8.516、6.399、3.727，P<0.01)。见表2。

表2　各组新生儿脐血IgG、IgM、IgA、C3、C4水平均=30)

注：与对照组比较，1)P<0.01；与窘迫组比较，2)P<0.01

3讨论

新生儿窒息是指围产期各种原因引起宫内窘迫或分娩过程中发生呼吸、循环功能障碍导致出生后1 min内未能建立有效自主呼吸而出现新生儿缺氧性损害，是产科临床研究的重点之一。为了进一步明确窒息对新生儿的损害，为临床防治提供实验室依据，本文检测分析了窒息新生儿脐血IGF-1及其结合蛋白以及体液免疫指标的变化。

IGF-1是婴幼儿发育非常重要的一种生长调节激素，与IGFBP-3结合后，半衰期显著延长，可以更加稳定持久地发挥生物学效应[3]。本研究结果显示，窒息新生儿脐血IGF-1含量显著降低，与相关文献[4-6]报道相一致；更为重要的是，本研究发现窒息新生儿脐血IGFBP-3含量表现出与IGF-1同样的变化趋势。而IGFBP-3水平降低可能是IGF-1不能发挥其正常生物学作用的前提。有研究表明，生长激素是IGF-1生成的最重要刺激信号，其与IGF-1协同发挥生物学效用[12]。另有研究发现，窒息新生儿生长激素水平显著下降，甚至持续到出生后5天[13]，由此提示窒息新生儿IGF-1、IGFBP-3水平降低可能与生长激素的减少有关。但具体机制有待进一步深入探讨。

最近，Zhu等[14]研究发现，IGF-1还是机体在生理和应激状态下体液免疫的重要调节介质，是机体免疫功能的重要保证。已有研究表明，重度窒息新生儿外周血免疫球蛋白和补体水平降低[15]，但能更早反映体液免疫的脐血免疫球蛋白及补体水平如何，未见报道。本文结果表明，窒息新生儿脐血IgG、IgM、IgA和补体C3水平显著降低，其原因可能与IGF-1的作用有关。研究发现，造血微环境中骨髓间质细胞产生的IGF-1在调节初级B淋巴细胞增殖过程中扮演关键性角色[16]；阻断IGF-1受体后，B淋巴细胞的增殖能力显著降低，IgM等的产量急剧下降[17]；而且，IGF-1与骨髓、胸腺和各级淋巴结内的淋巴细胞分化、成熟和功能维持有关，并参与成熟B淋巴细胞和间质巨噬细胞免疫球蛋白的产生[18]。因此推测，IGF-1水平降低可能是窒息新生儿出现体液免疫抑制的重要机制。

综上所述，本文发现窒息新生儿脐血中IGF-1、IGFBP-3水平显著降低，并且伴随着以免疫球蛋白IgG、IgM、IgA和补体C3降低为特征的体液免疫抑制。提示临床，IGF-1水平监测可作为窒息新生儿生长发育和免疫状态的重要判断指标，也可能作为干预窒息新生儿免疫低下的新靶点。

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王旭平(1976-)，女，汉族，副主任医师，从事新生儿窒息的基础与临床研究

参考文献

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Changes of Insulin-like Growth Factor 1 and Immunoglobulin Indices Umbilical Cord Blood from Asphyxia Neonatorum

WANG Xu-ping1, ZHAO Li-qian2, LI Dong-hong1, SUN Zi-men1, BI Sheng-li1，#, REN Xi1, ZHANG Ya-li1, AN He-bing1

1Department of Gynecology and Obstetrics, Affiliated Second Hospital, Hebei North University, Xuanhua 075100, China;2People's Hospital of Jinzhou City, Jinzhou 052260, China；#Corresponding author

【Abstract】Objective: To analyze the changes of insulin-like growth factor 1 (IGF-1) and IGF binding protein-3 (IGFBP-3), immunoglobulin G (IgG), IgM, IgA and complement 3 (C3), C4 and humoral immunity indices in umbilical cord blood of from cases subjected to asphyxia neonatorum.Method: Sixty pregnant women with acute fetal distress were divided into fetal distress group and asphyxia neonatorum group (n=30). In fetal distress group, the neonatus was normal, as well as the neonatus had asphyxiation in asphyxia neonatorum group. Otherwise, thirty normal pregnant women were as control group. After childbirth, the umbilical cord blood was obtained for the detection of IGF-1 and IGF binding protein-3 (IGFBP-3) contents in serum using the method of ELISA, IgG, IgM, IgA and C3, C4 contents in serum using the method of immunoturbidimetry.Results: The contents of IGF-1, IGFBP-3, IgG, and IgA in the asphyxia neonatorum and fetal distress groups were lowered significantly than those of the fetal distress and control groups (P<0.05). Meanwhile, the contents of IGF-1, IGFBP-3, IgG, IgM, IgA, and C3 in the asphyxia neonatorum fetal distress group were lowered significantly than those of the fetal distresscontrol group (P<0.05). Conclusion: There remains asphyxia resulted in the decreases in IGF-1 and IGFBP-3, and humoral immunity down-function in the asphyxia newborns.

【Key words】Asphyxia neonatorum; Insulin-like growth factor 1; Immunoglobulin; Complement

作者简介：本文第一

[中图分类号]R722.12

[文献标识码]A

[文章编号]1005-1740(2016)01-0053-04

*[基金项目]河北省科学技术研究与发展计划(1227777135);张家口市科技局指令项目(12110065G-4)

本文2015-10-10收到，2016-01-06修回